Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
parodontale
Boala parodontal - cea mai frecvent
Clasificarea bolii
parodontale
1999 ADA (American Dental Association)
1.Gingivita
asociat cu biofilmul bacterian
neasociat cu biofilmul bacterian
2.Parodontita cronic (PC)
localizat
generalizat - >30% din dini sunt afectai
Clasificarea bolii
parodontale
3. Parodontita agresiv (PA)
localizat
generalizat >30% din dini sunt afectai;
Severitatea se apreciaz pe baza adncimii pungii
Clasificarea bolii
parodontale
6.Abcese ale esutului periodontal
abces gingival
abces parodontal
abces pericoronal
7.Parodontita asociat cu leziuni
endodontice
Clasificarea bolii
parodontale
nespecific
boala
parodontal este rezultatul elaborrii
de produi toxici de ctre ntreaga flora
a plcii.
Teoria specific - anumite tipuri de
plac sunt patogene iar patogenitatea
depinde de prezena sau de numrul
mare al unor microorganisme specifice .
Teoria ecologic
boala
parodontal
este
rezultatul
modificrilor habitatului (nutrieni, pH,
potenial redox):
selecia bacteriilor patogene este
influenat direct de schimbrile de
mediu;
boala nu are o etiologie specific;
orice specie cu anumite caracteristici
poate contribui la evoluia bolii.
Teoria ecologic
Astfel semnificaia clinic a speciilor nou
Grupul rou
Specii bacteriene
Veillonella parvula
Actinomyces odontolyticus
Streptococcus spp.
Eikenella corrodens
Capnocytophaga spp.
P. intermedia/ nigrescens
Micromonas micros
Campylobacter rectus
Fusobacterium nucleatum
Porphyromonas gingivalis
Tannerella forsythia, Treponema
Criterii de identificare a
patogenilor parodontali
animal de laborator;
s aib factori de virulen responsabili
de distrugerea esutului parodontal;
n lipsa inoculrii de patogeni
parodontali la animalele germ free nu
trebuie
s
apar
gingivite
sau
parodontite.
Microbiologia bolii
parodontale
Numrul total al bacteriilor din placa
Patogen
Sntate
PA
PC
BPN
Streptococcus
+++
Actinomyces
+++
Veillonella
Aggregatibacter
actinomycetemcomitans
++
Capnocytophaga
+/-
+/-
+/-
+/-
Treponeme orale
+/-
+++
+++
+++
Porphyromonas
gingivalis
++
+/-
Prevotella intermedia
+/-
++
++
Tannerella forsythia
++
++
Fusobacterium
nucleatum
++
++
Concluzie:
- biofilmul dentar subgingival al strii
de sntate
poate gzdui n
cantiti foarte mici patogeni
parodontali, ei fiind incapabili s
concureze cu bacteriile gram
pozitive zaharolitce dominante.
Trecerea de la gingivit la
Foarte puternic
Puternic
Moderat
Aggregatibacter
Fusobacterium
Streptococcus
actinomycetemcomitans
nucleatum
constellatus
Porphyromonas gingivalis
Prevotella
intermedia
Parvimonas micra
Tannerella forsythia
Campylobacter
rectus
Actinomyces
viscosus
Treponema denticola
Eikenella
corrodens
Actinomyces
odontolyticus
www.topleyonline.com
Microbiologia bolii
parodontale
Microbiota
parodontal
sistem
ecologic complex, cu multe interaciuni
structurale i fiziologice ntre bacteriile
rezidente i ntre bacterii i gazd.
Nivele crescute ale unor bacterii
consecina bolii.
Lipsa leziunii numr mic de bacterii,
susceptibilitate sczut a gazdei,
diferene de virulen intraspeciii.
Microbiologia bolii
parodontale
Bacteriile protectoare:
ocup spaiul vital ce ar putea fi
populat de bacteriile patogene;
aderena
bacteriilor
inhib
parodoniu;
inactiveaz anumii patogeni.
la
Mecanisme patogenice n
boala parodontal
Adeziunea, coagregarea, invazia;
Producerea de exotoxine;
Constituienii celulari;
Producerea de enzime;
Eludarea rspunsului imun;
cu fond luminos
cu fond negru
cu contrast de faz
Cultivarea
Tehnici PCR
Teste imunoenzimatice ELISA, BANA
Imunofluorescena
Gaz lichid cromatografie
Alte teste
Diagnostic microbiologic
1.
Recoltare:
Proba biofilm bacterian subgingival;
Etape:
izolarea dintelui;
ndeprtarea
mecanic
a
plcii
supragingivale;
uscare;
recoltarea probei cu ajutorul conurilor de
hrtie de filtru.
2.Transport:
- maxim 30 minute;
- mediu de transport : bulion thioglicolat
cu resazurin.
3. Incubare - 37C n anaerobioz, 5-7
zile.
Examenul microscopic
Frotiuri colorate
Gram
rapid, ieftin i util
pentru pacient;
rol n stabilirea
prognosticului;
justific continuarea
investigaiei
microbio-logice.
Recoltarea probele
probele din pungile parodontale de la pacieni cu diagnostic clinic de parodontit marginal cronic.
Recoltarea se
se face cu conuri de hrtie sterile de 20 de mm ce au fost meninute timp de 30 secunde n punga parodontal dup ndeprtarea prealabil a plcii bacteriene
supragingivale, pentru a se evita contaminarea probei cu flora supragingival.
Conurile se descarc n tuburi sterile cu 0,5 ml ser fiziologic steril.
b. Examinarea microscopic
Din suspensia obinut n ser fiziologic, se
se prelev
prelev volume standardizate cu ajutorul unei anse calibrate de 10l, volume care se
se folosesc
folosesc pentru prepararea frotiurilor.
Frotiurile se coloreaz Gram
Gram i se examineaz
examineaz la microscop.
Aspectele oferite de examinarea unui frotiu colorat Gram folosite drept criterii de evaluare pot fi:
fi:
ncrctura bacterian a probei;
probei;
prezena florei Gram negative (bacili);
(bacili);
prezena treponemelor orale.
orale.
a. Recoltarea
Determinrile cu testul TOPAS se fac obligatoriu nainte de orice alt procedur terapeutic dentar.
Se usuc situs-ul
situs-ul din care se va face recoltarea cu me
mee sterile sau cu un jet de aer de la unitul
dentar, cu scopul de a ndeprta orice posibilitate de contaminare extern fluid cu saliv nainte de
recoltare.
Se scot conurile de hrtie din pachetul steril.
Dac suntem interesai de statusul unui anume dinte, atunci recoltarea mostrelor de lichid crevicular
gingival se va face la nivelul anului att mesiovestibular ct, i mesiolingual. Dac suntem
interesai de o anumit pung parodontal, atunci recoltarea se va face de la nivelul acesteia.
Se inser conurile de hrtie n interiorul anului gingival, respectiv al pungii parodontale,
direcionnd vrful conului de hrtie apical pn cnd se simte o rezisten uoar. Se las conul de
hrtie pe loc timp de 1 minut,
minut, dup care se agit uor tubul cu capacul galben pentru determinarea
toxicitii n scopul aezrii reactivului din interior pe fundul acestuia. Se desface capacul i se aaz
n poziie vertical n stativ.
b. Determinarea propriu-zis
Dup 1 minut se plaseaz imediat conul de hrtie n tubul cu reactiv asigurndu-ne c vrful conului este
Tehnici
de
biologie
molecular
real
Micro-Ident
time
Micro-Ident
- Testul micro-IDent A face posibila determinarea celor
cinci markeri importanti parodotogeni: Aggregatibacter
actino-mycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis,
Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus si
Treponema denticola).
- In unele cazuri de parodontita spectrul de diagnostic
poate fi largit prin determinarea altor 6 germeni:
Peptostreptococcus micros, Fusobacterium
nucleatum/periodonticum, Eikenella corrodens,
Campylobacter rectus, Eubacterium nodatum si
Capnocytophaga spp (testul micro-IDent B).
Interpretarea rezultatelor
In cazul deteciilor ADN pozitive, pentru
fiecare bacterie patogen rezultatul va fi
raportat astfel:
-slab pozitiv,
-pozitiv,
-intens pozitiv.
Aceste moduri de comunicare se coreleaza
cu cantitatea de germeni identificati in
prob.
ELISA
BANA
Test colorimetric
Testul pozitiv indic prezena
TESTUL BANA este o adaptare a testului de hidroliza BANA conceput de Dr. Walter Loesche (Univ. Michigan)
care se bazeaza pe detectarea unei enzime care este secretata de Porphyromonas gingivalis, Treponema
denticola si Bacteroides forsythus,
forsythus, cele trei bacterii anaerobe frecvent asociate cu parodontita adultului sau
cu halena fetida.
-Din 60 de specii subgingivale studiate [Manabu M, 2001] doar acestea trei secreta aceasta enzima capabila
sa hidrolizeze peptidul sintetic benzoil-DL-argininnaftilamida (BANA) cu care este mbibata banda test.
-Daca oricare din aceste trei specii este prezenta se produce hidrolizarea enzimei BANA si apare culoarea
albastra, indicatorul testului pozitiv.
- Cu ct este culoarea mai intensa cu att concentra ia microorganis-melor BANA pozitive este mai
mare.
-Testul BANA poate detecta simultan prezenta uneia, a doua sau a celor trei microorganisme, cu
aceeasi acuratee ca si sondele ADN, testul ELIZA sau imunofluorescenta indirecta [Loaesche WJ,
1992]. - Sensibilitatea acestor trei metode este de 90-96 % iar acuratetea de 83-92 %.
-n acelasi studiu comparativ efectuat de Loesche metoda detectarii acestor microorganisme prin
culturi microbiene a avut o acuratete de 50-62%.
Imunofluorescena
Alte tehnici
FISH (Fluorescence in situ
http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/fish.php
Concluzii
Cultivarea i PCR cele mai folosite.
Nici o metod nu poate fi considerat
per se de referin.
Combinarea de teste cea mai buna
metod.
Antibiograma
EX: ATB ANA susceptibility test. The ATB ANA strips (bioMrieux, Marcy lEtoile, France) permit determination of the susceptibility of anaerobic bacteria to antibiotics in a semisolid medium under conditions similar to those used for the agar dilution
method. A suspension of no. 3 McFarland standard was prepared by homogenizing without shaking C. difficile colonies in 0.85% saline buffer, and 200 l was transferred into an ampoule of ATB-S medium; 135 l was then distributed into each cupule of the
strip containing dehydrated antimicrobial agents. The strips were incubated for 24 h at 37C in an anaerobic atmosphere. The turbidimetries of the cupules were observed by visual reading, and interpretation was performed according to the manufacturers
recommendations. The breakpoints to be used for interpretation of the results were as follows: 1 to 4 g/ml for erythromycin, 2 g/ml for clindamycin, 8 g/ml for tetracycline, 4 to 16 g/ml for rifampin, and 16 g/ml for chloramphenicol .
Abstract:
Abstract. The aim of the present investigation was to determine
Terapia cu antibiotice
Antibiotice beneficiu versus folosire
n exces cu afectarea ecologiei orale.
controlul
biofilmului,
nu
Scop:
eliminarea lui.
la
antibiotice
a
Sensibilitatea
patogenilor
parodontali
variaz
considerabil, terapia empiric este,
deci, dificil.
Sensibilitatea
sistemice;
parodontite cu pierderi progresive de
ataament dup tratament corect;
abces parodontal cu extinderea n lojile
nvecinate i adenopatie sever;
boala parodontal necrozant cu starea
general influenat.
Terapia sistemic cu
antibiotice
Metronidazol: 3x500mg, 7-10 zile
Amoxicilin: 3x500mg, 7-10 zile
Amoxicilin + acid clavulanic:
3x500mg, 7-10 zile
Clindamicin: 4x300mg, 7-10 zile;
Metronidazol+amoxicilin+acid
clavulanic;
Terapia cu antibiotice
Penicilina, amoxicilina:
bactericide;
50% din bacilii gram negativi anaerobi
produc lactamaze.
asocierea cu acid clavulanic.
Terapia cu antibiotice
Clindamicina:
aciune foarte bun pe anaerobi;
Toate tulpinile de Eikenella corrodens
i Aggregatibacter
actinomycetemcomitans sunt
rezistente;
Terapia cu antibiotice
Tetraciclina:
spectru larg;
bacteriostatic;
multe tulpini de anaerobi au dobndit
rezisten;
Terapia cu antibiotice
Metronidazol:
antibioticul de elecie n infeciile
produse de anaerobi;
nu acioneaz pe facultativi anaerobi
(E. corrodens, A.
actinomycetemcomitans).
Tratament local
Produse cu eliberare controlat de
tetraciclin,
metronidazol
(geluri,
polimeri, fibre).
Antiseptice: hipocloritul de sodiu,
clorhexidina, compui cationici
biguanidici, hyaluronan, triclosan (n
geluri, sprayuri, ape de gur, paste
de dini, gume de mestecat)
Tratamentul local cu
antibiotice
apare rapid rezistena;
are mai puine reacii adverse dect
terapia sistemic;
compliana este bun;
mai scump dect terapia sistemic;
Tratamentul
cu
antibiotice
nu
tratamentul
mecanic
nlocuiete
stomatologic.
Combinarea tratamentului mecanic
cu antibioterapia sistemic sau local
d rezultate statistic mai bune dect
fiecare din ele luate separat.