ALGORITMUL

DIAGNOSTICULUI
IN VIROZE
 Etapele diagnosticului
virusologic

 Recoltarea produsului patologic

 Transportul produselor patologice
 Direcţiile diagnosticului virusologic
RECOLTAREA PRODUSELOR PATOLOGICE STERIL!!!
Fluidele orale reduc riscul contaminarii,
simplifica procedura de recoltare
 PRODUSE PATOLOGICE
 Sânge - 3-5 ml prin punctia venoasa aseptica, pe anticoagulant.
Virusuri frecvent izolate: virusuri care disemineaza viremic si agentii etiologici ai
febrelor hemoragice.
 Materiile fecale - 4-8 g in solutie de Mg SO4 (stabilizeaza infectivitatea
enterovirusurilor).
Virusuri frecvent izolate: enterovirusuri, rotavirusuri, calicivirusuri, mai rar
adenovirusuri enterice.
 Secretii nazo faringiene
a) spalatura nazo faringiana se obtine cu ajutorul unor tampoane cu
coada (sterile) introduse in cornetul nazal inferior.
b) aspiratul nazofaringian se obtine folosind un speculum nazal prin
administrarea a 3 ml ser fiziologic in nari cu o seringa atasata la un tub de
plastic.
c) lavaj traheobronsic se obtine prin bronhoscopie in conditii speciale
de catre personal calificat
Virusuri frecvent izolate: virusurile gripale A si B, virusurile paragripale,
adenovirusuri, rhinovirusuri, coronavirusuri, virusul respirator sincitial,
v.rujeolos, v. rubeolos, v. urlian.
 Lichid cefalorahidian (LCR) - 5-6 ml prin punctie rahidiana, inainte de
inceperea tratamentului.
Virusuri frecvent izolate: virusul rabic, unele arbovirusuri.
PRODUSE PATOLOGICE
 Saliva. Se recolteaza saliva de langa ductul Stenon cu tampon steril.
Frecvent este limitata la diagnosticul infectiei rabice.
 Lichid vezicular - Colectarea lichidului din vezicule, bule, pustule se face
dupa dezinfectia prealabila a regiunii cutanate sau mucoase. Se perforeaza
vezicula cu un ac atasat la o seringa de tuberculina sau cu ajutorul unei
pipete.
Virusuri frecvent izolate: HSV I, HSV II si VZV.
 Urina -100 ml - orice specimen urinar obtinut prin abstinenta de la mictiune
timp de 2 ore este adecvat pentru diagnosticul virusologic.
Virusuri frecvent izolate. V. citomegalic, v. rujeolos.
 Tampoane vaginale, lavaj cervico-vaginal, tampon uretral de la nivelul
colului uterin si uretrei (atat la femeie cat si la barbat); cu tampoane sterile,
respectiv periuta citologica (pentru uretra masculina), fara toaleta prealabila
a regiunii.
Virusuri frecvent izolate: virusuri herpetice si papilomavirusuri; diagnostic
BTS, uretritelor, leziunilor veziculare si hiperplazice genitale.
 Biopsia tisulara. Fragmente de organ recoltate în câtiva ml de solutie
salina + ser de vitel 10% + antibiotice în concentratiile folosite în culturile de
celule.
Transportul probelor recoltate
Rapid

La rece
Sigur
 ambalare riguros corecta
 etichetarea cu semn biorisc
 documentatie in legatura cu
agentul biologic transportat
 Formular de trimitere pentru diagnostic
virusologic
Adresa spitalului/policlinicii/
cabinetului ce trimite produsul
patologic
Nume, prenume pacient
Date clinice, suspiciune
diagnostic
Tipul produs patologic
Tipul tratamentului administrat
in prealabil
Analiza solicitata
Semnatura, parafa medicului
Medicul caruia i se va
comunica rezultatul (tel, fax, e-
mail)
Sex, Varsta
Data debutului
simptomatolgiei
Data, ora recoltarii
Date epidemiologice (contact
cu boli infectioase
transmisibile, vectori, calatorii
in zone endemice pt o anumita
boala, vaccinari)
 Direcţiile diagnosticului virusologic
1. Izolare virala in:
• Culturi de celule
• Ou de gaina embrionat
• Animal de laborator

2. Detectia directa a :
 Particulelor virale EM , IEM
 Antigene virale ELISA, IF
 Genom viral PCR; Rt-PCR

3. Teste Serologice:
a. Ac virus- specifici tip IgM
b. seroconversia in ac virus- specifici tip IgG
Izolarea virala prin inoculare pe OGE

Pocks-uri pe MCA a OGE - v. variolic

Detectia directa a
particulei virale prin Microscopie Electronica

 Coloratia negativa
 acetat de uranil
 acid fosfotungstic
 Metode care cresc sensibilitatea
(106-108 particule/ml): SPIEM, SIA
 Metode de concentrare:
 ultracentrifugare
 difuzia in agar
 centrifugare directa pe grila de ME
Diagnosticul serologic
 pe probă unică de ser - anticorpi antivirali de tip
IgM (răspunsul imun primar) - ELISA de captură
 pe probe pereche de ser
- proba I - la debut
- proba II - la 2-3 săptămâni
ELISA tehnica indirectă sau de competiţie

 seroconversia (proba I - nu există anticorpi/ proba II

- apar anticorpi specifici virusului de detectat),
 creşterea semnificativă a titrului de anticorpi între
cele 2 probe (de minim 4 ori)
Etapele diagnosticului virusologic
Izolarea virală

Diagnosticul
Dem. virusului/componente
serologic

Direcţiile diagnosticului virusologic

Transportul produselor patologice

Recoltarea produsului patologic

Suspiciunea de viroză