Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas.

3QV1
EQUIPO: 2
LAB: 4

PRCTICA: TINCIN DE ZIEHL-NEELSEN.

Antecedentes:

Tipo de coloracin: Diferencial.

Desarrollada inicialmente por Paul Elrich para poner en manifiesto

bacilos causantes de la tuberculosis.
Divide a las bacterias en cido Alcohol Resistentes [AAR] y No cido
Alcohol Resistentes [NAAR].
El resultado es positivo si se logran observar bacterias, generalmente
bacilos, de color fucsia.
Es una prueba presuntiva, no es determinante para poder realizar un
diagnstico.

Fundamento
La tincin se basa en la estructura de la pared celular de algunas
bacterias, ya que est compuesta por cidos grasos, llamados cidos
miclicos. Estos cidos le proveen a la bacteria una barrera hidrofbica.
Al agregar fucsina fenicada a la bacteria y calentar, se solubilizan los
lpidos de la pared celular; aunado a esto, el colorante tiene gran
afinidad con los cidos grasos y los tie con mayor facilidad.
Al enfriar con agua la preparacin teida, se solidifica la pared de ceras,
atrapando el colorante y haciendo la tincin resistente al lavado con
alcohol cido.
Finalmente se aplica azul de metileno como colorante de contraste.

Metodologa.
1. Se aplica el colorante fucsina fenicada sobre todo el portaobjetos y

se calienta suavemente a emisin de vapores, sin llegar al punto de

ebullicin durante 5 minutos. *El calentamiento aumenta la penetracin y
retencin del colorante debido a que el calor solubiliza la pared de lpidos. Cuando la
temperatura desciende, la pared de lpidos se solidifica, incorporando el colorante a su
estructura.

2. El extendido se lava con un chorro suave de agua.

3. A continuacin, el extendido se trata exhaustivamente con cido-

alcohol. *Esta accin elimina el color rosa de las bacterias que no son cido-alcohol
resistentes. Los microorganismos cido-alcohol resistentes retienen el color rosa
porque la fucsina fenicada queda atrapada en los lpidos de su pared celular. En las
bacterias que no son cido alcohol resistentes, las paredes carecen de componentes
lipdicos y la fucsina fenicada se elimina con facilidad en la decoloracin, quedando la
estructura incolora.

4. El extendido se lava con un chorro suave de agua.

5. Se cubre el extendido con azul de metileno durante un minuto. *Las
bacterias que no son cido-alcohol resistentes (que ya perdieron el colorante
primario durante la decoloracin) aparecen azules despus de la aplicacin del
colorante de contraste.

Tipos de bacterias segn Ziehl-Neelsen:

Bacterias AAR

Bacterias
NAAR

Resultados.
1. http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
2. Tortora, G. et. al. 2007. Introduccin a la Microbiologa. 9a Edicin.
Editorial Mdica Panamericana. China.

Bibliografa: