Cromatografa de

adsorcin
Cromatografa lquido-slido
Forma tradicional de
cromatografa
Fase estacionaria: Slica
gel o almina
Fase mvil: Eluyentes
La absorcin disminuye
cuando aumenta la
polaridad.
Las interacciones se dan
por fuerzas de Van de Van
Der Walls.

Cromatografa
Inica (IC)
Sirve para separar
iones de relativa baja
capacidad de
intercambio inico.
Fase Estacionaria: Se
utilizan cargadas
electrostticamente,
insolubles.
Fase mvil: Disolucin
acuosa de metanol u
otro disolvente
orgnico miscibles con
el analito, adems de
la solucin buffer.

HPLC: high-performance liquid

chromatography

Cromatografa de exclusin por

tamao
Se aplica para separar
sustancias de elevada masa
molecular.
Las molculas quedan
atrapadas en los poros y son
eliminadas del flujo de la
fase mvil, las que son mas
grandes que el tamao
medio de los poros del
relleno son excluidas y, por
consiguiente, no son
retenidas.

 Fase mvil: Cuentas polimricas y partculas de slice.

Fase estacionaria: Geles hidrfilos son divinilbencenos
sulfonados o poliacrilamidas.
Ejemplo: un gel con un limite de exclusin de varios miles
puede separar con claridad las protenas de los aminocidos
y de los pptidos de baja masa molecular.

Cromatograf
a por
afinidad
La principal ventaja de la
cromatografa por afinidad
es que es muy especifica,
asla con rapidez
biomolculas durante el
trabajo de preparacin.
Se utilizan ligandos por
afinidad que se enlazan a
las molculas del analito
en la muestra.

 Fase mvil: cumple dos papeles:

1.

Debe soportar el fuerte enlace de las molculas del analito con el

ligando

2. Luego de eliminar el material indeseable debe debilitar la interaccin

analito-ligando.
Fase estacionaria: Slido como la agarosa o cuentas de vidrio poros.
Ligando: anticuerpos, inhibidores de enzimas.

Cromatografa en capa fina (TLC)

Es mejor que la cromatografa en
papel (CP) porque es ms rpida,
tiene mejor resolucin y es ms
sensible.
tiene amplio uso en los
laboratorios clnicos y laboratorios
industriales. Debido a sus muchas
reas de aplicacin es que sigue
siendo una tcnica importante.
Se utiliza para separar e
identifiacicin de compuesto
segn su desplazamiento en la
fase estacionaria (Rf).

Se aplica una solucin de la

muestra de 0.0.1% a 0.1% a una
distancia de 1 o 2 cm del
extremo de la placa.

Fase mvil o eluyente:

Disoluciones de lquidos
voltiles que ejercen un arrastre
a la muestra problema.

Fase estacionaria: placas de

vidrio revestidas con una capa
delgada y adherente de
partculas finamente divididas,
como la Slica gel (polar).

Para poder reconocer los

distintos compuestos se hace
uso de ms aplicaciones pero de
especies puras cuyos y si su Rf
coincide nos dan un indicio de
su presencia en la muestra.

Para cerciorarnos de estar

seguro utilizamos la tcnica de
raspado y solucin, se asla el
analito por centrifugacin o
filtracin y se somete a tcnicas
espectroscpicas.

GRACIAS!