Evaluacin de nanopartculas

de xido de hierro sobre la

toxicidad de las clulas
hepticas de ratas BALB / c

Biologa Molecular

Introduccin

Las nano partculas poseen caractersticas especificas y una gran variedad

de aplicaciones como:
Formacin de imgenes de resonancia magntica (MRI), inmunoensayos,
hipertermia, la reparacin de tejidos, la terapia celular y la administracin de
frmacos.

Existen nano partculas con propiedades magnticas, que tienen

elementos como:
El cobre, hierro y cobalto.

Nano partculas magnticas

Partculas que se pueden manejar y manipular internamente con facilidad.

Las nanopartculas de Fe3O4 (Fe3O4-PN) o (IONPs), Pueden ser manipuladas
en el torrente sanguneo. Estas pueden ser ingeridas o inhaladas.
Llega al hgado alrededor de 80 o 90% y el resto al baso y medula sea.
En el hgado se puede identificar el efecto adverso de esta nano partcula.

Indicadores mediantes enzimas

Indicadores de trastornos hepticos como son: Alanina aminotransferasa

(ALT), aspartato aminotransferasa (AST) se conoce la lesin o trastorno
hepatocelular. Y la fosfatasa alcalina (ALP) se mide la enfermedad heptica
o de hueso.
ALT (Citosol de higado)
ATS (mitocondria o citosol)
ALP (Tejidos)

Mtodos y materiales

Realizado en la universidad islmica de Azad (marzo 2014 a septiembre

2014)

Nano partculas de
Fe3O4

Animales para
experimentacin

Condiciones de
laboratorio

Compradas en la
compaa NANO
PASAGARD NOVIN
(dimetro de 20-30 nm)
25 g suspendo en 10 ml
de PBS (buffer de
fosfato salino) (pH 7,5)

90 ratones machos
Peso: 23 25 g
Comprados en RAZI
VACCINE AND SERUM
RESEARCH INSTITUTE

Mantenido bajo un ciclo

de 12 h luz/oscuridad
Temperatura: 22-24C
Humedad relativa : 2050%

EXPERIMENTACION CON ANIMALES

Animales divididos al azar en 15 grupos: EL TRATAMIENTO SE HIZO POR

3 DIAS

RECOLECCION DE DATOS
GRUPOS EXPERIMENTALES: (un da despus de l tratamiento)
o anestesia con ter
o Se recolecta la sangre del corazn y se asla el suero por centrifugacin
(300 rpm por 20 min)
o Las enzimas ( ALT, AST y ALP) se determinan con reactivos comerciales
(pars azmoon tehran e iran) y un sistema autoanalizador (Hitachi Ltd.,
Tokyo, Japan)

GUIDE TO THE CARE AND USE OF

EXPERIMENTAL ANIMALS

Esta gua comprende un capitulo dedicado a la eutanasia como medio para el uso de
animales en la experimentacin, y propone que esta se debe practicar cumpliendo los
siguientes parmetros

o a) la muerte y sin signos de pnico, dolor o angustia;

o b) tiempo mnimo a la prdida de la conciencia;
o c) la fiabilidad y la reproducibilidad;
o y) seguridad para el personal que participa;
o e) evitar efectos fisiolgicos y psicolgicos indeseables para el animal;
o f) la compatibilidad con el requisito y el propsito del estudio cientfico;
o g) efectos emocionales mnimos o nulos en el observador y el operador;
o h) mnimo impacto ambiental o ecolgico;
o i) un equipo sencillo, barato mecnico que est relativamente libre de mantenimiento;
o j) una ubicacin remota y separada de las salas de los animales.

EXAMINACION HISTOLOGICA
Grupo
experimental

sacrificar

Hgado

remover

tejidos

fijar

muestra

descalcificar

deshidratar

desengrasar

tejidos

Disponer

Manchar
Contando
hepatocitos y clulas
de kupffer por
unidad de rea

microscopio
ptico CH-30

Observar

Inyeccin
de ter

Buffer neutro al
10% de
formaldehido
Con HNO3 al
5% por 7 das
Series
ascendentes de
soluciones de
alcohol
xileno

Bloque de
parafina
Hematoxilina
eosina

Cortar a 5
m de ancho

RESULTADOS

ALTERACIONES HEPATICAS

ALTERACIONES EN LAS ENZIMAS

HEPATICAS

Conclusiones
Las caractersticas especificas de las nano partculas las hacen bastante
importantes e interesantes para la medicina, tecnologa y biologa.
La toxicidad de los nano compuestos no se puede determinar aun del todo
debido al poco estudio de estos compuestos.
Las NPs en medicina aportan un amplio conocimiento al usarlo como
marcaje de clulas o direccionar frmacos, crea beneficios importantes.
Se encontraron efectos adversos de Fe3O4-NPs por medio de enzimas
especificas.

La administracin de Fe3O4-NPs en 150 y 300 mg / gr dosis conduce a

efectos histopatolgicos en el hgado, necrosis de los hepatocitos, pltora
de clulas de Kupffer, la congestin de la circulacin venosa central y la
hipertrofia de los hepatocitos.
La administracin de dosis ms bajas de estas nanopartculas (25, 50 y 75
mg / gr) no se asoci con importantes efectos histolgicos adversos en el
hgado y alteraciones significativas en las enzimas hepticas fueron
detectados.