TESTAREA SENSIBILITATII LA

ANTIBIOTICE
ANTIBIOGRAMA

DEFINITIE
Prin antibiograma se intelege testarea sensibilitatii unei tulpini
bacteriene izolate dintr-un produs patologic fata de diverse
antibiotice.
Astfel se caracterizeaza capacitatea acestora de a opri dezvoltarea
microbiana si da informatii pentru selectarea celui sau celor mai
active antibiotice fata de microorganismul testat.

PRINCIPII DE BAZ
Scopul antibiogramei este alegerea tratamentului
optim.
Antibiograma se poate realiza prin metode:
Calitative metoda uzual;
Cantitative pentru determinarea concentraiei
minime inhibitorii (CMI), necesar pentru
tratamentul infeciilor cu risc crescut.

Metode
Difuzie - Kirby Bauer
Dilutie - CMI
Difuzie & Dilutie - E Test

1.Selectarea coloniilor izolate

2.prepararea inoculului

3. Insamantarea uniforma a mediului de

cultura (Mller-Hinton)

Se insaminteaza
placile in maxim 15
min. de la
etalonare; se lasa
placa insamintata
3-5 min. pentru
adsorbtia inoculului.

Adaugarea antibioticelor
in functie de:
Localizarea si tipul
infectiei,
Genul, specia bacterian,
Cate un reprezentant al
fiecarei
grupe de antibiotice.
Se incubeaza placile la 37 C
pentru 16-18 ore.

Interpretarea antibiogramei in functie

de diametrul zonei de inhibitie
in functie de diametrul
zonei de inhibitie:
S = diametrul mai mare
de 20 mm,
I = 10-20 mm,
R = mai mic de 10 mm.

Antibiograme pe mediu MllerHinton

Antibiograma pe geloza singe

Metoda cu antibiotic incorporat in mediu

semisolid kit-ul comercial ATB
Biomerieux, Franta
Principiu
Galeria ATB permite determinarea sensibilitii microbiene la un set de agenti
antibacterieni / antifungici , incorporate ntr-un mediu semisolid. Este alctuit
din 16 perechi de godeuri, din care 4 nu conin antibiotice i sunt martori de
cretere.
Celelalte perechi de godeuri conin diferite antibiotice n cite dou concentraii (c
= concentratie mai mica i C = concentratie mai mare) pentru a putea
eticheta fiecare tulpin testat ca fiind sensibil, intermediar sau rezistent.
Citire si Interpretare
- Dac nu exist cretere la nici o concentraie nseamn tulpin sensibil, daca
exista cretere numai n godeul cu concentraia mai mic c nseamn
sensibilitate intermediar, daca exista cretere n ambele godeuri (c i C)
semnific rezisten la respectivul agent antimicrobian.

ACTIUNE ANTIBACTERIANA
Concentratia minima inhibitorie (CMI): cea mai joasa concentratie,
exprimata in mg/l, care, in conditii in vitro definite, previne
cresterea bacteriilor intr-o perioada definita de timp.
Concentratia minima bactericida (CMB): cea mai mica concentratie
de antibiotic, exprimata in mg/l, care in conditii definite in vitro
reduce cu 99,9% (3 log.) numarul de microorganisme dintr-un
mediu continand un numar definit de microorganisme, intr-un
interval definit de timp.

Determinarea CMI

Metoda dilutiilor in medii lichide

Se folosete pentru determinarea concentraiei minime

inhibitorii (CMI).
Tehnica de lucru
La diluii crescnde de antibiotic n mediu de cultur se
adaug aceeai cantitate din tulpina de testat.
Interpretare
Ultimul tub limpede indica limita sensibilitatii germenului, fata
de substante sau concentraia minima inhibitorie activa
( CMI).

 Metoda dilutiilor succesive in mediu lichid

Citire si interpretare
Dilutia din ultima eprubeta in care nu exista crestere bacteriana (mediul este
limpede) reprezinta valoarea CMI.

1/8

1/16

1/32

1/64

1/128

1/256

1/512

Discutii
Dozarea chimioterapicelor si antibioticelor din umorile
organismului este necesara pentru evaluarea in vivo a
eficientei unui tratament cu chimioterapice sau antibiotice.
Astfel se poate stabili daca concentratia substantei se
mentine in umorile organismului la un nivel activ, permite
controlul modului si ritmului de administrare , ajuta la
aprecierea corespondentei intre eficacitatea in vivo si in
vitro a substantei utilizate, etc.

E test

E-Test

Tehnica de lucru
Pe suprafata unei placi cu mediu agarizat prensmnat cu
tulpina testat n condiii standardizate sunt depuse radiar
bandeletele pe care este fixat un gradient exponenial de
antibiotic .
Interpretare
Dupa incubare corespunzatoare, CMI este indicat de
intersecia dintre zona eliptic de inhibiie a culturii i scala
de gradiente a benzii.

Interpretarea
E test