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DIAGNOSTICO DE SIFILIS

RPR

DIAGNOSTICO - SIFILIS
Microscopa Directa
(muestra de lesin o tejido)

Ex. Serolgicos
(Suero, plasma y

Ex. No Treponmicos

LCR)

Ex.

Treponmicos
Ex. Treponmicos
VDRL

FTA-

ABS
RPR
RST
USR
inmunocromatografia

TPHA
TPI

SIFILIS
PRIMARIA

SIFILIS
SECUNDARI
A

Diagnstico

directo a
travs de
lesiones.
Seroconversi
n de 1- 4
sem
Sospechoso
repetirse el
RPR 1 sem,
1 mes y 3
meses

Las pruebas
reagnicas y
treponmica
s son
positivas en
el 100 % de
los casos.

SIFILIS
LATENTE
PRECOZ (<
1 AO)

No
diagnostico
directo
Cada lenta
pero
progresiva
de los ttulos
de las
pruebas
reagnicas
=>
NEGATIVO

SIFILIS
LATENTE
TARDIO(> 1
AO)

Pruebas
treponmica
s positivas
Pruebas
reagnicas
positivas o
negativas,
segn el
tiempo de
evolucin.
No sntomas
clnicos
(evaluar
para
neurosfilis)

SIFILIS
TERCIARIA

Diagnostico
serologico
dificil.
Treponmica
s positivas
en el 95 %
Reaginias
negativas 30
% de casos
Gumas,
sfilis
cardiovascul
ar,
neurosfilis,
etc.

Los Anticuerpos Contra la sfilis


comienzan a aparecer en la sangre
entre 1 a 4 semanas despus de la
infeccin.
Las
pruebas
no
Treponemicas
(inespecficas)
determinan
la
presencia de la reagina, que es un
anticuerpo no Treponemico dirigido
contra
los
antgenos
de
la
cardiolipina.

TCNICAS

SEROLGICAS

Exmenes
Anticuerpo
No Treponmicos
Reagina
lecitina,
colesterol.
Treponmicos
IgG, IgM

Antgeno

Cardiolipina,

T. pallidum

En Nuestra Red de Salud Tpac Amaru se han


Utilizado
diferentes marcas de
testserolgicos para sifilis como :

RPR-CARBON SPINREACT
CASIANOS EIRL,
TECO-DIAGNOSTICS
RPR-CARBON BIOSYSTEMS
RPR-CARBON CROMATEST
RPR-NOSTICON
RPR-CARBON RANDOX

(Olor)

RPR-LAB-21 (Rx extrema)


TC-RPR
QCA-RPR CARBON (Rx extrema)

Toda prueba serolgica para sfilis debe


poseer dos cualidades, tales son:
Sensibilidad :
La capacidad de detectar los verdaderos postivos
(Anticuerpos: Reaginas y Acs. Especificos)
Especificidad
La capacidad de la prueba de detectar los
verdaderos negativos (Ausencia de Anticuerpos).
Pero lo ideal de una reaccin serolgica con
sensibilidad y especificidad al ciento por ciento,
no se ha alcanzado

RPR (REAGINA PLASMTICA RPIDA)


RPR
CRIST. COLESTEROL
CARDIOLIPINAS
LECITINA

FLOCULACION

REAGINAS

CARBON = FACILITA LA VISUALIZACION


La reagina es un Ac. contra los lpidos de los tejidos,
el Treponema pallidum al destruir las celulas libera
lipidos (Cardiolipina) estimulando la formacion de
REAGINAS. Estos anticuerpos reagnicos, no son
exclusivos de la sfilis, tambin son producidos en

REACTIVOS -

ANTGENO RPR.

Suspensin de Antgeno

Cardiolipina 0,003%
Lecitina
0,020 - 0,022%
Colesterol
0,09%
Cloruro de colina 10%
EDTA 0,0125 mol/L,
Micropartculas de carbn 0,01%, en
tampn fosfato.

La suspensin del antgeno Debe


homogenizarse por 5 a 10 segundos
antes de abrirse, para resuspender
las particular de carbn, antes de ser
utilizado, pues tiende a sedimentar en
reposo.

La suspensin del antgeno siempre


debe refrigerarse, es estable sin abrir
y almacenado entre 2-8C, hasta la
fecha de caducidad.

CONTROL POSITIVO RPR.


Control lquido estabilizado, Suero
humano
con
anticuerpos
anti
Treponema pallidum + Azida de sodio
0.1 %

CONTROL NEGATIVO RPR

Liquido estabilizado No Reactivo +


Suero humano + 0.1 % Azida de
sodio

Los controles estn listos para su


uso y hasta la fecha de caducidad.
Lleve a temperatura ambiente la
suspensin del antgeno y los
controles antes de utilizarse.
Precauciones: nicamente para
uso diagnstico in-vitro.

MATERIAL PROPORCIONADO

Aguja No. 18 sin bisel utilizada para


dispensar aproximadamente 17-18 ul
de la suspensin del antgeno.

Pipetas/ agitadoras utilizadas para


dispensar aproximadamente 50 ul (0.05
mL) de muestra.

Tarjetas de Prueba (crculos de


aproximadamente 18 mm). Cartn
laminado. Utilizado como superficie
de prueba. Se debe tener cuidado en
la manipulacin de las tarjetas de
prueba
para
evitar
introducir
contaminantes al circulo de prueba.
Extienda cada muestra sobre el total
del rea del crculo de prueba.

MATERIALES SUMINISTRADOS

PALILLOS
HOMOGENIZADORES
CONTROL
POSITIVO

CONTROL
NEGATIVO

ANTIGENO
RPR

AGUJA N 18

CARD-TEST

PIPETAS
PLASTICAS

MATERIALES REQUERIDOS
PROPORCIONADOS

PERO NO

Rotador (100 2 rpm)


Solucin salina (0.9%)
Cronmetro
Lmpara
GUANTES
AGUJAS Y TUBOS VACUTAINER
LEGIA 5%

MATERIALES NO SUMINISTRADOS

RECOLECCIN Y PREPARACIN DE LA MUESTRA

Las muestras pueden ser sueros,


plasmas recolectados con EDTA como
anticoagulante.
Evite la hemlisis, si la muestra esta
severamente lipmica de manera que
se obscurece el estado de las
partculas de antgeno podran dar una
aglutinacin no especfica, la muestra
no debe ser utilizada.

Las muestras con restos de fibrina


deben ser centrifugadas nuevamente
antes del ensayo.
ANEMIA (Hb < 10)
Ictericia (< 20 mg/dL) No Interfieren
Hemolisis
Lipemia Interfieren
FR > 300 UI/mL

ESTABILIDAD DE LA MUESTRA

Las muestras de suero se reportan


estables por 5 - 7 das entre 2-8C
3 meses conservados a -20C. Los
plasmas recolectados con EDTA y
almacenados entre 2-8C se reportan
estables hasta 24 hrs.

PROCEDIMIENTO CUALITATIVO

1. Lleve a temperatura ambiente la


suspensin del antgeno de RPR, los
controles y las muestras.

INTERPRETACION DE
RESULTADOS
La ltima dilucin que contenga agregados
macroscpicos indica el ttulo de la
muestra.
Ejemplo:
CIRCULO No.
Resultado
1
REACTIVO
2
REACTIVO
3
REACTIVO
4
REACTIVO

Dilucin del suero


1:2
1:4
1:8
1:16

DILUCIONES ALTAS
Prepare una dilucin 1:16 de la muestra Reactiva
agregar en un tubo de ensayo 0.1 ml. del suero
reactivo a 1.5 mL de SSF al 0.9% Mezcle firmemente.
Colocar 50 ul de la dilucin 1:16 preparada en el
circulo N 1 y a partir del circulo N2 ,3,4,5 o hasta
donde considere necesario colocar 50 ul de SSF 0,9%
A partir del circulo 2 e iniciar la dilucin agregando 50
ul de dilucin 1:16 mezclar con la SSF 0,9% y transferir
50 ul al siguiente crculo y as hasta el circulo N 5
eliminando 50 ul al final y agregar los 17-18 ul del
antgeno RPR mezclar por todo el rea del circulo y
colocar en el rotador a 100 rpm x 8 min. e interpretar.

LECTURA-RPR
REACTIVO
Cuando hay presencia de grumos
Intenso, finos y dificultosos de ver

NO REACTIVO
Si no muestra grumos

El resultado ser la mas alta dilucin que


Muestre reaccin

TPHA
PRUEBA CONFIRMATORIA

VOLUMEN
DE SUERO
1.5 - 2.0 ml.

TPHA
PCAM
C.S TUPAC AMARU
10-05-84

ENVIO DE
MUESTRA
PARA EXAMEN
CONFIRMATORI
O

TIPO
DE
EXAMEN
CODIGOS
ESTABLECIMI
ENTO
FECHA
DE
NACIMIENTO

FALSOS POSITIVOS
Frmacodependencia
Lupus eritematoso sistemico
Mononucleosis infecciosa
Paludismo
Lepra
Neumona viral
Vacunacin reciente
Raras ocasiones durante el embarazo.
Muestras hemolisadas
Antgeno contaminado

FALSOS NEGATIVOS
Al principio de la enfermedad o durante la
fase inactiva o tarda.
Reactivos y muestras muy fras
Fenmeno de Prozona

1)

2)

3)

1)
FENOMENO
PROZONA
donde existe exceso de
Ac. Frente al Ag, donde
no se
produce
aglutinacin , originando
falsos(-) por altas [ ] de Ac.
Esta dificultad se elimina
con diluciones seriadas
estndar del suero.
2) Equivalencia
3) POSTZONA, se da en
la zona de exceso de Ag,
donde tampoco se da la
aglutinacin,
dando
tambin falsos (-).

INTERFERENCIAS:
El exceso de lpidos en la sangre
El alcohol
intensidad =>24 hrs
antes.
Temperatura
El mal funcionamiento del rotador
mecnico
Volmenes de muestra

UTILIDAD DE EX. NO
TREPONEMICOS

Son utiles para seguir la progresion


de la enfermedad y la respuesta al
tratamiento.
Los resultados Reactivos deben ser
titulados
Si el titulo de Ac. No disminuye en
forma progresiva con el tratamiento,
debe considerarse la posibilidad de
un fracaso al tto.

UTILIDAD DE EX. NO
TREPONEMICOS

Disminucin de por lo menos 4 veces en


el titulo de Ac. despus de 3-6 meses de
tto antitreponemico se considera eficaz.
Tratamiento en estadios
reinfeccin,
disminucin
permanecen estables.

tardos
lenta

o
o

Algunos de estos persisten crnicos,


pueden mantener las pruebas
No
Treponemicas Reactivos toda la vida

RESULTADO NO REACTIVO
Indica que el paciente no tiene sfilis.
La sfilis se encuentra en fase latente
o inactiva.
Las tcnicas del laboratorio tuvieron
fallas.

RESULTADO REACTIVO
No es dato concluyente de sfilis ya que
existen varias situaciones que producen
falsos positivos.
Las reacciones falsas positivas en
realidad no son falsas, muchas veces
indican
la
presencia
de
otra
enfermedad.

El resultado se reporta como No


Reactivo o Reactivo.
Todas
aquellas
muestras
Reactivas deben ser diluidos
seriadamente para realizar la
titulacin y se reporta la dilucin
mas alta que exhibe reaccin

PUNTOS A TENER EN
CUENTA
RPR con una dilucin menor o igual a 1/8
SOSPECHOSO de Sfilis =>TPHA (+ o -)
RPR con una dilucin mayor a 1/8 MUY
PROBABLE Sfilis =>TPHA (+)
Purpera con Sfilis, RPR con titulo 1/X , el
Recin nacido RPR con titulo 1 /4X => MUY
PROBABLE SIFILIS CONGENITA (9/16)
Paciente con antecedente de SIFILIS, RPR
NO REACTIVO => TPHA Siempre POSITIVO
(95%)

Caso clnico
RPR
PUERPERA

NR

RECIEN
NACIDO

NR

TPHA

C.S. TUPAC
AMARU

C.S.
MILAGRO
DE LA
FRATERNID
AD

C.S.
ERMITAO
ALTO

RPR
REACTIV
O
DILUCIO
NES

C.S.M.I.
TAHUANTINSUY
O BAJO (TPHA)

C.S.
ERMITAO
BAJO

C.S.
TAHUANTINS
UYO ALTO

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