Hematopoieza.

Celulele sistemului imun.

Dr. Ramona Stoicescu
stoicescu.ramona@gmail.com

Sistemul imun
este suportul anatomic i fiziologic al imunitii.
Componentele sistemului imun sunt prezente n
multiple zone ale organismului
informaia imun circul permanent ntre porile
de ptrundere a microorganismelor sau altor
molecule non self i organele imune centrale.

Sistemul imun
Sistemul imun este un sistem complex
anatomic i funcional care asigur
mecanisme specifice de rspuns cu
aciune prompt.
Activitatea normal a sistemului imun
constituie baza aprrii organismului
mpotriva agresiunilor.

Sistemul imun
Alctuit din:
Organe Imune (organe limfoide primare i
organe limfoide secundare)
Vase limfatice (vase de comunicare ntre
organele limfoide)
Celule Imune: cteva tipuri

Organele imune
Organele limfoide primare (centrale):
mduva hematopoietic (osoas) i
timusul
n aceste organe se produce diferenierea
limfocitelor ce urmeaz etapei de
maturaie medular.

Organele imune

Organele limfoide secundare (periferice):

splina,
ganglionii limfatici,
esut limfatic asociat mucoaselor de exemplu
amigdalele, plcile Peyer ( esutul intestinal
limfoid este echivalentul mamiferelor pentru
Bursa lui Fabricius la psri).
n aceste organe se produce diferenierea
limfocitelor dup ntlnirea cu antigenul

Originea sistemului imun

n timpul dezvoltrii embrionare precursorii
sanguini deriv din ficatul fetal i sacul
amniotic.
Postnatal, celulele stem se afl dispuse n
mduva osoas (hematopoietic

Celulele sistemului imun

Toate celulele sistemului imun (celule
tisulare i leucocite) se dezvolt:
din CELULELE STEM PLURIPOTENTE
din mduva hematopoietic
sunt permanent rennoite n cursul vieii
unui individ

 Celulele sanguine au morfologie, funcie i

durat de via diferite.

Markeri CD
Celulele inclusiv celulele hematopietice se
pot diferenia ntre ele prin molecule de
suprafa care se numesc markeri.
Markerii se noteaz cu C.D (cluster of
differentiation).

CD
Markerii CD sunt identificai folosind
anticorpi specifici monoclonali.
Prezena anticorpilor specifici pe
suprafeele celulare este vizualizat
folosind conjugate enzim-anticorpi sau
anticorpi marcai cu fluorescein. Din 1982
s-au evideniat peste 300 de markeri sau
submarkeri CD.

Hematopoieza
Este procesul de formare i maturizare a
celulelor sanguine.
Este un proces de difereniere celular care
implic:
proliferare clonal i
diferenierea pentru a obine celulele
mature.

Hematopoieza
Studiul hematopoiezei a fost facilitat
datorit sensibilitii componentelor
celulare la iradierea cu rad. X
Animalele iradiate au fost injectate cu
celule medulare i n cteva zile au aprut
celule mature sanguine

Sediul hematopoiezei este:

embrion de cteva sptmni: n celulele sacului
vitelin
n lunile II-III de via fetal: difereniere n
cordoanele Wolf i Pander primele insule de
esut sanguin
n lunile III-VI de via fetal: ficatul i splina
devin organe hematopoietice
n lunile VI-IX: dezvoltarea mduvei osoase,
prezent n toate oasele (n luna IX dispare
hematopoieza hepato-splenic).

Sediul hematopoiezei este:

imediat postnatal: mduva hematogen n toate
oasele
treptat, mduva hematogen se restrnge:
pn la 18 ani: n epifizele proximale humerus,
femur i tibie, oase scurte i plate.
la adult: n oasele scurte i plate (coxale, stern,
corpurile vertebrelor, oasele late ale craniului).
n celelalte oase: mduv galben
nehematogen (esut adipos).

Celulele stem
Celulele stem se afl la originea tuturor liniilor
hematopoietice
Sunt considerate celula mam a tuturor liniilor
celulare medulare
Prezint ca i caracteristici:
Capacitatea de autoregenerare
(autontreinere,auto-nmulire).
Capacitatea de difereniere i generare a
descendenilor n lipsa stimulilor antigenici.

Celulele stem
Reglarea acestor procese implic
mecanisme complexe de semnalizare i
feed-back.
Unele celule stem pot determina toate
liniile (sunt totipotente) i au viata mai
lung i capacitate de autoreinnoire
crescuta

Celulele stem
Alte celule sunt pluripotente - formeaz mai
multe linii dar nu toate,
altele sunt bipotente formeaza 2 linii
altele sunt unipotente, formnd o singur linie
Celulele stem reprezint 0,05% din celulele
medulare dar pot repopula ntreaga mduv
osoas

Fenomenul de determinare
Celulele stem devin apte pentru a iniia
fenomenul de difereniere i maturare
celular
N.B Celulele stem se afl la originea
tuturor liniilor hematopoietice
Celulele stem se transfom n celule
PROGENITOARE ( X10 ca numr fa de
celulele stem)

Tipuri de celule stem

n funcie de gradul de potenialitate, exista
celule stem
Totipotente
Pluripotente, multipotente (CFU-M,
GEMM)=colony forming unit granulocyte
erythrocyte monocyte macrophage
Bipotente
Unipotente (CFU Eo, CFU Baso, CFUMega)=colony forming unit eosinophile,
basophile, megakaryoriocyte.

Diferite tipuri de uniti formatoare

de colonii ( colony forming units)
Colony-forming unit Lymphocyte (CFU-L)
Colony-forming unit Erythrocyte (CFU-E)
Colony-forming unit Granulo-Monocyte (CFUGM)
Colony-forming unit magakaryocyte (CFU-Me)
Colony-forming unit Basophil (CFU-B)
Colony-forming unit Eosinophil (CFU-Eo)

Factori de difereniere i cretere cu rol n

hematopoiez
Domeniu activ de cercetare, deoarece aceti
factori induc diferenierea i proliferarea,
att n creterea normal dar i n cea
neoplazic
Majoritatea factorilor induc proliferarea mai
multor tipuri de celule dar induc diferenierea
unui subset specific sau limitat de celule
In vitro: PROGENITORII sunt sensibili la
aciunea unor inductori: GM-CSF

Factori de stimulare a
coloniilor:
Colony stimulating factor (CSF)
Ex. GM-CSF (Granulo-Monocyte Colony
Stimulating Factor)

Hematopoeza:
2 linii de difereniere:

Linia Mieloid:

Linia Limfoid:

LINIA MIELOID- MIELOPOIEZA

1. Eritropoieza: eritrocite
2. Linia granulocito-monocitar:
2a.Granulocitar (granulocite PMN,
eozinofile, bazofile)
2b.Monocitar: monocite
3.Megakariopoeza ( Trombocitopoieza)

Eritropoeza
Celula stem pluripotent (CFP)
BFU-E (Burst forming Unit E, celulele formatoare de
colonii eritroide de tip exploziv
CFU-E (Colony forming unit-E, celule formatoare de
colonii eritroide)
Proeritroblast, celula cap de serie a seriei roii
Eritroblast bazofil
Eritroblast ortocromatofil
Eritroblast oxifil
Reticulocit
Eritrocit

Eritropoeza

 Proeritroblast
Eritroblast bazofil
Eritroblast ortocromatofil
Eritroblast oxifil
Reticulocit
Eritrocit

 Proeritroblastul
Diametru 20-25 m, nucleul ocup 80% din volumul
celular, este eucromatic, prezint mai muli nucleoli,
citoplasma este intens bazofil
Eritroblastul bazofil
Diametru 16-18 m, nucleu necondensat, uneori se
vad nucleoli, alteori nu; uneori prezinta halou
perinuclear, citoplasma mai putin intens bazofil
Eritroblastul policromatofil
Diametru 15 m,nucleu destul de condensat
(heterocromatina abundent), citoplasma i
modific nuana:exista putini ribozomi si apare Hb
in citoplasma, deci coexista acidofilia si bazofilia.

 Eritroblast ortocromatofil (aceeasi nuanta cu celula

adulta - acidofil)
Diametru 10-12m, nucleu condensat la maxim
(exista doar heterocromatina), nu are
nucleoli.Citoplasma contine o cantitate crescuta de
Hb care ii determina acidofilia. La ME se observa
eliminarea celor mai multe dintre organite.In stadiul
final celulele expulzeaz nucleul, membrana
celulara se reface i se formeaza reticulocitul.
Reticulocitul
Diametru 7m, fr nucleu.Citoplasma este diferit
de cea a hematiilor adulte prin prezenta ctorva
resturi de organite
Reticulocitele reprezinta 1% din elementele
circulante.

 Pentru seria rosie, mduva nu este un

compartiment de depozit, toate
elementele liniei roii fiind eliberate n
circulaie, spre deosebire de celulele
granulocitare ce pot stocate n mduva
atunci cnd organismul le necesit

 n mduva, raportul ntre precursorii liniei

roii i precursorii liniei granulocitare este
invers fa de formula leucocitar, n
mduv existnd de 3-4 ori mai multi
precursori ai granulocitelor decat ai
eritrocitelor.

 Nucleii eliminati de eritroblati sunt fagocitai de

macrofagele din mduva roie hematopietic.De
aceea exista o asociere intre hematopoieza si
aceste macrofage.
Durata de evoluie CSP-reticulocit este de5 - 7
zile.
Producia eritrocite/zi este egal cu distrugerea
numrului de eritrocite/zi (50 ml snge)

Granulocitopoieza. Seria granulocitara

Celula stem
mieloblast
promielocit
mielocit (neutrofil, eozinofil sau bazofil)
metamielocit (neutrofil, eozinofil sau bazofil)
granulocit nesegmentat
granulocit segmentat

Granulocitopoieza

 Eozinofil

Bazofil

Eozinofil

Seria monocitar

Celula stem
monoblast
monocit tanar
monocit adult

 Monocit

n esuturi poart numele de Macrofag

Megacariopoieza (=Trombocitopoieza)
Seria trombocitar (plachetar)

Celula stem
megacarioblast
promegacariocit
megacariocit trombocitogen
trombocite.

Megacariopoieza (=Trombocitopoieza)
Precursor megacariocitar
Megacarioblast

Megacariocit

Trombocite

Agregate plachetare

Exista un raport considerat normal intre precursori

care constituie mielograma (medulograma).

1 mmc MRH contine 70.000 - 100.000 de cariocite.

granulocite:
neutrofile 50-93%
eozinofile 1-7%
bazofile - rare
eritrocite - 13-25,5% - la 100 de granulocite
limfocite 1-10 % - la 100 de granulocite
monocite, plasmocite, histiocite - 3-10% - la 100 de
granulocite
megacariocite 1-8 - la 100 de granulocite

Aceste valori sunt variabile.

LINIA LIMFOID- LIMFOPOIEZA

Reprezint 5-20% din celulele medulare i
20% din leucocitele circulante.
Deriv din celule stem, care se transform
n precursori ai seriilor limfocitare B i T ce
se vor dezvolta n final n Limfocite mature B
i T.

LINIA LIMFOID- LIMFOPOIEZA

Deriv din celule stem, care se transform
n precursori ai seriilor limfocitare B i T ce
se vor dezvolta n final n limfocite mature
B i T.
Raportul dintre celulele B i T este de 1:3
Celula stem limfoblast limfocit tanar
limfocit adult

Maturizarea celulelor imune

Celulele imune derivate din mduv sunt
celule circulante a cror difereniere
primar are loc n organele limfoide
primare.
n aceast etap de difereniere celulele
imune nu pot recunoate antigenul

Maturizarea celulelor imune

Recunoaterea antigenului se poate realiza
dup maturizarea n organele limfoide
secundare.
Procesul de maturizare este concretizat n
apariia markerilor de suprafa
Faza efectoare de maturizare este cea care
apare dup ntlnirea cu antigenul.

 Celulele stem limfoide se maturizeaz iniial n

mduva hematopoietic (limfocitele B) i n
timus (limfocitele T).
Nu exist diferene morfologice ntre limfocitul B
i limfocitul T.
85-95% sunt limfocite de talie mic, iar 5% sunt
limfocite mari cu granulaii azurofile (NK).

 Limfocitele B prsesc mduva n stare de

maturitate biochimic i funcional iar
limfocitele T au nevoie de proliferare i
difereniere n timus. (Limfocitele B nu trec
prin timus).
Precursorii limfocitelor T se difereniaz n
limfocite imunocompetente n timus.

 Celulele precursoare T nu posed

receptori pentru antigen i nici molecule
(markeri) de suprafa CD3, CD4 i CD8
aceaste glicoproteine de suprafa vor fi
exprimate dup trecere prin timus.

 Iniial celulele precursoare (dublu

negative= fr CD4 sau CD8) vor exprima
ambii markeri de suprafa CD4 i CD8
(dublu pozitive) apoi se vor exprima fie
markerul CD4 fie markerul CD8 pe
suprafaa lor.

 n timus se produc 2 procese deosebit de

importante numite instruirea timic: Limfocitele
CD4 i CD 8 care au receptori pentru proteinele
proprii ( self) vor fi distruse (deleie clonal)
printr un program de moarte celular
programat numit apoptoz.
ndeprtarea acestor celule autoreactive numit
selecie negativ duce la tolerana la propriile
proteine i previne apariia reaciilor autoimune

 Celulele pozitive pentru markerii CD4 i CD8 care nu

recioneaz cu proteinele proprii ale complexului major
de histocopatibilitate MHC (Major Histocompatibility
Complex), cu rol n activare, sunt de asemenea
ndeprtate (distruse).
Acest proces se numete selecie pozitiv (se
pstreaz celulele CD4 i CD8 care reacioneaz cu
proteinele MHC). Ambele proprieti sunt necesare
pentru un rspuns imun eficient la limfocitelor T

 n timpul trecerii prin timus, fiecare celul T

dublu pozitiv va sintetiza un receptor pentru
antigene diferit, nalt specific.
Rearanjarea precoce a genelor variabile, de
diversitate i de legare care codific pentru un
receptor explic diferenierea limfocitelor T i st
la baza capacitii lor de a recunoate milioane
de antigene diferite.

 Limfocitele care prsesc timusul sunt

celule naive din punct de vedere
imunologic pentru c dei mature
biochimic nu pot rspunde specific
stimulrii unui antigen.
Rspunsul specific urmeaz dup
ntlnirea cu antigenul din organele
limfoide secundare

 Pentru a induce diferenierea i proliferarea

celulelor naive post timice este necesar
interaciunea unor molecule de pe receptorului
limfocitului T, TCR (T cell receptor) cu molecule
ligande de pe celulele prezentatoare de antigen
APC (antigen presenting cell). Celulele T
efectoare difer de celulele T naive prin faptul c
i pot exercita funcia dup legarea antigenului
de MHC fr molecule co-stimulatoare

 Limfocitele CD4 i CD8 prsesc timusul

i trec n circulaia general cu raportul
CD4/CD8 de 1,5.
O parte se plaseaz n zonele
timodependente ale organelor limfatice
secundare iar altele circul ntre snge i
limf n mod continuu.

 Producia de limfocite T crete din

sptmna 10 de via intrauterin pn
la pubertate.
Diferenierea post-timic duce la
producerea de celule T efectoare i
limfocite T de memorie care pot rspunde
rapid la ntlnirea ulterioar cu acelai
antigen.

 Markerii specifici al liniei celulare T sunt

CD3 i TCR.

 Limfocitele care au pe suprafa markerul

CD4 se numesc limfocite T helper
Limfocitele CD8 se numesc limfocite T
citotoxice

Limfocitele CD4 (helper)

Limfocitul T helper (CD4) este activat de antigenul
microorganismului patogen complexat cu proteinele
MHC II
Produce limfokine ce activeaz limfocitul B
(imunitatea umoral T dependent) i transformarea
limfocitelor B n plasmocite care vor produce
imunoglobuline (anticorpi).
Stimuleaz activarea limfocitelor CD8 citotoxice
Coordoneaz activitatea celorlalte celule imune
Activeaz macrofagele n dezvoltarea
hipersensibilitii de tip ntrziat (IV)
Limfocitele helper formeaz aproximativ 65% din
totalul limfocitelorT periferice i sunt celulele
predominante n timus, tonsile i snge.

Limfocitele CD8. Limfocitul T citotoxic ( CD8+).

T supresor.

Produce granule toxice care induc

moartea celulelor infectate viral, a
celulelor tumorale i a alogrefelor.
Mecanismele de distrugere sunt fie
prin eliberarea de perforine care
distrug membranele celulare fie prin
inducia apoptozei (moartea celular
programat).

Apoptoz

Limfocitele CD8. Limfocitul T citotoxic ( CD8+).

T supresor.
Limfocitul CD8 predomin n mduva osoas,
esutul limfoid intestinal i reprezint aproape
35% din celulele T periferice.
Exist i limfocite T (CD8+) supresoare cu rol n
limitarea (reglarea) reaciei imune, meninndu-l
n limite normale.
Raportul Th/Ts>1. (n SIDA raportul devine
subunitar).

LT, macrofage cu marker CD4

T citotoxic

T citotoxic ME

T citotoxic ME

macrofage tisulare: culoare roz

limfocite T : culoare verde

SEM x 9.900
Limfocit T culoare verde

Limfocit T semnalizat de celulele dendritice asupra

prezenei unui antigen

Limfocitele B
Reprezint baza imunitii umorale, se
difereniaz n plasmocite i elaboreaz
imunoglobulinele (anticorpii).

Origine
Precursorii limfocitelor B se afl n ficat n
cursul embriongenezei, de unde migreaz
la nivelul mduvei ososase, care este
principala lor localizare n cursul vieii de
adult.
Spre deosebire de limfocitele T, acestea
nu au nevoie de maturare la nivelul
timusului.

Origine
Originea limfocitelor B este celula
progenitoare bipotent ( la baza dezvoltrii
limfocitelor B i a limfocitelor T).
Formarea limfocitelor T diminueaz la
pubertate n timp ce limfocitele B se
difereniaz n tot cursul vieii.

Maturarea limfocitelor B prezint 2 faze:

faza antigen independent (prolimfocite,

prelimfocite i limfocite B)
faza antigen dependent, dup interaciunea
antigenului cu limfocitele B apar limfocitele B
activate i aceastea se transform n
plasmocit.

 Limfocitele B prezint pe suprafa IgM ca

receptor pentru antigen. IgM de suprafa
este un monomer, fa de IgM circulante
care sunt pentameri.
Unele limfocite B pot prezenta pe lang
IgM i IgD ca receptori de suprafa

LB i un macrofag

 Limfocitele B reprezint aproximativ 30%

din totalul limfocitelor circulante.
Mduva hematopoietic produce 10 9
10 10 limfocite B pe zi i durata lor de
via este de cteva zile sau sptmni.

 Limfocitele Bvirgine ( nainte de ntlnirea cu antigenul)

au durata medie de semivia de 4-5 zile n periferie.
Dintre acestea sunt selectate randomizat un procent de
limfocite B care vor recircula prin organele limfoide
secundare.
n ganglionii limfatici acestea se vor gsi n centrii
germinali
n splin se gsesc la nivelul pulpei albe
se gsesc i la nivelul esutului limfoid intestinal exemplu
plcile Peyer

Selecia clonal
Selecia clonal st la baza formrii
imunoglobulinelor.
Dup legarea antigenului, este stimulat
proliferarea limfocitelor B i formarea unei clone
celulare.
Celulele B selecionate vor deveni plasmocite
care vor secreta anticorpii specifici antigenului
care le a indus formarea.
O parte se vor transforma n limfocite de
memorie.

 Limfocitele de memorie rmn latente pentru perioade

lungi de timp dar sunt capabile de activare rapid dup
expunerea la acelai antigen.
Majoritatea limfocitelor B de memorie au pe suprafa
IgG care servesc ca receptori pentru antigen dar unele
au IgM.
Limfocitele T de memorie produc interleukine care cresc
producia de anticorpi a limfocitelor B de memorie.
Prezena limfocitelor de memorie explic apariia rapid
a anticorpilor n timpul rspunsului imun secundar.

N.B. Limfopoieza
Limfocitele B se matureaz n mduva
hematopoietic
Limfocitele T migreaz i se matureaz n timus
Dup maturare, limfocitele intr n circulaie i
ajung n organele limfoide secundare( splina si
ggl)- rol in supravegherea patogenilor si a
celulelor infectate
Limfocitele formeaza: celule efectoare i
limfocite de memorie

Limfocitele B i T
Componente celulare majore ale rspunsului
imun dobndit ( adaptativ)
Funcie: recunoatere a antigenelor nonselfn timpul procesului numit prezentare
antigenici eliminare a patogenilor sau a
celulelor infectate.
Limfocitele T sunt implicate in rspunsul imun
celular
Limfocitele B sunt implicate n rspunsul imun
umoral.

Limfocit

Limfocitele B
Activare: se transform n plasmocite i elaboreaz
anticorpi ( imunoglobuline)
Ig neutralizeaz :
-toxine bacteriene,
-virusuri
-produc opsonizarea ( nvelirea patogenilor).
Aprarea umoral e important in infeciile cu bacterii
ce produc toxine ( Clostridium tetani) sau posed
capsule polizaharidice ce interfer cu fagocitoza
(pneumococul)
n special patogenii extracelulari
O parte din Limfocitele B se transform n limfocite cu
memorie

Plasmocit

Plasmocite: mielom multiplu

Limfocitele NK
Numele e datorat puterii citotoxice spontane
( fr a avea nevoie de un stimul sau de
prezena MHC)
Limfocite mari cu granulaii
Rol n imunitatea natural
Elimin celulele modificate din cauza unei
infecii, neoplazii ( mai ales neoplazii
hematologice: ex. leucemie)
Nu exist rsuns imun secundar ( de memorie)

NK

NK

Limfocit mare

Cursul urmtor:
APR Celulele prezentatoare de antigen
(celulele dendritice,
monocitele/macrofagele, limfocitele B)
Alte celule implicate n rspunsul imun:
neutrofilele, eozinofilele, bazofilele i
mastocitele, plachetele, eritrocitele

Buletin de analize medicale Data setului de analize 13 Feb 2010 10:57:00

Cod cerere:581951 581951 Nume: ANASTASIAVarsta: 1Sex: F
Medic: CRISTINA MARIA MIHAI C.N.P: Cod pacient:
140100000495341SECTIA: DIABET BOLI NUTRITIE SI METAB. COPII
HEMATOLOGIE (DCELL60)
VALIDAT DE : N MUNTEANU Hemoleucograma
(DCell60) ANALIZEREZULTATEINTERVAL BIOLOGIC DE REFERINTA / UM
Leucocite 13.5 5.0 - 12 / 103/ul
Limfocite #4.2 0.8 - 4.0 / 103/ul
Mid #1.0 0.1 - 0.9 / 103/ul
Granulocite #8.3 2.0 - 7.0 / 103/ul
Limfocite 31.4 20.0 - 40.0 / %
Mid7. 4 3.0 - 9.0 / %
Granulocite 61.2 50 - 70 / %
Hemoglobina 9.8 12 - 15.5 / g/dl
Hematii 3.82 4.0 - 5.2 / 106/uL
Hematocrit 30.7 35 - 49 / %
MCV 80.5 82 - 95 / fL
MCH 25.6 27.0 - 31 / pg
MCHC 31.9 32.0 - 36.0 / g/dl
RDW-CV 14.7 11.5 - 14.5 / %
RDW-SD 42.6 35.0 - 56.0 / fL
Trombocite 198 150 - 350 / 103/ul
MPV 10.1 7.0 - 11.0 / fL
PDW 15.9 15.0 - 17.0
Plachetocrit 0.199 0.108 - 0.282 / %