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EMBRIONES DE POLLO.
Laboratorio de Virologa
Embrin de 2 cm 7 das
Equipos.
Incubadora 34o C.
Refrigerador (4 C).
Congelador (- 70 C).
Centrfuga.
Cmara para observacin de los
huevos embrionados.
Materiales y Reactivos
Huevos de embrionados de 9-11 das,
de cscara blanca (raza White
Leghorn).
Etanol al 70%.
Jeringuillas de 1mL.
Agujas, No. 22, por 1 pulgadas.
Punzn.
Parafina.
Frascos o tubos con capacidad para
15 mL.
Pipetas de 10 mL.
Pinzas.
Rotulador.
Crioviales.
Placas de microtitulacin de
96 pozuelo, fondo en U.
Antibiticos.
Suspensin de eritrocitos de
pollo y curiel.
Reactivos necesarios para la
prueba de HA (Soluciones
salinas y antisueros).
Reactivos necesarios para la
prueba de IHA (Soluciones
salinas y antisueros).
I.2.1.-Preparacin de reactivos.
I.2.2.-Procedimiento
I.2.3.- Cosecha
.
1.- Colocar los huevos embrionados a 4o C durante toda la noche, antes de
la cosecha.
2.- Rotular los tubos para cada huevo embrionado con el nmero
correspondiente.
3.- Limpiar la zona de la cmara de aire con algodn o hisopo de gaza y
alcohol al 70%.
4.- Abrir la cmara de aire con tijeras estriles. Romper la membrana
alantoidea, con una pinza estril y colectar con una pipeta de 10 mL el
lquido alantoideo, colocndolo en uno de los tubos o frascos rotulados. El
lquido amnitico debe ser colectado con una jeringuilla y aguja, y debe
colocarse en otro frasco o tubo (la cantidad de lquido amnitico obtenido es
poca, puede unirse a la cantidad aspirada de todos los embriones
de la misma muestra analizada). Debe realizarse prueba de esterilidad a los
lquidos colectados.
5.- Los lquidos amniticos y alantoideos colectados deben guardarse a 4
C hasta realizarla prueba de hemaglutinacin.