ENZIMAS

Ing: WALTER ALBERTO PAREDES

ORELLANA

ENZIMAS
E + S ---------- CES -------- E + P

Los enzimas son protenas que catalizan reacciones qumicas en los seres
vivos.

Los enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse

en una reaccin, aumentan notablemente su velocidad. No hacen factibles
las reacciones imposibles, sino que solamente aceleran las que
espontneamente podran producirse. Ello hace posible que en
condiciones fisiolgicas tengan lugar reacciones que sin catalizador
requeriran condiciones extremas de presin, temperatura o pH.

Los enzimas son catalizadores de los sistemas biolgicos, son molculas de

gran inters que determinan las pautas de transformaciones qumicas.
Tambin intervienen en las transformaciones de diferentes tipos de energa.
La caracterstica mas sobresaliente de las enzimas son su poder cataltico y
especificidad
La actividad de muchas enzimas est regulada.

Casi todas las enzimas son protenas, sin embargo el descubrimiento que
existen molculas de RNA catalticamente activas indican que las protenas
no tienen un monopolio absoluto como catalizadores.

Los enzimas tambin pueden actuar como interruptores moleculares

que regulan la actividad cataltica transforman energa debido a su
capacidad para acoplar la actividad de los centros de unin .
Las enzimas aceleran las reacciones multiplicando su velocidad por un
milln de veces e incluso ms.

Muchas enzimas presentan estreo especificidad, lo que significa, que

actan sobre un solo estreo isomero del sustrato. Tal vez el aspecto
general mas importante de la especificiodad de las enzimas es la
especificidad de reaccin, esta es la falta de formacin de sub. productos
de desecho, su eficiencia llega al 100 %.

La eficiencia de las enzimas solo ahorra energa para la clula viva, si no la

formacin de sub productos del metabolismo potencialmente txicos, algunas
enzimas funcionan como puntos de control en el metabolismo..

Gran parte de la historia de la bioqumica es la historia de la investigacin de los

Enzimas.
El nombre de las enzimas (en levadura) no se empleo hasta 1887, pero mucho
mas antes ya se sospechaba que ciertos catalizadores biolgicos intervienen
en la Fermentacin del azcar para formar alcohol ( de aqu el
nombre de fermentos)

ENZIMAS: RESEA HISTORICA

Primera descripcin (finales del siglo XVIII)
1850. Estudios de Pasteur
1897. Buchner
1926. Summer cristaliza la ureasa
Segunda mitad del siglo XX: se purifican y
caracterizan millares de enzimas, lo que ha
permitido conocer su mecanismo de accin.

BREVE HISTORIA DE LAS ENZIMAS

Desde hace cientos de aos se han venido empleando enzimas en procesos de
fermentacin tales como la fabricacin de quesos, fabricacin del pan, vino y
cerveza.
Fue en 1860 cuando Luis Pasteur comunic que las enzimas estaban ntimamente
ligadas con la estructura vital de las clulas de la levadura.
En 1876, Willian Kuhne propuso el nombre de enzima. Este trmino deriva de
las palabras griegas en (en) y zyme (levadura).
En 1897, Eduard Buchner prob que las enzimas podan ser extradas de las
clulas de las levaduras y ser usadas por si mismas.
A partir de este descubrimiento y de diversos substratos se empezaron a
extraer enzimas muy diversas y con destinos diferentes que hicieron que su
empleo se extendiera a diversas ramas de la industria, tales como
detergentes, fabricacin del papel, fabricacin textil, tratamiento de cueros,
farmacia, destilera, aceites y grasas, almidones y azcares, etc. etc.

COMO TRABAJAN LAS ENZIMAS ?

Las enzimas son protenas que son producidas de manera natural por todos los
seres vivos.
Las enzimas aceleran las reacciones qumicas del organismo.
La digestin es una reaccin qumica en la cual diferentes enzimas se unen a
molculas de alimento de alto peso molecular (substratos) para formar
complejos
enzimticos .
Las enzimas aceleran la ruptura de esas molculas grandes en molculas ms
pequeas las cuales son absorbidas a travs de la membrana intestinal para ser
utilizadas por el animal para el crecimiento.
Cada enzima es especialmente especfica a su substrato, sera como una llave
que solamente encajara en su cerradura.

CATALISIS
CATALISIS deriva del griego desatar se define como:
aceleracin de reacciones qumicas por adicin de pequeas cantidades de
sustancias extraas al sistema reaccionante llamados catalizadores
CATALIZADOR
Un catalizador es una sustancia que acelera una reaccin qumica,
hasta hacerla instantnea o casi instantnea. Un catalizador acelera la
reaccin al disminuir la energa de activacin.

- El catalizador no inicia una reaccin, tan solo acelera una transformacin

qumica.
- - El catalizador aumenta la velocidad de reaccin y acorta el tiempo de equilibrio.
- - El catalizador permanece invariante al final de la reaccin
- - El catalizador puede ser especifico, o no , y esta presente en pequeas
concentraciones.
- - El catalizador disminuye la energa de activacin.
- - El catalizador ejerce su accin sin alterar las leyes estequiometricas

CLASES DE CATALIZADOR : INORGANICOS Y ORGANICOS.

INORGANICOS. Sin de bajo peso molecular, termoestables, no
especficos, no proteicos y dializan a travs de membranas
semipermeables. Ej. Platino, cobre. Etc.
ORGANICOS. Son de alto peso molecular, termolbiles, especficos,
de carcter proteico y no dializan a travs de una membrana semi
permeable. Ej. ENZIMAS.

Reaccin
Descomposicin
de H2O2

Catalizador

Temperatura(C)

Energa(Kcal/mol)

Ninguno

20

Fe2+

22

10

22

1,7

Catalasa

Descomposicin enzimtica del agua oxigenada. comparacin de

las energas de activacin para la descomposicin del perxido de
hidrgeno, en ausencia o presencia de un catalizador

18

Evolucin energtica de una reaccin qumica. Se observa

la diferencia energtica entre los estados de transicin de las reacciones
catalizada y no catalizada.

Son biocatalizadores proteicos complejos con cierto grado de

especificidad producido por las clulas vivas y cuya funcin es acelerar la
velocidad de las reacciones bioqumicas sin modificarse.
Su estructura qumica nos revela que son protenas globulares que
poseen estructuras primarias, secundarias, terciarias y cuaternarias.
Algunas enzimas son holoproteinas ribonucleasas, lisozimas.
Otras son heteroproteinas posee parte proteica y no proteica (cofactor)
(aldolasa, DH-asa lctica)

Muchas enzimas son secretadas por las clulas, en forma INACTIVA

llamadas ZINOGENOS o PRO ENZIMAS (estomago, pancreas)
una vez secretados bajo condiciones del medio son activados para
que realicen trabajo especifico y altamente catalitico.

Enzimas: Nomenclatura
Muchas enzimas se nombran aadiendo el sufijo -asa al nombre de su
sustrato. Por ejemplo, la ureasa es la enzima que cataliza la hidrlisis de
urea y la fructosa 1,6-bisfosfatasa hidroliza la fructosa 1,6-bisfosfatasa
Sin embargo, existen enzimas como la tripsina PEPSINA y quimotripsina
que tienen nombres que no especifican su actividad.
La clasificacin de las enzimas por la Comisin Internacional de
Enzimas (CIE) esta determinado:
NOMBRE RECOMENDADO, Generalmente es corto y apropiado para
su uso habitual
NOMBRE SISTEMATICO, identifica la reaccin que cataliza
NUMERO DE CLASIFICACION, se emplea cuando se precisa la
identificacin inequvoca de la enzima, tal como ocurre en las revistas
internacionales de investigacin y libros especializados.

ATP+CREATINA ---------- ADP + FOSFOCREATINA

NOMBRE RECOMENDADO: CREATIN-QUINASA.

NOMBRE SISTEMATICO: se basa en la reaccin catalizada, ATP:
CREATIN-FOSFOTRANSFERASA
NUMERO DE CLASIFICACION: EC: 2.7.3..2. donde significa.:
EC: Comisin de Enzima
2: Nombre de la clase (Transferasa)
7: Representa la sub clase (Fosfotransfersa)
3: La sub-clase de la sub clase (Fosfotransferasa con un grupo
nitrogenado como aceptor)
2: Designa como (Creatin-quinasa)

Grupo transferido

Nombre sistemtico:

ATP: creatin-fosfotransferasa
Donador

Aceptor

Nmero sistemtico
Enzyme
Comission

Grupo Subgrupo

EC 2.7.3.2

Enzima

Sub-subgrupo

Nombre comn o recomendado: CREATIN QUINASA

Grupo transferido

Nombre sistemtico:

ATP: hexosa fosfotransferasa

Donador

Aceptor

Nmero sistemtico
Enzyme
Comission

Grupo Subgrupo

EC 2.7.1.1
Sub-subgrupo

Nombre comn o recomendado: Hexokinasa

Enzima

Una forma general de denominar a las enzimas es aadir el sufijo "asa" al

nombre del sustrato. As, la ureasa es la enzima que cataliza la hidrlisis de la
urea formando amonaco y dixido de carbono.

H2N -CO-NH2 + H2O ---(Ureasa)--> CO2 + 2 NH3

Sin embargo con el descubrimiento de nuevas enzimas esta

nomenclatura resulta a veces confusa. Actualmente se ha adoptado
ciertas recomendaciones de la Internacional Enzima Comisin, que
pretende sistematizar la nomenclatura y clasificacin de las diferentes
enzimas conocidas. Este sistema divide a las enzimas en seis clases
que a su vez pueden tener diferentes subclases

Clasificacin Internacional de las Enzimas

xido Reductasas (reacciones de oxido- reduccin) Actan sobre ": CH OH "

Actan sobre ": C = O "
Actan sobre ": C = CH "
Actan sobre ": CH NH2 "
Actan sobre ": CH NH "
Hidrolasas (reacciones de hidrlisis)
Esteres
Enlaces glucosdico
Enlaces pepsdicos
Otros enlaces C N
Anhdridos de cido
Transferasas (transferencia de grupos funcionales)
Grupos de un tomo de C
Grupos aldehdos o cetnicos
Grupos acilos
Grupos glucosilos
Grupos fosfatos
Grupos que contienen azufre
Liasas (Adicin a los dobles enlaces)
:C=C:
:C=O
:C=N
Isomerasas (reaccin de isomerizacin)
Racemasas
Ligasas (Formacin de enlaces con escisin de ATP)
:CO
:CN
:CS

nomenclatura de las enzimas, se ha establecido internacionalmente una

clasificacin de enzimas (EC).
Cada enzima se identifica con un nmero nico de clasificacin de cuatro
dgitos. Por ejemplo la tripsina tiene el nmero EC 3.4.21.4, donde el
primer nmero (3) indica que es una hidrolasa, el segundo nmero (4), que
es una proteasa que hidroliza enlaces peptdicos, el tercer nmero (21)
que es una proteasa de serina que contiene un residuo de serina crtico en
el sitio activo y el cuarto nmero (4) indica que fue la cuarta enzima a la
que se asign la clasificacin en esta categora.

CLASIFICACIN DE LOS ENZIMAS

Para sistematizar la clasificacin y nomenclatura de las enzimas, se ha

establecido internacionalmente una clasificacin de enzimas (EC). Este
sistema coloca a las enzimas en seis clases principales, basado en el tipo
de reaccin que catalizan .
En funcin de su accin cataltica
especfica, los enzimas se clasifican en 6
grandes grupos o clases:
Clase 1: OXIDORREDUCTASAS
Clase 2: TRANSFERASAS
Clase 3: HIDROLASAS
Clase 4: LIASAS
Clase 5: ISOMERASAS
Clase 6: LIGASAS

OXIDOREDUCTASAS

Catalizan reacciones de oxidorreduccin, es

decir, transferencia de hidrgeno (H) o
electrones (e-) de un sustrato a otro, segn
la reaccin general:

Ared + Box

Aox + Bred

AH2 + B

A + BH2

Ejemplos son la succinato deshidrogenasa

o la citocromo c oxidasa.

Grupo 1: Oxidorreductasas
Catalizan reacciones de oxidorreduccin

Ared + Box

Aox + Bred

A : es el reductor o dador electrnico; en el curso

de la reaccin se oxida (pierde electrones)

B : es el oxidante o aceptor electrnico; en el curso

de la reaccin se reduce (gana electrones)
En las reacciones redox, siempre tienen que estar
presentes a la vez el aceptor y el dador electrnico.

Dador: Aceptor oxidorreductasa

Glucosa : O2 oxidorreductasa
Dador

Aceptor

EC 1.1.3.4

Nombre comn:
Glucosa oxidasa

Los subgrupos se forman segn la naturaleza del dador:

1.1.-.- Sobre grupos alcohol
1.2.-.- Sobre grupos aldehido
1.3.-.- Sobre grupos -CH-CHetc.

Nomenclatura alternativa en oxidorreductasas :

1. Deshidrogenasas
2. Oxidasas
3. Peroxidasas
4. Oxigenasas
5. Hidroxilasas
6. Reductasas

TRANSFERASAS
Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del
hidrgeno) de un sustrato a otro, segn la reaccin:
A-B + C

A + C-B

Un ejemplo es la glucoquinasa, que

cataliza la reaccin representada en la
Figura de la derecha:

glucosa + ATP

ADP + glucosa-6-fosfato

Grupo 2: Transferasas
Catalizan reacciones de transferencia de grupo:

A-X + B

A + B-X

Dador: Aceptor - Grupo transferido - transferasa

ATP: D-Hexosa Fosfotransferasa
Nombre comn: hexokinasa

EC 2.7.1.1

Clasificacin de las transferasas

2.1.-.2.2.-.2.3.-.2.4.-.2.5.-.2.6.-.2.7.-.2.8.-.-

Grupos monocarbonados
Grupos aldehido o ceto
Aciltransferasas
Glicosiltransferasas
Alquil- o Ariltransferasas
Grupos nitrogenados
Grupos fosfato
Grupos sulfato

HIDROLASAS
Catalizan las reacciones de hidrlisis:
A-B + H2O

AH + B-OH

Un ejemplo es la lactasa, que cataliza la reaccin

lactosa + agua

glucosa + galactosa

Grupo 3: Hidrolasas
Catalizan reacciones de hidrlisis

A-B + H2O

A-OH + H-B

No se suelen utilizar nombres sistemticos en las

hidrolasas. Muchas de ellas conservan el nombre
primitivo: Tripsina, Pepsina, Papana, etc.

Clasificacin de las hidrolasas

3.1.-.3.2.-.3.3.-.3.4.-.3.5.-.etc.

Esterasas (carboxilesterasas, fosfoesterasas, sulfoesterasas)

Glicosidasas
ter hidrolasas
Pptido hidrolasas
Acil anhdrido hidrolasas

Pptido hidrolasas: clasificacin comn (no sistemtica)

I. Segn la situacin del enlace atacado:

- Exopeptidasas (en los extremos de la cadena) (Peptidasas)
- Endopeptidasas (en el interior de la cadena) (Proteinasas)
II. Segn el mecanismo cataltico:
- Serin proteinasas
- Tiol proteinasas
- Aspartil proteinasas
- Metaloproteinasas

LIASAS
Catalizan reacciones de ruptura o
soldadura de sustratos:

A-B

A+B

Un ejemplo es la acetacetato
descarboxilasa, que cataliza la reaccin:

cido acetactico

CO2 + acetona

Grupo 4: Liasas
Catalizan reacciones reversibles de adicin de un grupo a
un doble enlace:

AXB

A=B + X
COOCH
CH
COOFumarato
(trans-)

H2O

COOHO CH
CH2
COOL-Malato

Algunas reacciones lisicas:

- Descarboxilasas
- Aldolasas
- Anhidrasa carbnica
- Adenilato ciclasa

ISOMERASAS
Catalizan la interconversin de ismeros:
A

Son ejemplos la fosfotriosa isomerasa

y la fosfoglucosa isomerasa, que
catalizan las reacciones representadas
en la tabla inferior:
fosfotriosa isomerasa
gliceraldehdo3-fosfato

dihidroxiacetonafosfato

glucosa-6fosfato

fosfoglucosa
isomerasa
fructosa-6fosfato

Grupo 5: Isomerasas
Catalizan reacciones de isomerizacin
Algunas reacciones isomersicas:
- Racemasas
- Oxidorreductasas intramoleculares
- Mutasas o transferasas intramoleculares

LIGASAS
Catalizan la unin de dos sustratos con
hidrlisis simultnea de un nucletido
trifosfato (ATP, GTP, etc.):
A + B + XTP

A-B + XDP + Pi

Un ejemplo es la piruvato carboxilasa, que

cataliza la reaccin:

piruvato + CO2 + ATP

oxaloacetato + ADP + Pi

Grupo 6: Ligasas
Catalizan la unin de dos grupos qumicos a expensas
de la hidrlisis de un enlace de alta energa.

A + B + ATP

A-B + ADP + Pi

O bien

C + D + ATP

C-D + AMP + PPi

Algunas reacciones ligsicas:

- Aminoacil-tRNA sintetasas
- Glutamina sintetasa
- Carboxilasas

xido Reductasas (reacciones de oxido- reduccin) Actan sobre ":

CH OH "
Actan sobre ": C = O "
Actan sobre ": C = CH "
Actan sobre ": CH NH2 "
Actan sobre ": CH NH "
Hidrolasas (reacciones de hidrlisis)
Esteres
Enlaces glucosdico
Enlaces pepsdicos
Otros enlaces C N
Anhdridos de cido

Transferasas (transferencia de grupos funcionales)

Grupos de un tomo de C
Grupos aldehdos o cetnicos
Grupos acilos
Grupos lucoslos
Grupos fosfatos
Grupos que contienen azufre
Liasas (Adicin a los dobles enlaces)
:C=C:
:C=O
:C=N
Isomerasas (reaccin de isomerizacin)
Racemasas
Ligasas (Formacin de enlaces con escisin de ATP)
:CO
:CN
:CS
:CC

EFECTO DE LOS COFACTORES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

A veces, un enzima requiere para su funcin la presencia de sustancias no

proteicas que colaboran en la catlisis: los cofactores.

COENZIMAS

HALOENZIMA

APOENZIMA

COFACTOR
GRUPO
PROSTETICO

INORGANICOS

COENZIMAS

muchas ocasiones los enzimas precisan la colaboracin de otra molcula para

izar la catlisis. Estas molculas que colaboran con los enzimas en la catlisis
imtica son los cofactores, que si es una molcula de naturaleza orgnica recibe
nombre de coenzima.
Los coenzimas son moleculas de bajo PM, dializables, termoestables y unidos
debilmente a la apoenzima (interaccion no cobalente) y solo se une en curso de
la reaccin, se le considera como cosustrato, sufre modificaciones en su
estructura qumica, luego se separa de la apoenzima.
Los coenzimas actan como dadores o aceptores de elementos como
electrones,
tomos o grupos funcionales que participan en la reaccin enzimtica.
El coenzima puede encontrarse, por tanto, en dos formas:
descargado.- cuando no esta unido al elemento y, por tanto, acta como
aceptor de
dicho elemento
cargado.- cuando est unido a dicho elemento y, por tanto, acta como dador
de dicho
elemento.

COENZIMAS.
COENZIMA A
TRANSFERASA

CoA-SH

UBIQUINONA

CoQ

Ac. TETRAHIDROFOLICO FH4

TRIFOSFATO
DE ADENOSINA

ATP

Ac. PANTOTENICO
NO TIENE
Ac. FOLICO
NO TIENE

NICOTINAMIDA
NAD
NIACINA
ADENOSINA DINUCLEITIDO FOSFATO

LIGASA,
DESHIDROGENASAS
TRANSFERASAS
FOSFORILASA
OXIDOREDUCTASA

NADH
FLAVINA ADENINA FMN
MONONUCLEOTIDO Y
DINICLEOTIDO
FAD

RIBOFLAVINA

OXIDOREDUCTASAS

GRUPO PROSTETICO

Son molculas de bajo peso molecular, dilalizables,

termoestables, y unidos fuertemente al apoenzima por
enlaces covalentes son parte integrante de la enzima y no se
separan.

FOSFATO DE PIRIDOXAL PAL

PIRIDOXINA
TRANSAMINASAS,
RACEMASAS DESCARBOXILASAS
PIROFOSFATO DE TIAMINA TPP TIAMINA B1
DESCABOXILASA
COBAMIDA
B12
METIL TRANSFERASA, ISOMERASAS
BIOTINA
CARBOXILASA

BIOTINA Vit H

Ac. LIPOICO
DESCARBOXILASAS

AC. LIPOICO

HEMINA
HEM
PEROXIDASAS CATALASAS

Enfermedades
carenciales

VITAMINAS

FUNCIONES

C (cido ascrbico)

Coenzima de algunas
peptidasas. Interviene en la Escorbuto
sntesis de colgeno

B1 (tiamina)

Coenzima de las
descarboxilasas y de las
enzima que transfieren
grupos aldehidos

B2 (riboflavina)

Constituyente de los
coenzimas FAD y FMN

B3 (cido pantotnico)

Constituyente de la CoA

B5 (niacina)
B6 ( piridoxina)

Beriberi
Dermatitis y lesiones en
las mucosas
Fatiga y trastornos del
sueo

Constituyente de las
Pelagra
coenzimas NAD y NADP
Interviene en las reacciones
de transferencia de grupos Depresin, anemia
aminos.

B12 (cobalamina)

Coenzima en la
transferencia de grupos
metilo.

Anemia perniciosa

Biotina

Coenzima de las enzimas

que transfieren grupos
carboxilo, en metabolismo
de aminocidos.

Fatiga, dermatitis...

y sirven como puentes de unin entre la enzima y el sustrato,

cumplen las funciones catalticos y estructurales en las metal
enzimas.
el ion metlico posee una actividad cataltica primaria y se
incrementa por la enzima
Los complejos ternarios pueden formar entre enzima, metal y
sustrato
E-S-M COMPLEJO TERNARIO CON SUSTRATO COMO
PUENTE
E-M-S- COMPLEJO COMO METAL COMO PUENTE

Los cofactores pueden ser iones inorgnicos como el Fe++, Mg++, Mn++,
Zn++ etc. Casi un tercio de los enzimas conocidos requieren cofactores.
Cuando el cofactor es una molcula orgnica se llama coenzima.
Muchos de estos coenzimas se sintetizan a partir de vitaminas.
En la figura inferior podemos observar una molcula de hemoglobina
(protena que transporta oxgeno) y su coenzima (el grupo hemo).
Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran unidos covalentemente al
enzima se llaman grupos prostticos. La forma catalticamente activa del enzima,
es decir, el enzima unida a su grupo prosttico, se llama holoenzima. La parte proteica
de un holoenzima (inactiva) se llama apoenzima, de forma que:

Activadores Metlicos
Elemento

Enzima Activada

Zn++

Deshidrogenasas, anhidrasa carbnica, ARN y ADN

polimerasas.

Mg++
Mn++
Mo
Fe2+, Fe3+

Fosfohidrolasas, fosfotransferasas, fosfatasas.

Arginasas, peptidasas, quinasas.
Nitratoreductasa, nitrogenasa.
Citocromos, catalasas, ferredoxina, peroxidasas,
nitritoreductasa.

Cu2+

Citocromo oxidasa, tirosinasa, cido ascrbico oxidasa,

plastocianina

Ca2+
K+
Co

1,3 b glucansintetasa, calmodulina.

Piruvato fosfoquinasa, ATPasa.
Vitamina B12 hallada en microorganismos y animales,
pero no en plantas. Importante en la fijacin simbitica
de nitrgeno.

Ni

Ureasa.

CARACTERSTICAS DE LA ACCIN ENZIMTICA

La caracterstica ms sobresaliente de los enzimas es su elevada
especificidad. Esta es doble y explica que no se formen subproductos:
Especificidad de sustrato. El sustrato (S) es la molcula sobre la
que el enzima ejerce su accin cataltica.
Especificidad de accin. Cada reaccin est catalizada por un
enzima especfico.
La accin enzimtica se caracteriza por la formacin de un complejo
que representa el estado de transicin.

E+S

CES

E+P

E+S

CES

E+P

"Se puede, sin simplificar casi, admitir que cada enzima, en el organismo,
ejerce su actividad cataltica en un solo punto del metabolismo. Es ante todo
por su extraordinaria efectividad de accin que las enzimas se distinguen de
los catalizadores no biolgicos empleados en laboratorio o en la industria.
Entre estos ltimos los hay muy activos, es decir capaces en muy pequea
cantidad de acelerar considerablemente diversas reacciones. Ninguno de estos
catalizadores, no obstante, se aproxima en especificidad de accin a la enzima
ms vulgar.

Sin duda que la especificidad de la accin enzimtica es lo ms misterioso

de su conducta biolgica. Todava ms si se piensa en que estn controladas
por el genoma, lo que significa que es una especificidad adquirida a travs de
la evolucin. El genoma produce exactamente las enzimas que se requieren.

Los enzimas son muy especficos, discriminando fcilmente entre sustratos con
estructuras muy similares. Existen dos principios fundamentales que estn
interrelacionados y que proporcionan una explicacin general de cmo
funcionan los enzimas. Primero, el poder cataltico de los enzimas proviene en
ltimo trmino de la energa libre emitida al formarse los mltiples enlaces
dbiles e interacciones que se producen entre el enzima y el sustratro. Esta
energa de fijacin proporciona tanto especificidad como catlisis. Segundo, las
interacciones dbiles son ptimas en el estado de transicin de la reaccin; los
sitios activos de los enzimas son complementarios no a los sustratos, si no a
los estados de transicin de las reacciones que catalizan.
La misma energa de fijacin que aporta energa para la catlisis tambin hace
que el enzima sea especfico. La especificidad se refiere a la capacidad de un
enzima de discriminar entre dos sutratos competitivos.

ESPECIFICIDAD
La especificidad es la propiedad que tiene las enzimas de actuar sobre
determinado sustrato y funcin y no sobre otra. Para demostrar la especificidad
de la amilasa se podra probar la actividad de la amilasa con almidn, con
celulosa y con glucgeno. Estas son molculas parecidas, y sin embargo hay
diferentes enzimas que degradan a cada una de ellas

TIPOS DE ESPECIFICIDAD

ESPECIFICIDAD ABSOLUTA O ESTRTICTA

ESPECIFICIDAD DE GRUPO O ENLACE
ESPECIFICIDAD ESTEREOQUMICA O GEOMETRICA
.

ESPECIFICIDAD ABSOLUTA O ESTRICTA: Enzimas solo

reconocen y catalizan un solo tipo de sustrato..
UREASA ----- UREA
FUMARASA----- Ac. FUMARICO
MALTASA ------ MALTOSA
GLUCOSA 6 FOSFATASA ----- GLUCOSA 6 FOSFATO

ESPECIFICIDAD DE GRUPO
ESPECIFICIDAD DE GRUPO O ENLACE.
Enzimas que reconocen al sustrato como enlace quimico particular:
Ej.
Peptidasas ( tripsina, pepsina) atacan los enlaces peptidicos.
Tripsina -- ataca el grupo COOH del enlace donde este dado por lisina o
arginina
Proteasas actua sobre los enlaces donde se encuentren los AA basicos o
alifaticos
Pepsina --- Actua sobre los enlaces que contienen AA aromaticos o acidos.

ESPECIFICIDAD ESTEQUIOMETRICA

El requisito de estereoespecificidad para los sustratos es muy

importante. Las enzimas que habitualmente atacan a los azcares
naturales con configuracin D-, no lo hacen sobre sus ismeros
artificiales L-; las enzimas tan activas en la naturaleza sobre los
aminocidos comunes tipo L- so inactivas para los aminocidos
artificiales (o muy raros en los organismos vivos) de tipo D-. Esto es tan
absoluto que cuando existen mezclas racmicas de ismeros D- y L-,
un mtodo conveniente de separarlas, es el de dejar que actue sobre
ellas una enzima que degradar exclusivamente a uno de los dos
ismeros dejando al otro intacto.

EN BASE A LA DISPOSICIN DEL ISOMERO

ENZIMAS QUE RECONOCEN ISOMEROS D o L
D- AMINOACIDOS o L AMINOACIDOS
D- MONOSACARIDOS L MONOSACARIDOS

EN BASE A LOS ISOMEROS CIS TRAMS

Los ismeros cis trans en que solo uno de los tipos del par es atacado. La
fumarasa introduce una molcula de agua en el cido fumrico trans, pero el
ismero cis, o sea el cido maleico, no es atacado

H C COOH H C COOH
HOOC C H H C COOH
cido fumrico (trans) cido malico (cis)

ENZIMAS RACEMASAS O ESTEROISOMERASAS

Enzimas que convierten un isomero en otro, osea reconocen
isomeros L y los convierten en D

Patrn de los carbohidratos

Centro Activo y Modelos

EL SITIO CATALTICO

Es aquella porcin de aminocidos de la protena que

participa en el proceso cataltico, es decir el sitio activo
esta formado por ciertos aminoacidos que forman un micro
ambiente catalizador dentro de la propia molecula del
polipeptido.

Aa de
conformaci
n

Aa de
contacto

Aa cataliticos

Los grupos funcionales de los AA en el sitio activo son:

-

Grupo sulfidrilo de la cisteina

- Grupo imidiazol de la histidina
- Grupo guanidilo de la arginina
- Grupo carboxilo del Ac. Aspartico
- grupo carboxilo del ac. Glutanico
- grupo amonico del la glicina

El gran tamao de las protenas en relacin a los sustratos

condujo al concepto de que una regin restringida de la enzima
le concerna a la catlisis. Esta regin fue denominada Sitio
Activo. Ahora nos referimos al sitio cataltico, del cual existen dos
modelos propuestos:

Modelo de "Cerradura y Llave" o modelo "De

Molde" de un sitio cataltico: Fue propuesto por Emil
Fischer. En la actualidad se utiliza solamente para
entender ciertas propiedades de las enzimas. La
desventaja se este modelo se encuentra en la rigidez
del sitio cataltico.

La llave y la cerradura(Fisher, 1890)

Centro activo y sustrato son
perfectamente complementarios
Reconocimiento molecular

Modelo de "Ajuste Inducido" de un sitio cataltico: Este

modelo recibe ahora considerable apoyo experimental. Un
carcter escencial es la flecibilidad implcita de la regin del
sitio cataltico.

Modelo de ajuste inducido de Koshland.

Hexoquinasa.

Ajuste inducido(Koshland, 1958)

La unin del sustrato induce un cambio en el centro activo
que aumenta la complementariedad
Reconocimiento molecular DINAMICO

Prcticamente todas las reacciones qumicas que tienen lugar en los seres
vivos estn catalizadas por enzimas. Los enzimas son catalizadores especficos:
cada enzima cataliza un solo tipo de reaccin, y casi siempre acta sobre un nico
sustrato o sobre un grupo muy reducido de ellos. En una reaccin catalizada por
un enzima:

E+S

CES

E+P

La sustancia sobre la que acta el enzima se llama sustrato.

El sustrato se une a una regin concreta del enzima, llamada centro activo.
El centro activo comprende (1) un sitio de unin formado por los aminocidos que
estn en contacto directo con el sustrato y (2) un sitio cataltico, formado por los
aminocidos directamente implicados en el mecanismo de la reaccin
Una vez formados los productos el enzima puede comenzar un nuevo ciclo de
reaccin

1.- El enzima y su
sustrato

2.- Unin al centro

activo

3.- Formacin de
productos

Los enzimas, a diferencia de los catalizadores inorgnicos catalizan reacciones

especficas. Sin embargo hay distintos grados de especificidad. El enzima
sacarasa es muy especfico: rompe el enlace b-glucosdico de la sacarosa o de
compuestos muy similares. As, para el enzima sacarasa, la sacarosa es su
sustrato natural, mientras que la maltosa y la isomaltosa son sustratos anlogos.
El enzima acta con mxima eficacia sobre el sustrato natural y con menor eficacia
sobre los sustratos anlogos. Entre los enzimas poco especficos estn las
proteasas digestivas como la quimotripsina, que rompe los enlaces amida de
protenas y pptidos de muy diverso tipo.

Mecanismos de eficencia
catalitica

1. Mecanismo de aproximacin y orientacin

2. Mecanismos de catlisis covalente: existen enlaces

covalentes transitorios entre la enzima sustrato:
- Enlace ester
- - Enlace acil imidiazol
- - Enlace base schiff

3. Mecanismos o catlisis por acido base, para esta catlisis se

utiliza los
H + o 0H - presentes en el agua

4. Mecanismos o catlisis por iones metlicos .

Los metales, estan fuertemente unidos a la enzima como si

son captados de la solucin junto con el sustrato, pueden
participar de diferentes maneras en la catlisis.
Casi la tercera parte de las enzimas que conocidas requieren
de uno o mas iones metlicos para su actividad catalitica.

FACTORES QUE AFECTAN LA

ACTIVIDAD ENZIMATICA

- PH
-

TEMPERATURA

- - CONCENTRACIN DE LA ENZIMA
- - CONCENTRACIN DEL SUSTRATO

EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2;
tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos. Segn el pH
del medio, estos grupos pueden tener carga elctrica positiva, negativa o neutra.
Como la conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas elctricas,
habr un pH en el cual la conformacin ser la ms adecuada para la actividad
cataltica. Este es el llamado pH ptimo. (Para activar la animacin de la
Figura de la derecha, pulsar la opcin "Recargar" del navegador).

La mayora de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones
de pocas dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar
drsticamente su actividad. As, la pepsina gstrica tiene un pH ptimo de 2,
la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10 (Figura de la izquierda).
Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalizacin de la protena,
los seres vivos han desarrollado sistemas ms o menos complejos para mantener
estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiolgicos.

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones qumicas:

por cada 10C de incremento, la velocidad de reaccin se duplica. Las reacciones
catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser protenas,
a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor.
La temperatura a la cual la actividad cataltica es mxima se llama temperatura ptima
(Figura de la derecha). Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de
la reaccin debido a la temperatura es contrarrestado por la prdida de actividad
cataltica debida a la desnaturalizacin trmica, y la actividad enzimtica decrece
rpidamente hasta anularse.

EFECTO DE LAS CONCENTRACIONES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

La velocidad de una reaccin enzimtica

depende de la concentracin de sustrato.
La Figura de la derecha muestra la velocidad
de una reaccin enzimtica a 6 concentraciones
distintas de sustrato.Adems, la
presencia de los productos finales puede
hacer que la reaccin sea ms lenta,
o incluso invertir su sentido

Curva de progreso de una reaccin enzimtica. La pendiente representa, en el

perodo inicial, la velocidad de la reaccin. La zona de la meseta representa el
equilibrio de la reaccin (no confundir con la saturacin

CINETICA ENZIMATICA

Se basa en la teora de las colisiones que dice:

PARA QUE LAS MOLECULAS REACCIONEN ELLOS DEBEN
CHOCAR Y POSEER SUFICIENTE ENERGIA PARA VENCER
LA BARRERA ENERGETICA DE LA REACCION.

La cintica qumica es un rea de la fisicoqumica que se encarga del

estudio de la rapidez de reaccin, cmo cambia la rapidez de reaccin bajo
condiciones variables y qu eventos moleculares se efectan durante la
reaccin general (Difusin, ciencia de superficies, catlisis).
La cintica qumica es un estudio puramente emprico y experimental; la
qumica cuntica permite indagar en las mecnicas de reaccin, lo que se
conoce como dinmica qumica.

La cintica enzimtica estudia la velocidad de las

reacciones qumicas que son catalizadas por las
enzimas. El estudio de la cintica y de la
dinmica qumica de una enzima permite explicar
los detalles de su mecanismo cataltico, su papel
en el metabolismo, cmo es controlada su
actividad en la clula y cmo puede ser inhibida su
actividad por frmacos o venenos o potenciada por
otro tipo de molculas.

La cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones catalizadas

por enzimas. Estos estudios proporcionan informacin directa acerca del
mecanismo de la reaccin cataltica y de la especifidad del enzima.

Los estudios sistemticos del efecto de la

concentracin inicial del sustrato sobre la actividad
enzimtica comenzaron a realizarse a finales del siglo
XIX. Ya en 1882 se introdujo el concepto del complejo
enzima-sustrato como intermediario del proceso de
catlisis enzimtica. En 1913, Leonor Michaelis (foto
de la izquierda) y Maud Menten (foto de la derecha)
desarrollaron esta teora y propusieron una ecuacin
de velocidad que explica el comportamiento cintico de
los enzimas

Y = ax/b+x

Curva de progreso de una reaccin enzimtica. La pendiente representa, en el

perodo inicial, la velocidad de la reaccin. La zona de la meseta representa el
equilibrio de la reaccin (no confundir con la saturacin

La cintica enzimtica estudia la velocidad de las

reacciones qumicas que son catalizadas por las enzimas.
El estudio de la cintica de una enzima permite explicar los
detalles de su mecanismo cataltico, su papel en el
metabolismo, cmo es controlada su actividad en la clula
y cmo puede ser inhibida su actividad por frmacos o
venenos o potenciada por otro tipo de molculas

Para explicar la relacin observada entre la velocidad inicial (v0) y la

concentracin inicial de sustrato ([S]0) Michaelis y Menten propusieron que las
reacciones catalizadas enzimticamente ocurren en dos etapas:
En la primera etapa se forma el complejo enzima-sustrato y en la segunda, el
complejo enzima-sustrato da lugar a la formacin del producto, liberando el
enzima libre:

En este esquema, k1, k2 y k3 son las constantes cinticas

individuales de cada proceso y tambin reciben el nombre de
constantes microscpicas de velocidad. Segn esto, podemos
afirmar que:
: v1 = k1 [E] [S]
v2 = k2 [ES]
v3 = k3 [ES]

La grfica de velocidad frente a [S] mostrada anteriormente no es lineal. Aunque a

bajas concentraciones de sustrato se mantenga lineal, se va curvando a medida
que aumenta la concentracin de sustrato. Antes de la llegada de
los ordenadores, que permiten ajustar regresiones no lineales de
forma sencilla, poda llegar a ser realmente difcil estimar los valores
de la Km y la Vmax en las grficas no lineales. Esto dio lugar a que varios investigadores
concentraran sus esfuerzos en desarrollar linearizaciones de la ecuacin de
Michaelis-Menten, dando como resultado la grfica de Lineweaver-Burke y

el diagrama de Eadie-Hofstee.
Con el siguiente tutorial de la cintica de Michaelis-Menten realizado en la
Universidad de Virginia , se puede simular el comportamiento de
una enzima variando las constantes cinticas.

La grfica de Lineweaver-Burk o representacin de doble recproco es la forma

ms comn de mostrar los datos cinticos. Para ello, se toman los
valores inversos a ambos lados de la ecuacin de Michaelis-Menten. Como se
puede apreciar en la figura de la derecha, el resultado de este tipo de
representacin es una lnea recta cuya ecuacin es y = mx + c, siendo el punto
de corte entre la recta y el eje de ordenadas equivalente a 1/Vmax, y el punto de
corte entre la recta y el eje de abscisas equivalente a -1/Km.

INHIBIDORES ENZIMATICOS
Los inhibidores enzimticos son molculas que se unen a enzimas y
disminuyen su actividad. Puesto que el bloqueo de una enzima puede matar a
un organismo patgeno o corregir un desequilibrio metablico, muchos
medicamentos actan como inhibidores enzimticos
Tambin son usados como herbicidas y pesticidas. Sin embargo, no todas las
molculas que se unen a las enzimas son inhibidores; los activadores
enzimticos se unen a las enzimas e incrementan su actividad
La unin de un inhibidor puede impedir la entrada del sustrato al sitio activo de la
enzima y/u obstaculizar que la enzima catalice su reaccin correspondiente.
Modelo estructural de la proteasa del
virus del SIDA unida a un inhibidor de la
proteasa, el ritonavir. La estructura de la
proteasa se muestra mediante cintas de
color rojo, azul y amarillo, mientras que el
inhibidor es representado por una
estructura de esferas y varillas

La unin del inhibidor puede ser reversible o irreversible. Normalmente,

los inhibidores irreversibles reaccionan con la enzima de forma covalente
y modifican su estructura qumica a nivel de residuos esenciales de los
aminocidos necesarios para la actividad enzimtica.
En cambio, los inhibidores reversibles se unen a la enzima de forma no
covalente, dando lugar a diferentes tipos de inhibiciones, dependiendo de
si el inhibidor se une a la enzima, al complejo enzima-sustrato o a ambos.

Muchos medicamentos son inhibidores enzimticos, por lo que su

descubrimiento y mejora es un campo de investigacin activo en la
bioqumica y la farmacologa

EFECTO DE LOS INHIBIDORES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Ciertas molculas pueden inhibir la accin cataltica de un enzima: son los inhibidores.
Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza estructural
con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformacin espacial del enzima,
impidiendo su unin al sustrato (inhibidor no competitivo) (Figuras inferiores).

Inhibidor competitivo

Inhibidor no competitivo

INHIBIDORES IRREVERSIBLES

Los inhibidores irreversibles normalmente modifican una

covalentemente, con lo que la inhibicin no puede ser invertida.

enzima

Los inhibidores irreversibles suelen contener grupos funcionales reactivos

como mostazas nitrogenadas, aldehdos, haloalcanos o alquenos.
Estos grupos electroflicos reaccionan con las cadenas de aminocidos
para formar uniones covalentes. Los residuos modificados son aquellos
que contienen en sus cadenas laterales nuclefilos como por ejemplo un
grupo hidroxilo o un grupo sulfhidrilo.
La inhibicin irreversible es diferente de la inactivacin enzimtica
reversible. Los inhibidores irreversibles son generalmente especficos para
un tipo de enzima y no inactivan a todas las protenas. No funcionan
destruyendo la estructura protenica, sino alterando especficamente la
estructura tridimencional del sitio activo inhabilitndolo.

GRACIAS

MODULACIN ALOSTRICA DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Hay enzimas que pueden adoptar 2 conformaciones interconvertibles

llamadas R (relajada) y T (tensa). R es la forma ms activa porque se une
al sustrato con ms afinidad. Las formas R y T se encuentran en equilibrio
R <==> T (Figura inferior):

Ciertas sustancias tienden a estabilizar la forma R. Son los llamados

moduladores positivos. El propio sustrato es a menudo un modulador positivo.
Las molculas que favorecen la forma R pero que actan sobre una regin del
enzima distinta del centro activo son los activadores alostricos
(Figura inferior izquierda).

Las sustancias que favorecen la forma T y disminuyen la actividad

enzimtica son los moduladores negativos. Si estos moduladores
actan en lugares distintos del centro activo del enzima se llaman
inhibidores alostricos