Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
1.
2.
3.
4.
5.
6.
ENZIM
de la grecescul
EN ZYME- n drojdii
Enzime biocatalizatori de natur
proteic
Mresc V reaciilor chimice,
termodinamic posibile
Enzimologietiina,
ce se ocup
cu studierea E
Enzimodiagnostica
- este determinarea
Enzimoterapia
- este utilizarea E,
activittii E,
care se pot modifica n
diverse patologii cu
scop diagnostic.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
1.
2.
3.
4.
1.
2.
3.
Sectorul catalitic
1.
2.
3.
4.
5.
Centrul alosteric
Este centrul reglator
Fixeaz modulatorul alosteric
Adiionarea modulatorului modific
conformaia enzimei i secundar
activitatea ei
Modulatorul pozitiv activator
Modulatorul negativ - inhibitor
A:
B:
Coenzima
1.
2.
3.
enzimei
3. Contribuie la fixarea substratului
4. Particip nemijlocit la actul catalitic
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
CoE vitaminice
Tiaminice
Flavinice
Nicotinamidice
Piridoxinice
Folice
Cobamidice
Biotinice
lipoice
CoE nevitaminice
1. hemurile de divers natur
2. Nucleotidele
3. Fosfaii monozaharidelor
Derivaii vitaminei
B1
Rolul:
1.
Decarboxilarea
oxidativ a
piruvatului
2.
Decarboxilarea
oxidativ a
cetoglutaratului
3.
Reacii de
transcetolare
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Derivai ai vitaminei B2
FMN i FAD
Rolul:
Particip n reaciile de oxido-reducere:
Dezaminarea AA
Degradarea aldehidelor (aldehidDH)
Degradarea purinelor (xantinoxidaza)
Ciclul Krebs (succinatDH)
Oxidarea AG
DOP (dihidrolipoilDH)
Vitamina B2:
riboflavina
Vitamina PP:
nicotinamida
1.
2.
3.
Derivai a vitaminei
B6
Co piridoxalfosfat
i piridoxaminfosfat
Rolul:
Transaminarea AA
Decarboxilarea AA
Transsulfurarea
Vitamina
B6 :
Piridoxina
Piridoxal
Piridoxamina
Coenzimele:
Piridoxal fosfat
Piridoxamin fosfatul
biosinteza AG
2.
biosinteza Col
3.
sinteza corpilor cetonici
4.
Oxidarea AG
5.
Ciclul Krebs
6.
Sinteza aminolevulinatului
7.
DOP
8.
DO a alfa cetoglutaratului
Transferul grupelor acil
1.
1.
2.
Bc-acidul
folic
Forma activ- acidul tetrahidrofolic
Rol: transferul gruprilor cu un C: metil
(CH3), metilen(-CH2), formil (COH),
formimino (CH=NH)
Pentru
S + E E-S E + P
Energie
Progresul reactiei
Enzimele reduc energia de activare fara sa afecteze energia libera a
reactiei (G). Astfel, enzimele cresc viteza de reactie.
Enzymes
Lower a
Reactions
Activation
Energy
Prima etap:
Difuzia S spre E i legarea cu CA al E formarea complexului ES
1.
de scurt durat
2.
depinde de concentraia substratului i de
viteza lui de difuzie spre centrul activ al
enzimei.
Concept ul
coencidenei inductive
coincidena forat
(Kochland)
1.
2.
3.
4.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Clasificarea enzimelor.
- catalizeaz reaciii de oxidoreducere;
-catalizeaz transferuri
grupelor funcionale de la un S
la altul (metil, amino, acil,);
-catalizeaz scindri de
legturi covalente cu
adiionarea apei ;
-catalizeaz ruperea leg. C-C,
C-S i C-N; fr adiionarea
apei, adiia la legturi duble
i reaciile inverse.
1. Oxidoreductaze
catalizeaz reaciii de oxido-reducere
- oxidaze
peroxidaze
dehidrogenaze
1.
- esteraze
- peptidaze
glicozidaze
4. Liaze
5. Izomeraze
5. Izomeraze
S1
S4
S2
1.Specificitatea
de reacie:
enzimele catalizeaz un anumit tip de
reacie ce st la baza clasificrii lor: o
reacie redox, un transfer a unei grupe
funcionale, formarea unei legturi, etc.
specificitate
relativa de substrat
- asigura transformarea unui grup de
substante inrudite chimic i se
intlnete n diferite ipostaze:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
Cinetica enzimatic. Influena concentraiei enzimei i a substratului, a pHului i a temperaturii asupra activitii enzimatice.
Principiul determinrii activitii enzimelor. Unitile de activitate a
enzimelor.
Inhibiia activitii enzimelor (specific i nespecific, reversibil i
ireversibil, competitiv, necompetitiv i noncompetitiv).
Reglarea activitii enzimelor (proteoliz parial, reglarea alosteric,
autostructurarea cuaternar, reglarea covalent).
Organizarea enzimelor n celul (ansamblurile enzimatice,
compartimentalizarea). Reglarea activitii enzimelor n celul. Importana
principiului de retroinhibiie.
Izoenzimele particularitile structurale i func ionale, valoarea lor
biomedical.
Deosebirile n componena enzimatic a organelor i esuturilor. Enzimele
organospecifice. Modificarea activitii enzimatice n diferite afeciuni
(enzimodiagnosticul).
Metodele de obinere i purificare a enzimelor. Cromatografia de afinitate.
Utilizarea enzimelor n practica medical. ntrebuinarea enzimelor
imobilizate n medicin.
Temperatura
pH
Concentraia
S
Concentraia E
electroliii
sunt termolabile
t optim a E din organism
- 35 - 40 C
odat cu creterea t cu
10C (dac lum punctul
de plecare 0 ) - V
reaciei enzimatice
sporete de 1,5 ori,
atingnd max la t 40C.
Majorarea de mai
departe duce la
micorarea activitii
enzimatice denaturarea proteinei.
Unele
Ea
microorganismelor
termofile sunt active la t
de 80C
La t joase E se
inactiveaz (excepii:
catalaza: activitate max la
t=0 C)
reaciei odat cu
t este nterpretat prin
prisma "energiei de
activare".
Pentru fiecare E se
poate stabili o t
optim la care V atinge
valoarea max, mai
departe V scade din
cauza denaturrii.
Fiecare E are pH
optim propriu
(manifest activitate
max).
Majoritatea E celulare
au pH-ul optim- 6-8
(7,4)
excepii: hidrolazele
acide lizozomale pH=
5;
MAO din membrana
MC externa pH= 10.
1.
2.
3.
La E digestive pH
optim este cel al
sediului lor de
aciune:
Pepsina pH 1,5
2,
Amilaza
pancreatic - pH
7,2,
Tripsina - pH 7,88,0
1.
2.
3.
pH optim e dependent
de:
gradul de ionizare a
grupelor funcionale,
afinitii E fa de S,
stabilitii E.
In CA al E se afl grupri
ionizabile, acide sau bazice.
Acestea interacioneaz
direct cu ionii H+ si OH-,
rezultatul fiind creterea
sau scderea gradului lor
de disociere, acionnd ca
adevrai inhibitori ai E
(amilaza n sucul gastric).
Ionii H+ si OH- au un efect
denaturant asupra E - rup
legturile, ce determin
structura teriar.
Analiza curbei
hiperbolice arat c ea
reprezint 3 zone:
a. V de reacie crete
proporional cu c% S
b. Creterea este mai
ncet
c. V de reacie nu mai
crete
Aceast curb este numit curba lui MichaelisMenten i se exprim prin ecuaia:
[S]
V=Vmax x
_________
Km +[S]
1
Km
1
V0 Vmax[S] Vmax
-este
unele
CA
EE
s
AlloM
Deosebim:
1. inhibiie
Deosebim:
1. Inhibiie
competitiv
2. Inhibiie necompetitiv
3. Inhibiie prin exces de S
4. Inhibiie alosteric
Inhibiia
competitiv
diminueaz v
catalizei:
nu modific V max,
dar crete mult
Km, micornd
afinitatea E pentru
S.
Exemplu:
inhibiia
Inhibitorul
nu se aseamn ca structur cu S
I i S se leag simultan cu E dar locusurile
sint diferite (I nu se leag n CA)
E+S+I--------- ESI
Acest tip de inhibiie nu se nltur prin exces
de substrat.
I necompetitivi scad V max dar nu afecteaz
Km
Ex:
cianurile, CO se fixeaz cu Fe 3+
din citocromoxidaz ---se ntrerupe
LR
I poate fi nlturat de substane care l
leag numite reactivatori
Cei
Inhibiia
uncompetetiv
se leag la
complexul ES,
E+S----ES +I----ESI
Micoreaz i Km
i Vmax
inhibiia
Inhibiie
E
S CA
CA E
M
Allos
1.
2.
3.
1.
2.
3.
4.
5.
1.
2.
Norma- 100-190U/L
Creterea de LDH 1 i LDH2:
infarctul miocardic
anemia hemolitic/ megaloblastic
LDH5 crescut - afeciuni hepatice,
necroza hepatic
1. Creatinfosfokinaza
-2 tipuri de monomeri:
M-Muscle i B brain
2. LDH
3. MDH
4. Aldolaza
5. Fosfataza alcalin
6. Fosfataza acid
CPK M2
Muchi
scheltic
Miodistrofii
CPK MB
Muchi
cardiac
Miocardiop
atii
Creier
Ischemii
cerebrale
CPK B2
E1
E2
E3
E4
A---------------- B------------- C---------- D---------- P
Ex.-
complexul polienzimatic
piruvatdehidrogenazic, constituit din 3 E
i 5 Co
sintetaza acizilor grai constituit din 7
E legate structural de PPA, care n
ansamblu ndeplinesc funcia de sinteza a
AG.
E se pot aranja n lan, fixndu-se de MB.
Ex.enzimele LR, care particip la
transferul de H+ i e.
reprezint
1 cat = 6 107 UI
1 UI = 16.67 10-9 cat
Activitatea
specific reprezint
numrul de uniti enzimatice per mg
de protein-enzim
AS= Nr UI/mg protein
Este expresia puritii unei enzime
1. Dializ
2. Salifiere
3. Cromatografie
4. Gel-filtrare
5. Electroforez
Efectele
exercitate de preparatele enzimatice