Reactia de fixare a

complementului
Reactia de
seroneutralizare

Reactia de fixare a complementului

Este o reactie complexa, constituita din 2

sisteme Ag-Ac si cu participarea C.
In RFC participa Ig capabile sa fixeye CIgM si IgG(se utilizeaza in diagn
virozelor,infectiilor bacteriene etc.)
Toate componentele RFC sunt utilizate in
acelasi volum fiind titrate in prealabil
pentru aprecierea dozelor de lucru.
Rectia este nsoit de martori ai tuturor
componenilor.

RFC II

RFC se efectueaz n 2 etape utiliznd 2

sisteme
I etap-Sistemul de baz este constituit din
Ag 1(diagnosticuri sau Ag necunoscute),Ac
1(serul bolnavului) i complement in doza
de lucru.
Amestecul este incubat la 1h i 37C sau
mentinut 16-18 ore la 4C.
Dac Ac se combin cu Ag omolog va avea
loc i fixarea C(efect frecvent invizibil).

RFC III

II etap-la sistemul de baz se adaug

sistemul indicator(hemolitic), constituit di
hematii de berbec(Ag2) combinate cu Ac
specifici- serul hemolitic(Ag2).Peste 1h
incubare la 37C reactia este terminat.
Interpretarea rezultatelor- dac C a fost
foxat de primul sistem Ag-Ac hemoliza nu
se observ(rezultat pozitiv).Dac Ag1 nu
corespunde cu Ac1, C rmne disponibil
pentru fixarea pe sistemul indicator Ag2Ac2,provocnd hemoliza(rezultat negativ).

RFC IV

Rectia de seroneutralizare(RSN)

Este reacia serologic de inhibare

specific a unor caracteristici
biologice ale Ag microbian
Acest lucru nseamn combinarea Ag
specific, biologic activ,cu Ac
corespunztor conducnd la blocarea
proprietailor biologice ale acestuia.
Pentru a putea vizualiza reacia
trebuie sa adugm un sistem
indicator(hematii de oaie)

RSN II

RSN se realizeaz n 2 etape:

I etap- se pun n contact Ag i serul
imun neutralizant(contine Ac anihilanti)
Dup o perioad de incubare(formarea
reaciei Ag-Ac) amestecul este testat
pentru efectul su biologic.
II etap-dac reactia Ag-Ac s-a realizat
efctul biologic dispare( proprietatea
biologic a Ag a fost neztralizat) dac
nu efectul biologic activ se produce pe
sistemul indicator.

RSN III

Aplicatii:
1.Diagn microbiologic: identif. Serologic a
Cl. perfringens,identif exoroxinei
difterice,exotxinei botulinice.
2.Serodiagnostic:dozarea ac
ASLO,serodiagnosticul unor viroze
Reactia ASLO:reactia de seroneutralizare
utilizat n diagnosticul microbiologic
indirect:ASLO se practica n: diagn
serologic al infeciilor streptococice i poststreptococice i a complicaiilor

RSN IV

ASLO(-) nu infirm diagnosticul de

infecie streptococic
Principiu:dozarea Ac antistreptolizin
O se bazeaz pe efectul neutralizant
al acestora asupra
streptolizineiO(SLO) prin existena n
ser a antistreptolizinei O este
observat prin absena hemolizei
unor eritrocite test(sistemul
indicator)

RSN V
Materiale necesare:
Ser de cercetat,SLO liofilizat.snge
defibrinat de iepure,soluie salin,sol
de Rivanol, etc.
Tehnica de lucru.
I-serul bolnavului se inactiveaz 30
min la 56C i se trateaz cu Rivanol
pentru ndeprtarea inhibitorilor
-se efectueaz dilutia 1/10 a seului si
se menine 30 min la 56C

RSN VI

Se realizeaz diluii succesive

binare,de ser i se pun n contact cu
SLO(cantitate constanata)
Se agit tuburile i se menin 15 min
la 37C(R. de neutralizare)
II- se adaug suspensia de hematii
cantitate fix,0,5 ml n fiecare tub
-se incubeaz 45 min la 37C plus
peste noapte la 4C
Citire a doua zi

RSN VII

Titrul este dat de tubul cu diluia cea

mai mare de ser de testat n care
lipsete hemolizaceea ce exprim
prezena unei cantiti suficiente de
Ac ASLO,capabili sa neutralizeze
ntreaga cantitate de SLO din
amestec
Titrul normal ASLO este ntre 0200UI/ML

RSN VIII