MICROBIOLOGIA CLINIC

Disciplin a microbiologiei aplicate

Ofer semne paraclinice importante pentru diagnosticul

etiologic al bolilor infecioase

intete terapia antimicrobian cnd este posibil i

necesar

Monitorizeaz eficient terapia antimicrobian

Instrument de lucru al clinicianului
Pacientul ntreab:
M vindec? Nu mor? Nu rmn nenorocit?
Membrii familiei sunt la adpost de aceast boal?
Ct m cost?

Organele decizionale ntreab: ct ne cost? (CAS)

Direct: diagnostic, terapie, spitalizare, combatere, profilaxie
Indirect : zilele de munc pierdute

Microbiologul face observaii i msurtori expuse

variailor i erorilor:
- Biologice - Analitice

- Preanalitice - Postanalitice
 Controlul erorilor n microbiologia
clinic
controlm fluxul informaional clinic-laborator;
alegem teste performante;
standardizm i controlm calitatea activitii;
utilizm criterii obiective pentru interpretarea
rezultatelor;
supervizm activitatea i pregtirea continu a
personalului;
asigurm comunicarea clar a rezultatelor;
atragem clinicianul n programul controlului de
calitate al investigaiei microbiologice.
 Performana testelor de laborator

Rezultatele Prezena bolii Totaluri

testului
Prezent Absent

Pozitiv (anormal) Real pozitiv (RP) Fals pozitiv (FP) RP + FP

Negativ (normal) Fals negativ (FN) Real negativ (RN) FN + RN
Totaluri RP + FN FP + RN RP + FP + RN + RN
(total cu boal) (total fr boal) =N
(total observaii)

Sn = RP/ RP + FN PP = RP/ RP + FP
Sp = RN/ FP + RN PN = RN/ FN + RN

Ef = RP + RN/ N
Pr = RP + FN/ N
 Examinri repetate i asocieri de teste

Regula crede pozitivul

suficient un singur rezultat pozitiv din serie ori
din asociere
crete sensibilitatea investigaiei
scade specificitatea

Regula crede negativul

necesar pozitivitatea tuturor testelor din serie
sau din asociere
scade sensibilitatea
crete specificitatea
 Standardizarea i controlul de calitate n
microbiologia clinic

Controlul variaiilor preanalitice

norme pentru alegerea, recoltarea i transportul
probelor
standarde de calitate a probelor acceptate pentru
examinare
atitudinea fa de probele neadecvate

Controlul variaiilor analitice

controlul de calitate al reactivilor
controlul performanelor aparaturii de laborator

Controlul variaiilor post-analitice

sistem de nregistrare i comunicare a rezultatelor care
reduce la minimum numrul transcrierilor i permite
controlul lor n orice moment
HEMOCULTURA
N
DIAGNOSTICUL
INFECIEI
 Recoltarea sngelui pentru
hemocultur
Recoltarea sngelui de pe dispozitive
intravasculare: problem
controversat
nu exist diferene semnificative: durata
scurt a meninerii cateterului i tehnici
stricte de asepsie.
discordane:
BGP: contaminare/colonizare
BGN: bacteriemie
puncia venoas periferic
Interpretarea clinicianului
nlocuirea/nu a acului dup
flebotomie
Numrul de hemoculturi i momentul
prelevrii
stilul clinicianului; nu exist un gold standard
Reguli pentru prelevarea hemoculturilor
Maxim 3 HC n 24 ore din locuri de puncie
diferite
n bolile febrile acute: 2 HC
n sindromul febrei de origine necunoscut:
2 HC la 45-60 min negative

2 HC n decurs de 24-48 ore
EI acut: 3 HC n 3 ore
EI subacut: 3 HC n prima zi negative

2 HC n zilele urmtoare
Repetarea HC n urmtoarele
circumstane:
Episod septic nou
?! EI cnd HC iniiale au fost recoltate
sub ABT
Confirmarea rspunsului la terapie n
EI sau alte infecii endovasculare
Dup HC pozitive n anumite condiii
care ar putea s aib implicaii
diagnostice i prognostice
Bacteriemie de cateter cu S aureus
Bacteriemie cu BGN
Confirmarea diagnosticului bacteriemiei
de cateter
Repetarea HC poate s nu fie de
folos n urmtoarele
circumstane:
Febr persistent fr noi modificri
Nou episod febril care poate fi atribuit
unei cauze non-infecioase
Leucocitoz fr alte semne clinice
sugestive de sepsis.
Colonizare sau focar infecios fr
simptomatologie sistemic
Aceste propuneri necesit validri
ulterioare i nu pot fi aplicate la
imunodeprimai
Volumul de snge ce urmeaz a fi
nsmnat

10-30 ml la aduli
1-2 ml de snge per set la nou-nscui, 2-
3 ml la sugari i 3-5 ml la copii.
raia optim a diluiei - 1:10
 Durata incubrii
Sistemele automate: 5 versus 7 zile
subcultivarea de rutin a HC negative
dup 5-7 zile de incubare
fungi, Pseudomonas aeruginosa i
grupul HACEK : peste 7 zile
Legionella sau Brucella
MO de rutin a HC negative macroscopic
dup 24-48 ore de incubare
Gram
acridine orange
 Medii de cultur
Sistemele de hemocultur automate i
semiautomate
BacT/Alert este superior BACTEC n
izolarea microorganismelor, n special a
stafilococilor i levurilor
BACTEC este superior bulionului cu
supliment de pepton i sistemului VITAL
Aceste sisteme pot ntmpina dificulti
n depistarea creterii bacililor gram-
negativi nefermentativi (P aeruginosa, A
baumannii)
Sistemul Oxoid Signal:
numr crescut de rezultate fals pozitive
dificulti n semnalizarea creterii
bacteriilor anaerobe, a majoritii levurilor,
a H influenzae, bacililor gram-negativi
nonfermentativi, Neisseria meningitidis,
Nocardia spp., i Corynebacterium jeikeium
Mediile difazice
avantajoase pentru izolarea micobacteriilor
i brucelelor
timpul de depistare al microorgansimelor
poate fi comparabil cu al sistemelor
automate
Criterii de stabilire a semnificaiei
clinice a izolatelor din
hemoculturi
1. Identitatea izolatului
Staphylococcus aureus S pyogenes
Streptococcus S agalactiae
pneumoniae Listeria monocytogenes
E coli Neisseria meningitidis,
ali membrii ai familiei N gonorrhoeae
Enterobacteriaceae Haemophilus
influenzae,
Pseudomonas
aeruginosa membrii grupului
Bacteroides fragilis,
Candida albicans
Candida spp altele
dect C albicans
Cryptococcus
neoformans.
2. Numrul de seturi de hemoculturi
pozitive
3. Numrul de flacoane pozitive
dintr-un set
4. Timpul de pozitivare al
hemoculturilor
5. Izolarea aceluiai microorganism
i din alt situs
6. Caracteristici clinice: febr,
leucocitoz cu devierea la stnga a
formulei leucocitare i imagistice
Rolul CRP i PCT n examenul
microbiologic al sngelui

pot fi influenai de etiologii noninfecioase

msurarea zilnic: mai sensibil n predicia
sepsisului fa de febr i leucocitoz
au cinetici diferite
nivelul seric al PCT crete mai rapid fa cel al
CRP anticiparea sepsisului cu 24-48 ore
naintea CRP
n 2005 Aikawa N et al: la pacienii diagnosticai cu
bacteriemie pe baza semnelor clinice, rata pozitiv
a diagnosticului pe baza PCT a fost de 70,2%, n
timp ce pe baza hemoculturilor a fost de 42,6%