Ciclul Krebs

Ciclul Krebs/ ciclul acizilor tricarboxilici/TCA/

Faza aerobica a oxidarii glucozei
In conditii de aerobioza, urmatoarea etapa in generarea energiei din glucoza o
reprezinta carboxilarea oxidativa a piruvatului cu formare de acetil- CoA.

AcetilCoA activat este oxidat complet la CO2 in TCA

Majoritatea moleculelor de combustibil intra in TCA ca acetilCoA

Ciclul ofera substraturi intermediare pentru biosinteza

Reactiile ciclului Krebs se desfasoara in mitocondrii, in contrast cu glicoliza, care

are loc in citosol.

Enzimele responsabile pentru reactiile ciclului citric sunt preznte in mitocondriile

celulelor, mai ales in matrice, in proximitatea enzimelor lantului respirator. Din
acest motiv, celulele fara mitocondrii precum hematiile sunt lipsite de ciclul citric.
Respiratia aeroba/anaeroba
 CICLUL ACIZILOR TRICARBOXILICI

Ciclul ATC/ Krebs/al acidului citric

Ciclul Krebs formeaz un ansamblu de 8 reacii care se
desfoar n matricea mitocondrial, n celulele
aerobe;

Punct de convergen pentru catabolismul tuturor

substanelor nutritive: G, AG, AA

Ciclul citric joac un rol foarte important n

metabolismul intermediar i n producerea de energie
 CICLUL ACIZILOR TRICARBOXILICI

Reaciile anaplerotice= de catabolizare a AA cu

producerea de intermediari ai ATC

Pe parcursul ciclului citric acetil-CoA este

oxidat la CO2 i energia este eliberat

ATC este apropiat de reaciile lanului

transportor de electroni
CICLUL ACIZILOR TRICARBOXILICI
CICLUL ACIZILOR TRICARBOXILICI

ATC servete la sinteza

Glucidelor
Lipidelor
Proteinelor
Hemului

Important n:
Catabolism,
Producerea de energie
Anabolism

Ciclu amfibolic
 Surse de acetil-CoA

Toate caile metabolice ale

substratelor nutritive determina
formarea de acetil-CoA:
glucoza, AG liberi, proteine.

Acetil-CoA este principalul

substrat care este oxidat la
CO2.

Moleculele energetice ca GTP

si recuperarea substratelor
reductive NADH+H, FADH2
sunt scopul acestui ciclu
metabolic.
 Surse de acetil-CoA
Metabolismul CH
Glicoliza
Glicogenoliza
Procesul oxidativ al lactatului
Are ca rezultat formarea
piruvatului in the citoplasma, care
se transforma in acetil-CoA in
mitocondrii, in prezenta piruvat
dehidrogenazei, a TPP, a acidului
lipoic, HSCoA, FAD si NAD+
 Surse de acetil-CoA
Metabolismul lipidic

Prin beta-oxidarea acizilor grasi, va rezulta acetil-CoA

 Surse de acetil-CoA
Catabolismul proteic

Proteinele(aminoacizii)
furnizeaza

Acetil-CoA prin

Intermediul

piruvatului
 Surse de acetil-CoA
Catabolismul alcoolului

Etanolul este convertit prin 2

reactii succesive
de dehidrogenaze la acetat.
Acetatul este transportat in
muschiul scheletic si activated
la acetil- CoA.
Doua molecule de NADH
se formeaza dintr-o molecula
de etanol.
NADH produce un dezechilibru in ecuatia ce stabileste proportia dintre
Lactat si piruvat (prin legea actiunii maselor si raportul lactat/piruvat).
Prea mult NADH: lactatul nu poate fi convertit la piruvat;
Va avea loc reactia inversa.

Astfel, dc se metabolizeaza etanolul la acetaldehida,

apare un exces de NADH care controleaza conversia
Piruvatului la lactat
(si previne conversia piruvatului la glucoza).
 Surse de acetil-CoA
Catabolismul corpilor cetonici
Corpii cetonici
Corpii cetonici
Corpii cetonici
Corpii cetonici
 Rolul ciclului Krebs

1. conectat cu lantul respirator mitocondrial , deoarece

coenzimele reduse ale TCA sunt principalele substraturi ale
lantului respiratorchain. Aici au loc etapele oxidative
generatoare de ATP.

2. importanta platforma metabolica, datorita pozitiei

centrale in cadrul metabolismului.

3. considerat un proces amfibolic

4. inafara rolului energetic, rol anabolic important in:
sinteza hemului, gluconeogeneza si sinteza AAneessentiali.
 OAA intra in cK

Desi OAA este regenerat in fiecare ciclu, tb

sa fie suplimentat permanent pt mentinerea
generarii de produsi intermediari.
Transaminarea acidului aspartic (ASAT)
cu formarea acidului glutamic acid si a
oxaloacetatului.

Carboxilarea piruvatului, in prezenta

piruvat-carboxilazei:
Activa intre mese, in timpul GNG
Functioneaza in prezenta BIOTINEI
(vitamina H)
Necesita ATP
NU FUNCTIONEAZA in absenta
acetil-CoA (fapt ce indica nevoia de
acetilCoA)
 Rolul metabolic al piruvatului
Convertit la acetilCoA de
piruvat-dehidrogenaza
Convertit la oxaloacetat de
piruvat-carboxilaza
Transformat in lactat de
LDH (lactat-
dehidrogenaza)
Transformat in alanina de
ALAT (alanin-
aminotransferaza)
In celulele aerobe, piruvatul
este convertit la acetil-CoA si
ATP.
In celulele anaerobe, piruvatul
este folosit pentru sinteza
lactatului.
Folosirea piruvatului depinde
de necesarul energetic tisular:
Intre mese, piruvatul este
directionat spre GNG
Dupa masa, piruvatul
rezultat prin glicoliza este
folosit in sinteza AG
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI
1. acetilCoA+ OAA = CITRAT
2. IZOCITRAT (aconitaza, Fe2+)
3. Alfa-KETOGLUTARAT
(izocitrat-dehidrogenaza, NAD+, Mg2+, Mn2+). Resulta
NADH+H+
4. SUCCINILCoA SCoA dehidrogenaza; necesita coenzime,
genereaza NADH+H
5. SUCCINAT S-tiokinaza; produce GTP. GTP este convertit la
ATP.
6. FUMARAT S-dehidrogenaza; rezulta FADH2
7. MALAT fumaraza; functiile malatului de naveta pentru
oxaloacetat in citoplasma. Poate fi convertit la piruvat, oxaloacetat
si fumarat.
8. OXALOACETAT malat-dehidrogenaza, care genereaza
NADH+H.
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI

OAA (oxaloacetatul) este condensat iniial cu o grupare acetil provenit

de la CoA (acetil- coenzima A), iar la final este regenerat; localizare n
matricea mitocondrial

I. Decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic n organism cuprinde mai

multe etape:

Acidul piruvic este transportat n mitocondrie

Complexul multienzimatic - PIRUVAT DEHIDROGENAZ (PDH)
conine 3 enzime, 5 coenzime i o proteinkinaz
Complexul PDH nu face parte din ATC, dar este o surs de acetil-
CoA= substratul bicarbonic (2C) al acestui ciclu
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI

Coenzimele complexului PDH sunt 5:

PDH devine inactiv
E1 - tiamin-fofat n absena lor
E2 - acid lipoic ;CoA
E3 - FAD ; NAD +
Deficitul coenzimelor produce tulburri grave la nivelul SNC
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI

E1 este inhibat de: kinaza PDH activat alosteric de

ATP,acetilCoA, NADH/ kinaza PDH inhibat puternic de
Py alosteric
E1 este activat de: fosfataza PDH pt care Ca 2+ este un
activator puternic eliberat n contracia muscular
REACIILE CICLULUI ACIZILOR TRICARBOXILICI

Deficitul de PDH
Frecvent, deficit de E1 = acidoz lactic congenital, X-
linkat
Py nu mai trece n acetil-CoA, formndu-se lactat n
prezena LDH
Afectare cerebral important, spasticitate muscular,
deces prematur
nu exist tratament

Intoxicaia cu arsenic inhib enzimele dependente de

acidul lipoic: piruvat- dehidrogenaza, -cetoglutarat-
dehidrogenaza i - cetoacid- dehidrogenaza
BALANTA ENERGETICA A CICLULUI ACIZILOR
TRICARBOXILICI
 BALANTA ENERGETICA A CICLULUI ACIZILOR
TRICARBOXILICI

Dintr-o molecula de acetilCoA (cK):

1. in 3 : NADH+H; lantul respirator
mitocondrial 3 ATP
2. in 4: NADH+H; lantul respirator
3 ATP
3. in 5: fosforilarea la nivel de
substrat 1 ATP
4. in 6: FADH2; lantul respirator 2
ATP
5. in 8: NADH+H; lantul respirator
3ATP

Totalul balantei energetice: 12 ATP.

BALANTA ENERGETICA A CICLULUI ACIZILOR
TRICARBOXILICI

Fiecare mol de NADH.H+ oxidat in lantul

respirator produce 3 moli de ATP

Fiecare mol de FADH2 oxidat in lantul

respirator produce 2 moli de ATP

Fiecare mol ATP = 10 kcal.

 BALANTA ENERGETICA A CICLULUI ACIZILOR
TRICARBOXILICI

Dintr-un mol de acid piruvic:

3 moli ATP sunt produsi prin decarboxilarea piruvatului la

acetat.
Acetatul activat produce 12 ATP.

Total= 15 ATP

Dintr-un mol de Glucoza (180,15 g):

8 ATP prin glicoliza

2 moli acid piruvic sunt oxidati rezultand 2 x 15 ATP = 30 ATP

Total = 8 + 30= 38 ATP; each ATP gives=10 000 calories = 10

kcal.
Total = 38 x 10 kcal = 380 kcal
Reglarea ciclului citric
 Reglarea ciclului citric

1. overall control via the respiratory chain

and oxidative phosphorylation which
ensures oxydation of reduced coenzymes
(NADH+H, FADH2).

2. Regulation of citrate synthetase enzyme

(inhibited by ATP, FFA, succinyl CoA).

3. Regulation of isocitrate
dehydrogenase: stimulated by ADP,
inhibited by ATP and NADH+H.

4. Regulation of ketoglutarate
dehydrogenase: inhibited by
succinylCoA, ATP, NADH+H
Reglarea ciclului citric

RATA ciclului Krebs este ajustata in

functie de nevoile organismului in ATP.

Nivelul crescut de ATP level va inhiba

ciclul specific la nivelul enzimelor:
citrat sintetaza,
isocitrat dehidrogenaza si
cetoglutarat dehidrogenaza.

Invers, scaderea nivelului de ATP (sau

ADP-ul crescut) este un stimul
important al ciclului Krebs.
 Importanta biologica a ciclului Krebs

1. Ciclul Krebs este produsul final al oxidarii tuturor pricipiilor

alimentare
2. Ciclul Krebs este sursa majora de energie celulara, exceptand
celulele fara mitochondrii
3. Ciclul Krebs asigura conexiunea dintre metabolismele CH
grasimilor proteinelor

4. Ciclul Krebs este sursa majora de succinil CoA folosita pt:

Sinteza hemoglobinei

Activarea corpilor cetonici

Detoxifiere prin conjugare (ex: sulfonamide)

 Importanta biologica a ciclului Krebs

Ciclul Krebs este inhibitat de:

Inanitie (lipsa carbohidratilor)

Diabetul zaharat (lipsa insulinei)
Conditii anaerobiotice (lipsa mitocondrii, lipsa
oxigen)
 Transaminarea si relatia cu CK

Transaminarea este reactia dintre un aminoacid si un alfaa cetoacid in care NH2

este transferat cu producerea unui nou alfa cetoacid si a unui nou aminoacid.

The enzimele se numesc transaminaze.

Transaminazele fac legatura dintre metabolismul carbohidratilor si proteic prin

intermediul ciclului Krebs.
 Transaminazele de interes clinic

Aspartat transaminaza (AST, ASAT, GOT)

Catalizeaza transferul NH2 al acidului aspartic la acidul

-cetoglutaric, formand acid glutamic si oxaloacetic.

Alanin transaminaza (ALT, ALAT, GPT)
Catalzeaza transferul de NH2 al alaninei la acidul -

cetoglutaric, formand acid glutamic si pyruvic.

Coenzimele pentru transaminaze: piridoxal fosfat

(forma activa a vitaminei B6).

Tesuturile bogate in transaminaze: muschiul cardiac,

ficatul, muschiul scheletal.

 Caracterul amfibolic al ciclului citric

Gluconeogeneza:
dual, atat catabolic cat si anabolic:
-cetoglutarat (din acid
Catabolic finalizat prin
glutamic), succinil CoA
producere de energie
(din Izoleucina si
Anabolic pt acele cai cu valina), acid fumaric
originea in cK, oferind (din tirozina si
substraturi proceselor anabolice: fenilalanina) sunt
Aminoacizii: convertiti prin cK la
Acid aspartic acid din OAA (obtainut si din
OAA acid aspartic). OAA este
Acid glutamic din - conectat la GNG prin
ketoglutarat PEP.
Alanina din piruvat
Sinteza AG
Acetil-CoA format din
piruvat este folosit in
sinteza de AG.
 Esentialul despre cK
1. ciclul Krebs are loc numai in celulele cu mitocondrii si are nevoie de
enzimele lantului respirator.

2. CH sursa de piruvat, principalul furnizor de OAA, esential in initierea

ciclului Krebs.

3. Insulina care stimuleaza glicoliza, furnizor de acid piruvic; insulina

stimuleaza enzimele cKs si este necesara in mitocondrii.

4. Oxigen esential in lantul respirator intact si activ;

5. Ciclul Krebs este inactivat in inanitie (fara CH), diabet zaharat (deficienta
de insulina), anaerobioza (fara oxigen).

6. Efect Pasteur = fenomenon prin care ciclul Krebs este inhibat de prezenta in
exces a oxigenului. Mai putine molecule de glucoza sunt oxidate in aerobioza
decat in anaerobioza. Astfel, in prezenta oxigenului nu este nevoie de oxidarea
mai multor molecule de glucoza, iar rata glicolizei este mai mica decat in
tesuturile anaerobiotice.
 Steps of Krebs cycle:
http://www.youtube.com/watch?

v=jsMNyGbKxqk
Regulation of Krebs cycle:
http://www.youtube.com/watch?
v=e6dpcBpUNTY
Krebs cycle with music and in rhymes:

http://www.youtube.com/watch?v

=JPCs5pn7UNI
CALEA PENTOZO-FOSFAT
 Definitia suntului pentozo-fosfat
Calea pentozo-fosfat (calea fosfogluconatului sau suntul hexozo monofosfat)
este o cale biochimica paralela glicolizei care genereaza NADPH si pentoze
(zaharide cu 5 C ).
Cale complementar citoplasmatic i parial reversibil de oxidare a glucozei
2 reacii oxidative ireversibile i o serie de interconversii glucid-fosfat
reversibile
Fr rol energetic, cu importan funcional deosebit ( n ficat, 30% din G este
catabolizat astfel)

Localizare: citoplasma multor tesuturi:

ficat,
Glanda mamara in lactatie,
tesutuladipos,
hematiile,
Cortexul adrenal.
Calea pentozo-fosfat si a NADPH-ului
 Calea pentozo-fosfat si a NADPH-ului

Permite inter-conversiunea ozelor: hexoze-pentoze sau

pentoze, tetroze, trioze n hexoze cu degradarea ulterioar pe
calea glicolizei

Surs de NADPH (nicotinamid-adenin-dinucleotid fosfat)

necesar biosintezelor reductive de acizi grai, colesterol i de
ribozo-5-fosfat necesar n biosinteza ARN, ribonucleotidelor

Localizare intracelulara si tisulara. Reactiile caii

pentozofosfatilor se desfasoara in citoplasma deoarece aici
se desfasoara procesele la care participa NADPH,H+.
 Calea pentozo-fosfat si a NADPH-ului

Se desfasoara in doua etape majore:

conversia hexozelor la pentoze;

conversia pentozelor la hexoze.

NADPH este necesar hidroxilarii compusilor straini

organismului prin sistemul oxidazelor cu functie mixta,
refacerii glutationului redus (GSH); hidroxilarii
compusilor straini organismului prin sistemul
oxidazelor cu functie mixta, refacerii glutationului
redus (GSH);
 Calea pentozo-fosfat si a NADPH-ului

1. Conversia Glu la G-6-P in

prezenta G-6-P
dehidrogenazei cu formarea
de 6-P-gluconat. Aceasta
reactie este inhibata de
sulfonamide si medicamente
antimalarice.

http://
www.youtube.com/watch?v
=g1Oj5hRkwCU
http://www.youtube.com/wat
ch?v=EP_E-7jPnNs
 Calea pentozo-fosfat si a NADPH-ului

Reaciile oxidative ireversibile

reacii cu formare de ribulozo-5-P, CO2, 2 NADPH pt 1
molecula de G-6-P oxidata

Importanta in:
Fi, GM in lactatie, tesut adipos (biosinteza AG)
CSR (sinteza NADPH-dependenta a steroizilor)
eritrocite (sinteza NADPH pt a mentine glutationul
redus)
 Calea pentozo-fosfat si a NADPH-ului

Conversia pentozelor la hexoze include reactii de izomerizare, transcetolizare,

transaldolizare:
 Reglarea suntului pentozo-fosfat

Utilizarea G-6-P fie prin glicoliza fie pe calea pentozofosfatilor depinde de

necesitatile celulei pentru ATP, NADPH si ribozo-5-P

Daca celula are nevoie si de NADPH,H+ si de ribozo-5-fosfat se desfasoara

predominant primele 4 reactii

Daca celula necesita mai mult ribozo-5-fosfat decat NADPH, H+ sunt extrase
din glicoliza Fr-6-P si GAP pentru a ocoli etapele din calea pentozofosfatilor
unde se sintetizeaza NADPH,H+. Se produc doar reactiile 5, 6, 7, 8

Daca este necesar mai mult NADPH,H+, ribozo-5-P este folosit pentru a
produce intermediari glicolitici pentru ca G-6-P sa fie folosit in producerea de
NADPH,H+.
 Reglarea suntului pentozo-fosfat

Glucozo- 6-P
dehidrogenaza
Reactie ireversibila

Limiteaza viteza
intregului proces
metabolic
NADPH si NADP+
Intra in competitie pentru
centrul catalitic activ.
 Semnificatia metabolica a suntului

1. unica sursa de pentoze pentru:

Sinteza acizilor nucleici (ADN, ARN)
Sinteza coenzimelor (NAD, FAD)
Sinteza ATP
Sinteza anumitor vitamine precum B2 si B12
2. este sursa majora de NADPH+H, esential pentru:
Sinteza AG
Sinteza colesterolului
Sinteza hormonilor steroizi
Sinteza aminoacizilor (prin reactia glutamat dehidrogenazei)
Stabilitatea celulelor rosii
3. deficienta Glucozo-6-fosfat- dehidrogenazei determina favismul
care este o boala congenitala hemolitica.
 UTILIZAREA NADPH

NADPH,H+ sintetizat in calea

pentozofosfatilor este folosit si
la reducerea glutationului
oxidat:
Glutationul redus necesar
descompunerii H2O2 in
cantitate mare ar determina
oxidarea Hb la metHb si stres
oxidativ
H2O2 provine din degradarea
xenobioticelor (substante
straine organismului), din unele
procese biochimice (ex.,
degradarea bazelor purinice
etc.)
DEFICITUL DE G-6-P- DEHIDROGENAZA
 Favismul

Anemie hemolitica congenitala cauzata de glucozo-6-fosfat

dehidrogenaza (prima enzima a suntului pentozo fosfat)
Determina deficienta de NADPH+H, necesar globulelor rosii
Reducerea glutationului este esentiala pentru mentinerea Fe in
ca fier feros=2+;
Deficienta de glutation va duce la incapacitatea de a proteja
hematiile impotriva H2O2. Astfel, hematia va deveni fragila si
la ingestia pentru prima data de boabe de fasole fava in
copilarie, va aparea hemoliza severa.

La fel se intampla prin consumul de medicamente antimalarice

sau a altor medicamente. Transfuzia este esentiala in asemenea
situatii pentru a salva viata bebelusului.
 Favismul

Some epidemiological and in vitro studies

suggest that the hemolysis resulting from
favism acts as protection from malaria,
because certain species of malarial protozoa,
such as Plasmodium falciparum, are very
sensitive to oxidative damage due to
deficiency of the glucose-6-phosphate
dehydrogenase enzyme, which would
otherwise protect from oxidative damage via
production of glutathione reductase.
 DEFICITUL DE G-6-P- DEHIDROGENAZA

Determina anemia hemolitica. S-a observat ca unii

subiecti sunt susceptibili la a manifesta anemie
hemolitica acuta la administrarea unor medicamente ca
antimalarice, sulfamide, antipiretice, simptomele
aparand in 48-96 ore, datorita deficitului de activitate a
acestei enzime

Incidenta acestei deficiente este crescuta in zonele

geografice unde poate sa apara malaria.
CALEA GLUCURONICA
 Calea glucuronica

Cale secundar de
metabolizare a glucozei

Acidul Glucuronic este un

acid carboxilic. Structura sa
este similar cu a glucozei.

al 6-lea atom de C al
acidului glucuronic este
oxidat la acid carboxilic.
 Calea glucuronica

Furnizeaza UDP- glucuronat, forma activa a acidului

glucuronic
Rolul acidului glucuronic:
Conjugarea bilirubinei

Sinteza vitaminei C (plante, animale inferioare)

Sinteza glicozaminoglicanilor (=hetero-polizaharide,

formate prin repetarea unei unitati dizaharidice (zaharid

acid- zaharid bazic):
Zaharid acid= acid D-glucuronic, L-iduronic

Zaharid bazic= D-glucozamina sau D-galactozamina

 Calea glucuronica

La om, produsul final al caii

glucuronice este xilulozo-5-
fosfatul, care poate intra in
calea pentozo-fosfat.

Gena UGT1A1 gene codeaza

enzima Uridil difosfat-
glicoziltransferaza (UGT),
care este implicata in
conjugarea bilirubinei.
Deficienta enzimei determina
cresterea nivelului de
bilirubina neconjugata.
 Criegler-Najjar= deficienta in UGT

Boala rara ce afecteaza metabolismul

bilirubinei.

Determina icterul non-hemolitic

cauzat de nivelul ridicat de bilirubina
neconjugata.

Tipul I de deficienta este incompatibil

cu viata. Tipul II poate fi tratat cu
barbiturice care stimuleaza sinteza
enzimei Uridil difosfat
glicoziltransferaza (UGT).
Calea glucuronica
Calea glucuronica