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TCNICAS INMUNOLGICAS

APLICADAS AL DIAGNSTICO
VIROLGICO
DIAGNSTICO
VIROLGICO

1. Mtodos Directos
2. Mtodos Indirectos
MTODOS DE DIAGNSTICO
VIROLGICO

DIRECTOS INDIRECTOS
AGENTE SEROLOGA
VIRAL Anticuerpos
Deteccin de la
respuesta inmune

Agente
Infeccioso
Antgeno cido
Partcula
Viral nucleico
Infeccin Viral

Diagnstico serolgico

Diagnstico virolgico
Diagnstico molecular

DAS
Muestra de fase Muestra de fase
aguda convaleciente
TECNICAS DE INMUNOMARCACIN

Marcadores o trazadores

Fluorocromos: FICT, IF
Rodamina

Enzimas: Fosfatasa
alcalina, Peroxidasa, EIA-ELISA
Glicerofosfatasa, Ureasa

Istopos radioactivos:
14
C, 3H, 125I RIA
INMUNOFLUORESCENCIA (IF)

DETECCIN DE Ag VIRALES

IFD IFI
INMUNOFLUORESCENCIA (IF)

Toma de muestra para


diagnstico de Virus
Respiratorios (HNF, ANF)

IFD/IFI: Adenovirus,
Influenza A and B,
Parainfluenza type 1, 2, and
3, RSV, CMV, HSV, and VZV
IFD: VRS (90% sensibilidad)
INMUNOFLUORESCENCIA (IF)

IFI en CC:
Diagnstico de
Dengue

IFD: Biopsias/autopsias de cerebro para el diagnstico


de encefalitis por HSV, Rabia en autopsias de cerebros
de animales o antigenemia para CMV en leucocitos de
sangre perifrica.
ELISA
ELISA
Deteccin de Ag Viral

Ac de
captura
(IgG anti-
viral)

CMV, HSV, VZV, HBsAg, HIV (Ag p24 )


AMPLIFICACIN DE LA SEAL
AVIDINA-BIOTINA

Ac anti-
viral
INMUNOHISTOQUMICA
PAP
Peroxidasa

Ac anti-peroxidasa

Ag de virus
Dengue y virus
Junn

Ac antiespecie

Ac anti-viral
Ag Viral

Tejido
INMUNOHISTOQUMICA

Virus Rabia: Autopsia de cerebro


MTODOS INDIRECTOS
SEROLOGA

IgM especfica

Conversin Serolgica

Estado Inmune
PERFIL SEROLOGICO TIPICO
Muestra de fase Muestra de fase
aguda convaleciente
Reinfeccin
Reinfeccin

IgG
IgG
Ttulo de
Ttulo Anticuerpos
de Anticuerpos

IgM
IgM

Tiempo
DIAGNSTICO INDIRECTO
SEROLOGA

SUERO AGUDO

MUESTRA
NICA

PRIMOINFECCIN
CONVERSION SEROLGICA

SUERO AGUDO

4 veces
mayor ttulo

SUERO
CONVALECIENTE
Perfil Serolgico Vacunacin

UNA SOLA
MUESTRA

ESTADO
INMUNE
INMUNOFLUORESCENCIA (IF)
DETECCIN DE Ac ANTI-VIRALES

Deteccin de Acs
contra Rubola, EBV,
VZV, Sarampin.

IF

Inmunofluorescencia anti-
complemento (IFAC),

Deteccin de Acs
contra el Ag nuclear
de EBV, VZV,
Sarampin, HSV, HIV.
IFAC
ELISA
Deteccin de IgG e IgM

IgG IgM
VHA, VHB, VHC, HIV, Sarampin, Rubola,
HTLV, Sarampin, Paperas, VHA, VHB,
Paperas VHC, HSV
Western Blot

Muestra

Muestra
Western Blot

Quirk E K et al. Clin Infect Dis. 2008;47:1593-1599


Western Blot: HIV
RIBA
ENSAYO INMUNOBLOT RECOMBINANTE
Permite la deteccin de IgG Anti-VHC

C22-3
IgG en
Bandas
+ suero + Ac * + Sustrato coloreadas
NS3 paciente

NS4

DOS O MAS LINEAS DE


NS5 COLOR

POSITIVO
INMUNOCROMATOGRAFA
DETECCIN TEMPRANA
TEST RPIDO
INMUNOCROMATOGRAFA DE FLUJO LATERAL
Deteccin de Ag

Negativo
1 banda
Positivo
2 bandas

Aplicaciones: Ag de Adenovirus, Rotavirus, Influenza A y B


INMUNOCROMATOGRAFA DE FLUJO LATERAL
Deteccin de Ac
Ac anti-Ag
viral

Negativo
1 banda
Positivo
2 bandas

Aplicaciones: Acs de HIV, Dengue, HTLV


DIAGNSTICO DE DENGUE
DETECCION DE Ag y Ac
METODOS INDIRECTOS: Serologa
APLICACIONES
- PRIMOINFECCIN
Presencia de IgM
Conversin serolgica: Aumento de 4 o > ttulo de Ac
(sueros pareados)

- REINFECCIN
< de 4 ttulo de Ac totales
Ausencia de IgM?

- VALORACIN DE ESTADO INMUNE


Prenatal Prelaboral Pretransplante Donacin de sangre
Postexposicin
Vigilancia Epidemiolgica Respuesta a Vacunacin

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