Aplicaciones de la

espectrometra de absorcin
molecular ultravioleta/visible
Cap. 14
 La absorcin de la radiacin UV/VIS
por una molcula puede considerarse
en dos etapas:

1. excitacin electrnica

2. relajacin
- El calor desarrollado no es detectable.
- Vida media de la especie excitada M* es de 10-8 a 10-9
segundos.
 La relajacin tambin puede ocurrir
por:

- descomposicin de M* en dos
especies nuevas (reaccin
fotoqumica)

- reemisin de fluorescenciaa o
fosforescenciab (recordar que a dura
menos tiempo que b)
 La absorcin de radiacin UV/VIS resulta de
la excitacin de los electrones de enlace;
los picos de absorcin pueden relacionarse
con los tipos de enlace (identificacin de
grupos funcionales en una molcula).

Sin embargo, la aplicacin ms importante

es la determinacin cuantitativa de
compuestos que contienen grupos
absorbentes.
Reconocemos tres tipos de
transiciones electrnicas:
1.Las que incluyen electrones , y n.
2.Las que incluyen electrones d y f.
3.Las de los electrones de
transferencia de carga.
 Las especies absorbentes
son:
Iones y molculas orgnicas as como
algunos aniones inorgnicos.

TODOS los compuestos orgnicos son

capaces de absorber radiacin porque
todos contienen electrones de valencia
(, o n) que pueden ser excitados a
niveles de energa superiores.
 Tipos de electrones
absorbentes
Aquellos que participan directamente
en la formacin del enlace entre
tomos.

Electrones no enlazantes o electrones

que no participan en ningn enlace
que estn en gran parte localizados
alrededor de tomos como oxgeno,
halgenos, azufre o nitrgeno.
Transiciones posibles
- Compuestos saturados con enlaces simples.

- : menor que 150 nm (UV de vaco, poco accesible).

- Metano max = 125 nm; enlaces simples C-H.

- Etano max = 135 nm; enlaces simples C-C y C-H, este

ltimo de mayor energa que el C-C, por eso max es
menor.

- Requiere mayor energa que cualquiera de las otras

transiciones permitidas.
- Compuestos saturados con pares de electrones
compartidos.

- : entre 150 a 250 nm.

- : es baja a intermedia, 100 a 3000 L cm -1 mol-1

- En presencia de solventes polares max se desplaza a

ms cortas.

- En pocos grupos funcionales se detecta con facilidad.

 Ambas requieren la presenci a de grupos
funcionales no saturados que aportan los
electrones .

Producen picos de absorcin dentro de

una regin espectral experimentalmente
accesible.

A estos centros absorbentes no saturados

se aplica el trmino cromforos.
- Compuestos no saturados con pares de electrones no
compartidos.

- : entre 200 a 700 nm.

- : es baja, 10 a 100 L cm-1 mol-1

- Al aumentar la polaridad del solvente max se desplaza a

ms cortas (desplazamiento hipsocrmico o hacia el
azul).

- En muchos grupos funcionales se detecta con facilidad.

- Compuestos no saturados.

- : entre 200 a 700 nm.

- : es media a alta, 1000 a 10000 L cm -1 mol-1

- Al aumentar la polaridad del solvente max se desplaza a

ms largas (desplazamiento batocrmico o hacia el
rojo).

- En muchos grupos funcionales se detecta con facilidad.

Efecto de la conjugacin de
cromforos
La absorcin de los multicromforos en una
molcula orgnica es aproximadamente
aditiva, siempre que estn separados por
ms de u enlace sencillo.

Si los cromforos estan conjugados las

propiedades espectrales cambian, max se
desplaza a ms largas (desplazamiento
batocrmico o hacia el rojo).
 Absorcin por sistemas
aromticos
Los espectros UV de los aromticos se
caracterizan por tres grupos de bandas
debidas a transciones .
Ej: benceno,
max = 184 nm, =60,000; Banda E2 dbil
= 204 nm, =7,000; Banda B +dbil = 256
nm, =200.

Se ven muy afectadas por la sustitucin

del anillo y por los disolventes.
Efecto de los disolventes

Tienden a reducir
o eliminar la
estructura fina de
los picos agudos
de los
aromticos.
 Efecto de los sustituyentes
Auxocromo: grupo funcional que no
absorbe en la regin UV pero que
tiene el efecto de desplazar los picos
del cromforo hacia longitudes de
onda ms largas, e incrementar sus
intensidades.
Tienen al menos un par de electrones
n capaces de interaccionar con los
electrones del anillo.
En la tabla 14-4 se ve que OH y NH2
tienen un efecto auxocrmico sobre el
cromforo benceno, en relacin con la
banda B particularmente.
 Absorcin por aniones
inorgnicos
Presentan picos de absorcin UV que son
consecuencia de transiciones .
Ejemplos:
- Nitrato 313 nm
- Carbonato 217 nm
- Nitrito 360 y 280 nm
- Azida 230 nm
- Tritiocarbonato: 500 nm
Absorcin por los elementos
de la 1era. y 2da. serie de
los metales de transicin
Los iones y complejos de los 18 elementos
de 1era. serie de los metales de transicin
tienden a absorber radiacin VIS en uno o
en todos sus estados de oxidacin.
Transiciones de electrones entre los
distintos niveles de energa de los orbitales
d (3d en la 1era. serie y 4d en la 2da).
 Las bandas de absorcin son anchas,
influenciadas por los factores
qumicos del entorno.

Ejemplo: In cobre II acuoso es azul

plido; in cobre II con amonaco
forma un complejo azul oscuro.
 Absorcin por iones
lantnidos y actnidos
Absorben en la regin UV/VIS.

Transiciones de electrones entre los

distintos niveles de energa de los
orbitales f (4f en los lantnidos y 5f
en los actnidos).
 Espectros formados por picos de
absorcin caractersticos, bien definidos y
estrechos, muy poco afectados por los
factores qumicos del entorno, o por el
tipo de ligando asociado con el in
metlico.

Difieren de la mayora de los espectros de

los absorbentes inorgnicos y orgnicos.
http://chrom.tutms.tut.ac.jp/JINNO/DRUGDATA/35diazepam.html#UV

http://webbook.nist.gov/chemistry/
diazepam
Resultados de anlisis por HPLC
Tiempo de retencin: 12.33min
Longitud de onda ptima: 240nm Peso Molecular : 284.75
Sensibilidad : 5.63ng
Absorbancia / 100ng : 0.3851 abs.sec
Aparato y condiciones de anlisis
Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) +
(CH3CN30%)
Velocidad de flujo: 1.0mL/min.
Columna : FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.)
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda : 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datos: DP-
L320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)
Propiedades Fsicas
Frmula Molecular : C16H 13ClN2O
Nombre qumico: 7-chloro-1,3-dihydro-
1-methyl-5-phenyl-2H-1,4-
benzodiazepin-2-one
Propiedades : White, Light yellow
crystalline powder. Non smell. Taste is
slightly bitter.
Punto de fusin: 130-134c
log P : 2.80 ( Experimentally
determined value ) 3.18 ( Calculated
value )
Constante de ionizacin pKa : 3.3
Solubilidad
Chloroform : easily soluble
acetic anhydride, Ethanol :
partially soluble
Ether : hardly soluble
Water : almost insoluble
Administracin oral / 1day : 30-60mg
Clasificacin Actividad de la Droga:
Tranquilizer

Diazepam
cido acetilsaliclico
Resultados de anlisis por HPLC Propiedades Fsicas
Tiempo de retencin: 4.14min Frmula Molecular : C9H 8O4
Longitud de onda ptima: 230nm Peso Molecular : 180.16
Sensibilidad : 4.59ng log P : 1.19 ( Experimentally
Absorbancia / 100ng : 0.1853abs.sec determined value ) 1.10 ( Calculated
value )
Aparato y condiciones de anlisis Constante de ionizacin pKa : 3.5
Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) + Administracin oral / 1day : 500-
(CH3CN30%) 1000mg
Velocidad de flujo: 1.0mL/min. Clasificacin Actividad de la Droga:
Columna : FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.) Analgesic; antipyretic
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda : 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datosDP-
L320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)

cido acetilsaliclico
Barbital
Resultados de anlisis por HPLC
Tiempo de retencin: 3.00min
Longitud de onda ptima: 210nm
Sensibilidad : 3.95ng
Absorbancia / 100ng : 0.1833 abs.sec
Aparato y condiciones de anlisis
Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) +
(CH3CN30%)
Velocidad de flujo: 1.0mL/min.
Columna : FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.)
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda : 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datosDP-
L320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)
Propiedades Fsicas
Frmula Molecular : C8H 12N2O3
Peso Molecular : 184.20
Nombre qumico: 5,5-diethyl barbituric
acid
Propiedades : colourless or white
crystalline powder. Non smell. Taste is
slightly bitter.
Punto de fusin: 189-192c
pH : 5.0-6.0
log P : 0.65 ( Experimentally
determined value ) 0.65 ( Calculated
value )
Constante de ionizacin pKa : 7.97
Solubilidad
Acetone, Ethanol : soluble
Water, Chloroform, Ether : hardly
soluble
Administracin oral / 1day : 300mg
Clasificacin Actividad de la Droga:
Hypnotic

Barbital
Acetaminofn
Resultados de anlisis por HPLC Propiedades Fsicas
Tiempo de retencin: 2.41min Frmula Molecular : C8H 9NO2
Longitud de onda ptima: 245nm Peso Molecular : 151.17
Sensibilidad : 2.81ng Nombre qumico: N-(4-
Absorbancia / 100ng : 0.3225 abs.sec hydroxyphenyl)acetamide
Propiedades : White crystal or
Aparato y condiciones de anlisis Crystalline powder. Non smell. Taste is
Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) + slightly bitter.
(CH3CN30%) Punto de fusin: 169-172c
Velocidad de flujo: 1.0mL/min. log P : 0.51 ( Experimentally
Columna: FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.) determined value ) 0.49 ( Calculated
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco). value )
Longitud de onda: 210-350nm. Constante de ionizacin@pKa : 9.71
Temperatura de columna: 50c Solubilidad
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan) aceton : easily soluble
System controller 801-SC ether,benzene : hardly soluble
Gradient device 880-02 Saturated solution : slight acidity
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datosDP- Administracin oral / 1day : 300-
L320/98(Jasco, Hachioji, Japan) 500mg
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.) Clasificacin Actividad de la Droga:
Analgesic; antipyretic

Acetaminofn
Titulaciones fotomtricas