UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

CURSO
BIOQUMICA Y NUTRICION

DOSAJE DE AMILASA
SERICA Y URINARIA

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 INTRODUCCIN
Como se sabe la Amilasa es una enzima que ayuda a
digerir los carbohidratos, es producida en el pncreas y
en las glndulas salivales, cuando el pncreas se
encuentra inflamado o con alguna patologa, se libera
Amilasa en la Sangre, es cuando se debe de hacer un
examen para poder medir el nivel de esta enzima en la
sangre.
Para realizar esta prctica se necesita muestra de sangre
en ayunas, el dosaje de amilasa Srica nos va a servir
para diagnosticar una pancreatitis aguda, tambin
Pancreatitis crnica o Seudoquiste pancretico, como
casos ms graves.

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As como se puede detectar Amilasa en la sangre tambin
se puede apreciar Amilasa en la orina, y para este caso se
hace un dosaje de Amilasa urinaria, con muestra de orina
recolectada 2 horas despus de haber miccionado la
primera hora en la maana a la hora de levantarse, este
examen al igual que el anterior se hace para diagnosticar
pancreatitis entre otras enfermedades relacionadas al
pncreas.

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 Am
La amilasa es una enzima que es
ilas
producida principalmente por el
pncreas y las glndulas salivales, y

cona
en mucha menor medida, aportan
su produccin, el hgado y las
trompas de Falopio.
La amilasa es eliminada por medio
de la orina, razn por la cul, las
personas en condiciones normales,
tienen concentraciones habituales,
dentro de ciertos rangos, tanto en la
sangre como en la orina.
Denominndose amilasemia al valor
de amilasa en la sangre, y amilasuria,
al valor de amilasa encontrado en la
orina.

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 EXPERIMENTO A
DETERMINACIN DE AMILASA EN SUERO
1. SUSTANCIAS:
Muestra de sangre en ayunas.

2. PRODUCTOS QUMICOS - REACTIVOS:

KIT de WIENER LAB., contiene
Sustrato (solucin de Almidn
tamponeada a pH 7 con buffer fosfato
0.1 mol/l en NaCl 0.15 mol/l) y el
Reactivo de yodo (solucin 0.001 eq/l
de yodo en HCl 0.002 mol/l).

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3. MATERIALES DE LABORATORIO
Tubos de ensayo de 5 ml.
Micropipetas.
Pipetas

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4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Primero, se prepararon los siguientes tubos:

Control Muestra
Sustrato 1 ml 1 ml
Dejar unos minutos en bao de agua a 37C y
agregar:
Muestra -- 20 uL
Incubar a 37C. A los 730 exactos, agregar:
Reactivo de Iodo 1 ml 1 ml
Mezclar por agitacin suave. Retirar los tubos del bao y agregar:
Agua destilada 8 ml 8 ml

Mezclar por inversin.

Leer en espectrofotmetro a 640 nm, llevando a cero el aparato
con agua
destilada.

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5. CALCULO DE LOS RESULTADOS:
Para ambos experimentos se emplear la siguiente frmula:

Unidades: Una Unidad Amilolticas (UA) es la cantidad de

enzima contenida en 100 ml de muestra, que puede
hidrolizar 10 mg de almidn en 30 minutos, en las
condiciones de la reaccin. En esta tcnica se incuban 20 uL
de muestra con 0.5mg de almidn contenidos en 1 ml de
Sustrato durante 7 minutos y medio, lo que equivale a
incubar 100 ml de suero con 10,000 mg de almidn durante
30 minutos. Si todo el almidn fuera hidrolizado, la actividad
amilsica de la muestra sera de 1000 UA/dl. Para obtener
las unidades de actividad amilsica, la fraccin de almidn
digerido se multiplica por 1000.

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 EXPERIMENTO B
DETERMINACIN DE AMILASA EN ORINA
1. SUSTANCIAS:
Muestra de orina (dos horas despus
de haber hecho la primera miccin,
descartando esta ultima), esta muestra
corresponde a 2 horas despus de
haber orinado la ultima vez.
2. PRODUCTOS QUMICOS - REACTIVOS:
KIT de WIENER LAB., contiene
Sustrato (solucin de Almidn
tamponeada a pH 7 con buffer fosfato
0.1 mol/l en NaCl 0.15 mol/l) y el
Reactivo de yodo (solucin 0.001 eq/l
de yodo en HCl 0.002 mol/l).

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3. MATERIALES DE LABORATORIO
Tubos de ensayo de 5 ml.
Micropipetas.
Pipetas

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3. EQUIPOS DE LABORATORIO.
Espectrofotmetro.
Bao Mara.
Centrifuga

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