UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS

INGENIERA BIOQUMICA

DATOS INFORMATIVOS:
DOCENTE: ING. DANAE FERNANDEZ

MODULO: INGENIERA DE LAS FERMENTACIONES

SEMESTRE: SEPTIMO U

ALUMNOS: MA. JOS BARRENO

SEBASTIAN GUTIERREZ
DARWIN LLUMIGUSN
ISABEL SANCHEZ

OCTUBRE 2016 FEBRERO 2017

PARMETROS FISICOQUMICOS PARA LA SNTESIS
DE CIDO LCTICO O ETANOL DE LA BACTERIA
(Corynebacterium glutamicum).

INTRODUCCI
N
El incremento en el consumo
de productos derivados del
petrleo , ha conducido a la
industria e investigadores a
unir esfuerzos en busca de
alternativas de obtencin
industrial que sean
innovadoras y amigables con
el medio ambiente.

La comunidad cientfica, entidades gubernamentales y la

sociedad civil estn enfocadas en buscar fuentes
alternativas de biocombustibles que disminuyan dichos
impactos y la dependencia de los recursos fsiles a partir
de desechos agroindustriales
 Una de las alternativas es la produccin
biotecnolgica costo-efectiva de productos
qumicos en masa a partir de recursos
renovables.

El cido lctico Etanol

Sacharomices cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Pichia

stipidis, Z. mobilis, E. coli, Klebsiella oxytoca, Lactobacillus, etc
Este trabajo aborda en principio, la bsqueda de
los mejores parmetros fsico-qumicos de
crecimiento en Corynebacterium glutamicum
para la sntesis de cido lctico o etanol bajo el
sistema de cultivo en lote; que a futuro puedan
ser aplicados a nivel industrial con desechos
agrcolas provenientes de la caa de azcar.
MATERIALES Y MTODOS
 ESTRUCTURA METODOLGICA Y DISEO DE EXPERIMENTOS
Pruebas para la identificacin de las
condiciones del cultivo.
Ocho condiciones o variables de cultivo, con sus respectivos rangos
de trabajo fueron seleccionadas, enfocada al estudio metablico de C.
glutamicum para la sntesis de glutamato y lisina.
Bsqueda de las mejores condiciones de
crecimiento bacterial.
Este estudio se hizo para determinar
las mejores condiciones de cultivo que
rindieran en una alta cantidad y
velocidad de sntesis de biomasa
durante la fase de crecimiento antes
de la fase de produccin.
Cepa bacterial y composicin
del medio
La cepa usada en este estudio fue C. glutamicum 2262,
proveda por el Laboratorio de Ciencias Genticas y
Qumicas, Escuela Nacional Superior de Agronoma y de
Industrias Alimentarias, Universidad de Nancy. El medio
empleado para mantener la cepa fue MCGC (Medium
Corynebacterium glutamicum culture)
Determinacin de biomasa y productos
extracelulares

Durante el seguimiento de los cultivos, se tomaron muestras

cada 2 h durante la fase de reproduccin y una al final de la
fermentacin.

Para el caso de los cultivos en biorreactor se realiz

seguimiento al inicio del cultivo, previo a la suspensin
de aire e inicio de la fermentacin y cada 2 h durante la
fase de produccin

Cuantificacin de biomasa celular. La biomasa fue

determinada por espectrofotometra a 570 nm

Cuantificacin de azcares, cido lctico y etanol. 3 mL de

cultivo se centrifugaron a 4.000 x g (micro centrfuga
Beckman) por diez minutos los sobrenadantes obtenidos
fueron congelados a -20 C previo a su anlisis.
Anlisis de la
Informacin
Previo al anlisis a todos los pasos anteriores, se evaluaron las
diferencias estadsticas entre los datos de rplicas y ensayos
mediante una prueba t-Student.
Posteriormente, se realiz un anlisis de regresin lineal a cada
una de las curvas de concentracin de biomasa, para determinar la
pendiente o velocidad especfica de crecimiento (). Se calcularon
los rendimientos de biomasa (YX/S) y de sntesis de cido lctico
(YP/S) durante la fermentacin.
RESULTADOS
Hicieron ensayos sobre:
Crecimiento
bacteriano

Velocidad formacin

Produccin de cido
lctico
 Creci en
medio con
glucosa a 80g/L
e increment

Disminuy en
Sin embargo
un medio con
con 80g/L hubo
glucosa a 20g/L
2h de latencia

La baja sntesis Disminucin de

de cido lctico biomasa al final
es por la menor de la f.
[glucosa]. exponencial
 OTROS PRAMETROS
TEMPERATURA
A BAJAS (26-29C) EL TIEMPO DE
LATENCIA FUE MAS LARGO (8-6
h), CON UNA BAJA SINTESIS DE
BIOMASA
pH
EL INICIAL, SI ES BAJO O ALTO NO
INFLUYE EN LA SINTESS DE
ACIDO LACTICO , MIENTRAS QUE
Valores variable
respuesta
Modelo

Variables
independientes
: [Glu], [Bio], T

Variables
respuesta: ,
[X]
Pareto

Factores
significativo
s: +A, +AB,
+BC

[X]

Factores
significativo
s: +B, -AB, -
BC
Ecuacin modelo

Coeficientes significativos: Para ; Trmino independiente, T ;

Para [X]; B
Funciones respuesta
Diferentes monotonas en punto mximo
CINTICA DE FERMENTACIN
 Sin reconsumo
de metabolito

Rendimiento 32%

Alimentacin del
cultivo
al fina de la fase
exponencial, aumento
del rendimiento de
produccin.
 Concentracin
inicial de
Disponibilidad
Disponibilidad glucosa entre
de
de sustrato
sustrato 50 y 60 g/L
Osmolaridad

Menor,
provoca
pH
pH disminucin en
la sntesis de
acido lctico.

Mesfila
40 oC se
perturba la
actividad de
Temperatura
Temperatura las enzimas de
C.glutamicum
Menores a
34oC

Velocidad de
Agitacin
Agitacin crecimiento
Cantidad de
biomasa
 Disminucin de
biomasa al final
de la fase de
reproduccin
(corta)

Aumento de
glucosa,
disminucin
temperatura y
biotina;
aumento de fase
exponencial
(larga)
BIBLIOGRAFIA
Castellanos, A & Garca L, (2011), PARMETROS
FISICOQUMICOS PARA LA SNTESIS DE CIDO
LCTICO O ETANOL DE LA BACTERIA
(Corynebacterium glutamicum). Disponible en:
http://
www.scielo.org.co/pdf/abc/v16n2/v16n2a2.pdf