VIRUS DE

INMUNODEFICIENCIA
HUMANA (VIH)
Ctedra: ANALISIS BIOQUIMICO Y CLINICO
Docente: HUAMANCHUMO FLORES,JORGE ENR
Integrantes: Palomino Jimnez, Zuly Yennife
Villalva Canchumanta, Vannesa
Que es la Serologa ?
 OBJETIVOS DE LA SEROLOGIA

Identificacin de problemas de salud.

Determinacin de la distribucin de una
enfermedad.
Evaluacin del sistema inmune del individuo o de
una poblacin.
Medicin de la inmunidad materna.
 SEROLOGIA
La medicin de las interacciones Antigeno-
Anticuerpo con fines diagnsticos.
Se realizan en 2 vas:
Utilizacin de anticuerpos especficos para
detectar el antigeno. (diagnostico directo)
Utilizacin de antigenos especficos para
detectar anticuerpos. (diagnostico
indirecto)
DIAGNOSTICO LABORATORIO
VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA
HUMANA (V.I.H.)
 PRUEBAS LABORATORIALES
Diagnstico de la Infeccin del VIH
Screening (tamizaje)
Confirmatorio
Pruebas complementarias para el seguimiento de
paciente con la infeccin
Recuento de de Linfocitos CD4/CD8
Carga Viral
Pruebas de Rutina leucopenia
Hemograma
Orina linfopenia
Baciloscopia trombocitopenia
Parasitolgico VSG elevada
Otros
DIAGNOSTICO DE LA INFECCION
POR EL VIH
 METODOS
METODOS DIRECTOS
- Aislamiento viral:
Cultivo viral H9
- PCR : Deteccin de
fracciones antignicas
del virus genoma viral
METODOS INDIRECTOS
- Detectan la presencia de
anticuerpos especficos contra
el VIH por medio de tcnicas
serolgicas.
* TEST RAPIDOS * IFI
* ELISA
* WESTERN BLOT * LIA

La tcnica mas utilizada actualmente para el screening serolgico es el

test de ELISA y en menor proporcin los Test Rpidos (OMS)
 TAMIZAJE SEROLOGICO
E
t ELISA
a Positivo/Indeterminado Correr una
Negativo
p Repetidamente nueva muestra
a
(1) Repetidamente
POSITIVO

E WESTERN BLOT
t
Negativo Indeterminado Positivo
a
p
Correr una nueva muestra
a
30 a 60 das despus
(2)
Repetir etapas 1 y 2
TEST VENTAJAS DESVENTAJAS
PRUEBAS Baja Especificidad
Buena sensibilidad
RAPIDAS
Econmicas y rpidas
Lentas, baja sensibilidad
CULTIVOS Buena especificidad Complicado. Costo
VIRALES
Buena Sensibilidad
Periodo de Ventana
ELISA y Especificidad
Costo
Sencillo y rpido

WESTERN Confirmatorio, alta Elevado Costo

Sensibilidad y Especificidad.
BLOT
Seguro
Genotipificacin Contaminacin
PCR Periodo de Ventana Especificidad
Costo
 PRUEBA RAPIDA PARA
VIH
(INMUNOCROMATOGRAFIA)
 PRUEBA RAPIDA PARA VIH
(INMUNOCROMATOGRAFIA)
Objetivo
Detectar anticuerpos anti-VIH y no
componentes virales

Fundamento

- Mtodo cualitativo indirecto basado en el

principio de adsorcin selectiva de
inmunoglobulinas.
Prueba rpida para VIH
Prueba rpida para VIH
Prueba rpida para VIH
Prueba rpida para VIH

8. Coloque la muestra de sangre

completa colectada en el capilar en la
superficie absorbente, y espere un
minuto
 Prueba in Vitro

Tarjetas de ensayo recubiertas de antgeno

recombinante del VIH 1 y VIH 2 y de
pptidos sintticos.

Laboratorios Abbott
ENZIMOINMUNOENSAYO
(ELISA)
TEST DE ENZIMOINMUNOENSAYO
(ELISA)
Objetivo
Detectar anticuerpos anti-VIH y no
componentes virales

Fundamento

- Mtodo enzimtico, cualitativo indirecto

basado en el principio de Sandwich en un
solo paso
 FUNDAMENTO

H2SO4
Sustrato
(Sustrato Enzimtico +
Cromgeno)
Conjugado
Antgenos HIV1/2
marcado con Enzima Anticuerpos
HPR
Suero o Plasma

Antgenos
VIH1/2
 POSITIVO
Presencia de anticuerpos HIV
1/2 (color amarillo)

NEGATIVO
Ausencia de Anticuerpos
PLACA DE ELISA
para VIH1/2
(Sin color)
L
E
C
T
O Lectura de la
R D
E
reaccin final
E
L Se lee a 450/630 nm
I
S
A
WESTERN BLOT
(TEST CONFIRMATORIO)
TEST DE WESTERN BLOT

Objetivo- Detectar anticuerpos especficos

contra el VIH1/2

Fundamento
Test Inmunolineal o ELISA en banda,
que detecta anticuerpos
Lisado viral de clulas infectadas,
sometidos a electroforsis en gel de
poliacrilamida y transferido a hojas de
nitrocelulosa
 Criterios de interpretacin
POSITIVO
- Si dos bandas presentan intensidad >1+ en relacin
al control ,
- Una banda de envoltura y la p24
- Presencia de bandas gp120, gp41, p31, p24 y p17
para HIV1
- Protenas gp105 y gp36 para HIV2

3+ 1+ +/-

Control
gp120 gp41 p31 p24 p17
gp105 gp36
Criterios de interpretacin

INDETERMINADO
- Si dos o mas bandas presentan intensidad +/-
- Si una banda presente intensidad <1+ y el
resto son negativos en relacin al control
3+ 1+ +/-

Control Gp120 p24

NEGATIVO
Si todas las bandas presentan valoracin <+/-
Ausencia de protenas
3+ 1+ +/-

Control
PRUEBAS COMPLEMENTARIAS
PARA EL SEGUIMIENTO DE
PACIENTES POSITIVOS
PRUEBAS COMPLEMENTARIAS

Test para el seguimiento de pacientes

VIH Positivos

Recuento de Linfocitos CD4/CD8

Carga Viral
RECUENTO DE LINFOCITOS CD4/CD8

Citometra de flujo
Tamao celular
Complejidad interna o grnulos internos
Intensidad relativa de la Fluorescencia

ELISA (Enzimoinmunoensayo)

Inmunofluorescencia (IFI)
CITOMETRO DE FLUJO
EPICS XL PECKMAN COULTER
Fundamento del Citmetro de Flujo
 PARAMETROS DEL RECUENTO DE
CELULAS CD4/CD8

El Recuento de CD4/CD8, tiene como

finalidad de evaluar el estado
inmunolgico de la persona infectada
Valores de referencia:
Clulas CD4+ varan entre 600 a 1500 clulas
por mm3 de sangre
Clulas CD8+ varia entre 300 a 800 clulas
por mm3 de sangre
Relacin de clulas CD4+ vs. CD8+ es de 2:1
 VALORES ABSOLUTOS
Superiores a 500 celulas CD4+ (Buen estado de salud)
Entre 200 y 500 celulas CD4+
Incrementa riesgo de Herpes, Aftas, Infecciones en piel, Infecciones
pulmonares, TB
Enfermedades Oportunistas Pneumonia por Pneumocistis Carini,
Citomegalovirus
Entre 50 y 200 clulas CD4+
Se incrementa el riesgo por PCP y otras enfermedades oportunistas
Se recomienda ya el tratamiento preventivo
Inferiores a 100, considerar el tratamiento preventivo para
enfermedades oportunistas e infecciones masivas por hongos.
Inferiores a 50 clulas CD4+
Se incrementa riesgo de enfermedades oportunistas
Continuar con terapias preventivas
DIAGNOSTICO
PEDIATRICO
 La presencia de IgG materna en el
recin nacido dificulta el diagnstico.
Seguimiento durante 15 a 18 meses con
WB en forma seriada.
Deteccin de antgeno, aislamiento viral
y la PCR son de utilida, pero debe ser
evaluado con:
Clnico
Inmunolgico
Factores que pueden influir en los
resultados:

Laboratorio
Reactivos
Tiempo de procesamiento
Horario de la toma de muestra
Presencia de infecciones
Falta de sueo
Estrs
Otros factores biolgicos
 CONCLUSIONES

Para el seguimiento de pacientes con la

infeccin, es importante:
El Recuento de Linfocitos CD4/CD8, debe ir paralelo
a la prueba Carga Viral
Evaluar el estado clnico del paciente
Realizar seguimiento al paciente VIH positivo,
en coordinacin de:
Mdico-Clnico,
Laboratorio y
Consejera
Adherencia permanente
PREVENCIN

Promocin a todo nivel social

del uso del preservativo
Tratamiento y prevencin de
otras enfermedades de
transmisin sexual
Programa de reparto de jeringas
para drogadictos