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PRODUCCION IN-VITRO DE
EMBRIONES
Presentado por: JESUS ANGEL TITI PACOSONCCO.
DOCENTE - UNAMAD
ANTECEDENTES
Monta natural
Control y sincronizacin del ciclo ovarico y estral.
Coleccin, procesamiento, conservacion de semen e I.A.
Superovulacin, coleccin y transferencia embrionaria.
Coleccin de ovocitos, maduracin y fertilizacin in-vitro, cultivo y
transferencia de embriones.
ICSI (Inyeccin intraplasmatica de espermatozoides)
Conservacin de ovocitos y embriones.
Sexado de embriones.
Sexado de espermatozoides.
Cultivo y reprogramacin de clulas somaticas.
Micromanipulacin: biopsia, biseccin,reconstruccin.
Clonacion
Transgenesis
Formacin de lneas de celulas eternas Stem cells (Citado:Vivanco
2004)
Objetivos de la aplicacin de tcnicas
reproductivas asistidas
Temperatura de 35 a 37C
Mantenerse 8 h en la solucin sin afectar su calidad(Citado: Ramirez
y Jimenez 2003)
1.2. Recoleccion por mtodo de corte
Recorte de los tejidos, sangre,, lavados con solucin
salina, alcochol
3.1. Morfologa
4. Maduracion in-vitro
Medios, suplementos y tcnica
TCM-199, TALP, B2 de Menezo,
Waymout 752-1
Hepes 5,95 mg; piruvato de sodio
0,025 mg; NaHCO3 2,2 mg; 0,01 U.I.
de FSH; 0,5 mg de LH por ml. 0,6%
de BSA, SVE 10%.
24 h, 39C, 5% CO2 y humedad
saturada(Mozzaquatro et al. 2004).
5. Fecundacin in-vitro
Medios, suplementos y
tcnica
TALP, BO, o el TCM-199.
Celulas oviductales,
Clulas del cumulos,
heparina, Ca(Gonzales y
Gil 2004).
TALP FERT(Parrish et al.,
1986), 6 mg de BSA, 0,022
mg de piruvato de sodio,
30 mg de heparina por
ml(Mozzaquatro et al.
2004). Semen congelado,
TALP-SPERM 6 mg de
BSA, 0,11 mg de piruvato
de sodio por ml, migracin
ascendente(swim-up).
1x106 espermatozoides.
39C, 5% CO2 y humedad
saturada , por 18 h.
6. Cultivo in-vitro de embriones
Medios, suplemento y tcnica
TCM-199, Menezo B2, SOF; FCS 5%, 0.1% BSA
(Gonzales y Gil 2004). En 400 ul SOFaaci(Holm
et al. 1999), ms 0.1% PAV, 0,6% BSA, 5% SVE,
cubierto con aceite mineral en placas
acondicionada en bolsas y gasificada 5% CO2 ,
5% O2 90% N2 , 39C, por 8 das (Mozzaquatro et
al. 2004).
7. Aplicaciones
Transferencia de Embriones
Sexado de embriones
Obtencion de biopsia
PCR para determinar presencia
de cromosoma Y
Reaccin enzimatica
Fluorescencia
95% de muestras son sexadas
exitosamente
No se afecta la viabilidad
Multiplicacin de embriones
sexados por biseccin o clonado
perfecto
Multiplicacin de embriones
sexados por disgregacin de
elastmeros
Multiplicacin de embriones sexados por
clonacin va transferencia nuclear
Conservacion
CONCLUSION
Eficiencia comparativa entre MOET y OPU_TVR
Produccion de embriones
Produccion de dedicando las donantes
embriones entre a produccion
los 30 y 90 dias embrionaria todo el
post parto anio
MOET OPU-IVP MOET OPU-IVP
Produccin de hibridos
Produccin de mellizos