Terapia genic

Scopuri
Metode i riscuri
Recomandri bioetice existente i
critica lor
 Cazul Gelsinger

incorectitudinea procedurii de includere a subiectului n

experiment;
Observaie util, sau tehnicism?

incompletitudinea informaiilor oferite n formularul de

consimmnt informat;
Observaie util sau tehnicism?

incompletitudinea rapoartelor tiinifice preliminare.

Observaie util sau tehnicism?
scopuri
 Scopuri ale introducerii de material genetic strin n celule

1. corectarea funcionrii defectuoase a unei gene

Cum credei c se poate realiza acest obiectiv? (facei

propuneri teoretice, nu tehnice)
Cuvinte cheie: exprimare, blocarea exprimrii

nlocuirea unei gene defective

introducerea n genom a unei secvene proprii
accidental absente
intensificarea producerii unei anumite proteine
introducerea n celule a unor secvene oligonucleotidice
antisens cu scopul blocrii exprimrii unor gene
 Scopuri ale introducerii de material genetic strin n celule

2. terapia antitumoral

Cum credei c se poate realiza acest obiectiv? (facei

propuneri teoretice, nu tehnice)
Cuvinte cheie: distrugerea specific a celulelor
tumorale.

promovarea aciunii anumitor compui medicamentoi

prin introducerea unor gene care confer celulelor
sensibilitate la respectivii compui (cuvnt cheie: gene
sinucigae)
uciderea direct a celulelor tumorale de ctre virusuri
(cuvnt cheie: atac viral intit)
introducerea n celulele tumorale a genelor complexului
major de histocompatibilitate (cuvnt cheie: exprimarea
antigenilor)
Metode i riscuri
 Unelte propuse ale terapiei genice

virusuri

ADN nud
Vehicule
ale genelor

ADN
lipozomi
conjugat
 Vectorii virali

dezavantaje comune tuturor claselor

capacitatea redus de a ptrunde n celule (cuvinte cheie:

timp de njumtire, distane de parcurs la nivelul
esuturilor)
exprimarea inadecvat a genei transferate (cuvnt cheie:
absena elementelor reglatoare)
imunogenicitatea vectorilor (vezi i variaia rspunsului
imun)
potenialul imunogen al produsului transgenei
potenialul de sileniere a transgenei (cuvnt cheie
mecanisme protectoare)
 Lipozomii

dezavantajele utilizrii lor n terapia genic

citotoxicitate
exprimarea genei nu persist

Ce alt problem credei c poate aprea n

urma transferului de gene cu ajutorul
lipozomilor?

potenial imunogen al produsului transgenei

 Utilizarea ADN/ARN nud n terapia genic

dezavantaje

rate reduse de transfer;

exprimarea transgenei este limitat la situl de injecie
potenial imunogen al produsului transgenei

Ce probleme suplimentare ar putea genera

utilizarea ARN?
Exemple de terapie genic implicnd vectori integrativi

Terapia hipertensiunii arteriale nu a dat rezultate mai

bune dect cea clasic.
Determinismul genetic al HTA variaz de la tipul
mendelian la cel poligenic.
Factorii genetici conteaz cu numai 50% pentru riscul
de apariie a bolii;

Terapia hemofiliei
Se confrunt cu acelei riscuri precum cea clasic
(formarea de anticorpi contra produsului insertului).
Dat fiind ca muli pacieni hemoficili sunt HIV pozitivi,
nu se pot utiliza vectorii de tip retroviral.
 Informaii suplimentare

Lentivirusurile
integrare n genomul celulelor difereniate, n interfaz-
posibilitatea exprimrii de lung durat.

Dai un exemplu de lentivirus.

Ce probleme credei c ar putea ridica utilizarea
lentivirusurilor n terapia genic?

Se studiaz vectori derivai din HIV, n ciuda riscurilor

datorate necunoaterii mecanismelor prin care se
produce integrarea lentivirusurilor n ADN gazdei.

Se studiaz vectori derivai din retrovirusuri oncogene

aviene/de la mamifere, a cror capacitate de a infecta
celulele umane i oncogenetic este documentat.
Exemple de terapie genic bazat pe vectori virali neintegrativi

Terapia fibrozei cistice cu vectori derivai din

adenovirusuri i AAV.
expresia transgenei scade rapid in vivo.
rspuns imun foarte puternic.
dozele terapeutice de vector induc inflamaii ale
esutului alveolar, cu febr, hipotensiune,
hipoxemie, formare de infiltrat pulmonar. Celulele
infectate sunt distruse, iar daunele produse sunt
comparabile cu cele datorate bolii tratate.
vectorii disemineaz n ficat.
Terapia unor boli neurologice cu ajutorul vectorilor
derivai din herpes virusuri.
Virusul herpes simplex este neurotrop, intr n laten i
poate fi reactivat de stress, raze X, traume, lumina
solar, proliferarea tumoral i ali factori.
Utilizarea unor astfel de vectori este afectat de:
inaccesibilitatea relativ a SN; care este protejat fa de
invazia viral prin bariere fizice;
necesitatea internalizrii vectorului;
heterogenitatea populaiilor neuronale, care pot reaciona
diferit la invazia viral;
Ce alte probleme credei c s-ar putea lega de utilizarea
virusului herpetic?

potenialul reaciilor inflamatorii, cu destrucie tisular;

pericolul reactivrii virusurilor, rezultnd encefalite;
pericolul invaziei esuturilor nvecinate, cu instalarea
latenei.
Riscuri ale experimentelor de terapie genic desfurate pe
subieci umani
 Boli cunoscute a fi produse de ctre vectorii propui pentru
utilizare n terapie genic sub o form alterat

retrovirusuri: vectorii virali non-integrativi :

SIDA afeciuni respiratorii i renale
necroze tisulare boli ale sistemului nervos
tumori limfomul Burkitt
boala Hodgkin
carcinom nazofaringeal
limfom cu celule T
Observaii de natur bio(logic) asupra tendinelor actuale n
terapia genic

Dup insuccesele uneori cu aspect tragic ale primelor

experimente de terapie genic s-a trecut la studii n
culturi de celule i pe animale.

Ce prere avei despre acest gen de experimente?

experimentele pe culturi de celule sunt irelevante (cuvnt

cheie: izolare)
experimentele pe animale sunt irelevante (cuvinte cheie:
rspunsuri specie specifice; timp de expunere limitat)
 Propuneri considerate mai promitoare

Terapia cu celule proprii transgenice

se cultiv celule ale pacientului;
se transfer gena n aceste celule;
se reintroduc celulele transgenice n organismul
pacientului

Ce observaii tiinifice putei aduce relativ la

aceast metod?

Nu elimin riscul:
imunogenicitii produsului genei
silenierii genei
inserrii greite a genei (potenial mutagen)
 Recomandri bioetice
existente i critica lor
Recomandri existente relativ la experimentele de terapie genic
desfurate pe subieci umani

Toate experimentele vor trebui aprobate de comitete de

etic, dup o atent evaluare a urmtoarelor elemente:

1. Raportul riscuri/beneficii, aa cum se va putea deduce

din examinarea:
disponibilitii unor alternative terapeutice clasice;
Acestea pot foarte bine s existe, dar terapia genic le face
s par demodate.
cunotinelor referitoare la potenialul de interaciune al
vectorului cu organismul gazd
Niciunul dintre vectorii propui nu a fost studiat n detaliu sub
acest aspect.
 Existena unui suport tiinific solid relativ la metoda
propus, inclusiv a unor experimente anterioare
efectuate pe animale
- Relevana experimentelor pe animale este foarte slab
Cerina apariiei unei mbuntiri semnificative a strii
de sntate a subiectului
Ct de semnificativ? (Ce nseamn semnificativ?)
2. Aspectelor legate de respectul fa de pacient,
drepturile i starea emoional a acestuia:
Obinerea consimmntului informat
Aproape c nu exist date concrete referitoare la ceea ce ar
nsemna acest gen de experimente.
Preocuparea de a nu induce false sperane
- Este vorba despre persoane cu afeciuni grave.
Tem de reflecie pentru viitoarea
dezbatere:

Ce soluie bioetic propunei, relativ la

experimentele de terapie genic?