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Mtodos

Cuantitativos
Soluciones y
Disoluciones
Parte I

Universidad Rice
Departamento de bioqumica y
biologa celular
Soluciones Peso/Peso (P/P)
La manera mas sencilla de describir
una solucin
Una solucin 1% es 1g de soluto en
100g del peso final de la solucin
Para crear: pesar soluto, pesar
solvente y mezclar
1ml. De agua pesa 1g, puede mezclar
el peso del solvente con un volumen
de agua
P/P es comnmente usado en
microbiologa
Notas del narrador
Parte I de esta serie presenta los tipos de mezclas que
pueden ser preparados y / o se encuentran en un
laboratorio biolgico, y hablaron de sus propiedades.
Se examinaron las propiedades del agua, el ms
importante biolgicos disolvente, y se describen las
calidades de agua con respecto a la calidad. Tambin
introdujo el equipamiento bsico para la solucin de la
toma de trminos y conceptos relacionados con las
frmulas, y el concepto de la mole. La segunda parte se
mostrar cmo preparar las soluciones de los tipos
comunes de las frmulas y le mostrar cmo realizar
diluciones con confianza.
Referencias
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-
Hunt. [This work is a practical student guidebook and
workbook that includes descriptions of types of formulas
and how to conduct dilutions, problem sets, and chapters on
working with cells, viruses, nucleic acids, and proteins].
Gerstein, A. (Ed.). (2001). Molecular Biology Problem Solver. John
Wiley & Sons, Inc.
Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., & Jones, A. (2003). Practical
Skills in Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice Hall.
Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice
(3rd ed.). Springer-Verlag.
Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory Methods
for Biotechnology. Prentice-Hall. [This handbook thoroughly
describes a broad range of laboratory methods and is
written at a level suitable for students. It serves as a good
general reference for laboratory techniques]
Soluciones Peso/Volumen (P/V)
Son referentes a una masa especifica en un
volumen final
Una solucin P/V significa 1g de soluto diluido
en 100 ml. de solvente
100%=100g/litro (g/l)=
1000g=1000ml.=1g/1ml.
0.85% de NaCl puede ser 0.85g en 100 ml.
Cuando describimos una operacin de concentracin como un porcentaje sin especificar el tipo de frmula,
que implica que la solucin es hacerse con el peso en volumen (w / v) el mtodo. Al igual que con w / w, el peso
en volumen es un tipo simple de la frmula para describir la preparacin de una solucin de material slido en
un solvente lquido. Este mtodo puede ser usado para describir cualquier solucin, pero es comnmente
utilizado para las soluciones salinas simples y cuando el peso frmula del soluto se desconoce, variable, o
irrelevantes, que a menudo es el caso con tintes de complejos, enzimas y otras protenas. Soluciones que
requieren de materiales procedentes de fuentes naturales a menudo estn dispuestos w / v, porque la frmula
molecular de la sustancia es desconocida y / o porque la sustancia no puede ser descrito por una frmula nica.

Una solucin por ciento se define como 1 gramo de soluto por 100 mililitros de volumen final. Por ejemplo, 1
gramo de cloruro de sodio, llev a un volumen final de 100 ml con agua destilada, es una solucin de NaCl al
1%. Para ayudar a recordar la definicin de una solucin al 1%, recuerde que un gramo es la masa de un mililitro
de agua. La masa de un soluto necesarios para hacer una solucin al 1% es de 1% de la masa de agua pura del
volumen final deseado. Ejemplos de soluciones 100% son 1000 gramos en 1000 mililitros o 1 gramo en 1
mililitro.

Hagamos un 0,85% de solucin de cloruro de sodio, una solucin salina fisiolgica a menudo llamado por la
combinacin de 0,85 g de NaCl en un volumen final de 100 ml de agua de alta calidad. Podemos tener un uso
de esta solucin, porque los iones sodio y cloro son los principales iones inorgnicos en la sangre de los
vertebrados. Esto significa que son los principales iones inorgnicos en el lquido en los tejidos que rodean
nuestras clulas. La concentracin de NaCl en sangre es de aproximadamente 0,85%, por lo que si estamos
trabajando con los rganos, tejidos o clulas, se utiliza este tipo de soluciones (a menudo con otros
componentes en menor concentracin) para mantener las membranas celulares del deterioro y mantener un
entorno neutral osmticamente .

Soluciones que utilizamos para los rganos, clulas y tejidos en general, ser alta en sodio, ya que el sodio es el
principal catin entre los electrolitos en el lquido extracelular, el lquido que se encuentra fuera de las clulas.
Soluciones que usamos para orgnulos son a menudo ricos en potasio, ya que el potasio es el electrolito
catinico principal en el citoplasma.
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt.
[This work is a practical student guidebook and workbook that
includes descriptions of types of formulas and how to conduct
dilutions, problem sets, and chapters on working with cells, viruses,
nucleic acids, and proteins].
Gerstein, A. (Ed.). (2001). Molecular Biology Problem Solver. John Wiley
& Sons, Inc.
Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., & Jones, A. (2003). Practical Skills in
Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice Hall.
Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice (3rd
ed.). Springer-Verlag.
Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory Methods for
Biotechnology. Prentice-Hall. [This handbook thoroughly describes a
broad range of laboratory methods and is written at a level suitable
for students. It serves as a good general reference for laboratory
techniques]
Ejemplo: Preparar 2 litros de
NaCl al 0.85%
0.85% P/V es agregar 0.85g por
100ml. De solvente
2 litros es 20 X 100ml.
La cantidad a pesar es 20 X0.85 =
17g
Obtenerla en matraz
Agregar agua destilada al matraz
sobre el NaCl.
Con el 1% se define como 1 gramo por cada 100 ml, 0,85% es de 0,85
gramos por cada 100 ml. Desde dos litros es 20 veces el volumen de 100
ml, necesitamos 20 gramos x 0,85, o 17 gramos de NaCl. Para esta cantidad,
podemos utilizar un equilibrio de carga superior o incluso un balance del
viaje.
Una balanza electrnica tpico tiene una precisin de centsimas de gramo,
que es lo suficientemente preciso para pesando 17 gramos. Primero "tara"
el instrumento al colocar un peso en barco sobre la cacerola y la creacin a
"cero". No queremos contaminar nuestras poblaciones de qumica, de
modo que sea limpiar la esptula o una cuchara antes de sumergirla en un
recipiente, o simplemente agitar la sustancia qumica a cabo en el barco.
Supongamos que toque a 16,97 gramos de NaCl. Habra que llegar a la
molestia de que duran 0,03 gramos? No, estamos bastante cerca. Si era
necesario para ser ms exactos, diramos que la frmula es algo as como
0,846% de NaCl, o tal 0,8495%. Si hay alguna ventaja de ser tan precisa, se
debe ejercer de precisin. De lo contrario, tratando de ser demasiado
precisos slo una prdida de tiempo.
Recuerde cmo utilizar cifras significativas? Diecisiete gramos significa ms
de 16,5 gramos y menos de 17,5 gramos. Si quisiramos ser ms exactos
deberamos escribir "17.0" gramos, es decir, mayor que o igual a 16,95
gramos y menor o igual a 17,05 gramos.
Farone, M.B. & Farone, A.L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt.
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Soluciones Volumen/volumen
(V/V)
Es mezclar lquidos compatibles por
volumen
Salvo que el agua es tomada como
el solvente menos especifico
Se usa tpicamente cuando diluyes
soluciones stock, por ejemplo el
alcohol
Etanol al 70%=0.7 L. de etanol puro
en un volumen final de un litro
De volumen en volumen es otra forma comn de describir una solucin.
Nosotros simplemente describir el por ciento del volumen total aportado
por el soluto lquido. Al igual que con los otros tipos de frmulas utilizadas
en la biologa, suponemos que el solvente es el agua a menos que se
especifique de otro disolvente.
V / V a menudo se utiliza para describir las soluciones de alcohol utilizados
en la histologa o para trabajar con las protenas y cidos nucleicos. Por
ejemplo, el 70% de etanol no es ms que 70 partes de etanol puro
mezclado con agua para hacer un total de 100 partes. Para hacer un litro
de solucin de este tipo que se iniciara con 0,7 L de etanol absoluto y
llevar el volumen final a 1 litro con agua. Ms a menudo, podemos
encontrarnos con un 95% de alcohol. Para hacer una solucin de 70% a
partir de un 95% de solucin de valores requiere un clculo poco ms.
Hablaremos de eso ms tarde, cuando hablemos de cmo hacer
diluciones.
Decoloracin de los geles de protenas se refiere a la inmersin de un gel
teido en alcohol acidificado para eliminar todos los tintes que no est
unido a protenas, lo que revela las bandas. Una solucin decolorante til
consiste en un 7% de metanol y cido actico al 10%. Esto significa que
con 100 ml de puro (o "glacial") de cido actico y 70 ml de metanol por
litro de solucin final.
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions.
Kendall-Hunt. [This work is a practical student guidebook
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Gerstein, A. (Ed.). (2001). Molecular Biology Problem Solver.
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Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., & Jones, A. (2003). Practical
Skills in Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice
Hall.
Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice
(3rd ed.). Springer-Verlag.
Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory
Methods for Biotechnology. Prentice-Hall. [This handbook
thoroughly describes a broad range of laboratory methods
and is written at a level suitable for students. It serves as a
good general reference for laboratory techniques]
Molaridad
Define soluciones por la
concentracin de molculas en vez
de la masa
Mas universal que P/V
til cuando proporciones especificas
de molculas son necesitadas, o
cuando las soluciones tienen
diferentes formas
El peso molecular o formula de peso
de la sustancia debe ser conocido
Una desventaja de las frmulas que describen como w / v (%) es que la descripcin
no dice nada sobre la concentracin real de las molculas en solucin. Qu pasa si
queremos cantidades iguales de dos productos qumicos que se mezclan, de manera
que por cada molcula de la sustancia # 1 hay una sola molcula de la sustancia #
2? La misma cantidad en gramos probablemente no va a contener el mismo
nmero de molculas de cada sustancia.
Otra desventaja de la w / v mtodo es que el mismo producto qumico puede venir
en muchas formas, y un gramo de una sustancia qumica de una forma puede
contener una cantidad diferente de la sustancia qumica de un gramo de otra forma.
Imagnese trabajar con un producto qumico que puede utilizarse en varias formas
de hidratacin. Por ejemplo, el cloruro de calcio (CaCl2), se puede adquirir como
un producto qumico seco en forma anhidra, de modo que lo que pese a cabo es
casi todo el cloruro de calcio puro. Por otra parte, usted puede tener un stock de
producto qumico en polvo que se hidrata con siete molculas de agua por
molcula de CaCl2. La misma masa de este producto qumico en el presente
formulario contendr menos molculas de cloruro de calcio que en forma anhidra.
Dado que con frecuencia quieren saber la concentracin real de las molculas de
una sustancia en solucin, que a menudo es mejor tener una medida universal que
funciona independientemente de cmo se suministra la sustancia qumica. Mientras
que el peso molecular (a veces llamado peso frmula) es conocido, podemos
describir una solucin en forma de moles por litro, o, simplemente, molar (M).
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions.
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Reed, R., Holmes, D., Weyers, J., & Jones, A. (2003). Practical
Skills in Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice
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Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice
(3rd ed.). Springer-Verlag.
Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory
Methods for Biotechnology. Prentice-Hall. [This handbook
thoroughly describes a broad range of laboratory methods
and is written at a level suitable for students. It serves as a
good general reference for laboratory techniques]
Preparacin de soluciones M/L
Determinar el volumen que se necesita
expresado en litros
Determinar la concentracin deseada, en moles
por litro
Determinar el peso molecular del soluto
Multiplicar el peso molecular por la
concentracin deseada, para obtener peso por
litro
Mezcla con el disolvente tal como se describe
anteriormente, quedando la solucin final con el
volumen deseado.
The first step in the preparation of any solution is to decide how much to
make. To simplify the calculations, express the desired volume in liters. For
example, if you want to prepare 200 milliliters of a solution, express the
volume as 0.2 liter.
Your formula may describe the concentration in moles per liter. For
example, 0.25M means 0.25 moles/liter. It may call for a millimolar (mM)
solution, a micromolar (M) solution,a nanomolar (nM) solution, or even a
picomolar (pM) solution. One mM, one m, one nM, and one pM are
1/1000, 1/1,000,000, 1/1,000,000,000, and 1/1,000,000,000,000 mole/liter,
respectively. Whatever prefix is used to describe the desired molar
concentration, it is easier to do the calculation by converting the
concentration to moles/liter. For example, 25 M can be expressed as
0.000025M, or 2.5 x 10-5M.
If you know the desired concentration in moles/liter and the formula
weight of the substance, you can multiply these numbers and obtain mass
per liter (moles/liter X grams/mole = grams/liter). And if you know the
volume you need in liters, you then can multiply mass per liter times the
desired volume to figure the amount to weigh (grams/liter X volume in
liters = grams to weigh).
Remember that extreme precision is seldom either necessary or practical.
It usually is good enough to get the actual concentration to within 1% of
the desired concentration.
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt.
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Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice (3rd
ed.). Springer-Verlag.
Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory Methods for
Biotechnology. Prentice-Hall. [This handbook thoroughly describes a
broad range of laboratory methods and is written at a level suitable
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Trabajando con las formulas de peso
El peso molecular = al peso en gramos de una
mol de una sustancia
La formula de peso es mayor que o igual al
peso molecular, dependiendo de cmo esta
preparado el peso
La solucin preparada con la formula de peso
ser el mismo independientemente del edo.
De hidratacin del material
Al igual que con w / v soluciones, nos Pesar una cantidad especfica de productos qumicos al
tomar una solucin molar. A diferencia de w / v soluciones, la cantidad de peso depende del
peso molecular (MW) de la sustancia en gramos por mol (g / mol). Para calcular la masa de
soluto deseado, necesita conocer el peso de frmula. Pesos frmula generalmente estn
impresos en la etiqueta y el identificado por la sigla FW Peso molecular es la masa de
material en gramos que contiene un mol de sustancia. Puede incluir materiales inertes y / o
la masa de las molculas de agua, en el caso de los compuestos hidratados. Para los
compuestos puros, el peso frmula es el peso molecular de la sustancia y puede ser
identificado como tal.
Por ejemplo, el peso molecular del cloruro de calcio es de 111,0 gramos por mol (g / mol),
que es el mismo que el peso de la frmula si el material es anhidro. Cloruro de calcio (CaCl2
2H2O) es 147,0 g / mol. El peso frmula de CaCl2 6H2O (hexahidratado) es 219,1 g /
mol.
Un compuesto hidratado es un compuesto que est rodeado por molculas de agua
mantienen en su lugar por puentes de hidrgeno. Las molculas de agua en un compuesto
hidratado a formar parte de la solucin cuando se disuelve el material. Por lo tanto, 111,0
gramos de CaCl2 anhidro, 147,0 gramos de CaCl2 dihidratado, o 219,1 gramos de CaCl2
hexahidratado en un litro de volumen final de todos los productos a 1 mol por litro solucin,
abreviado 1M.
Suponga que usted necesita un litro de una solucin de cloruro clcico al 10 mm (10
milimolar, o un 0,01 moles por litro), y usted slo tiene dihidrato CaCl2. Para hacer su
solucin de 10 mm, se pesarn 1 / 100 del peso frmula para CaCl2 dihidratado, que es de
0,01 x 1,47 = 147,0 gramos y llevarlo a un litro.
Farone, M. B. & Farone, A.L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt.
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Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice Hall.
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Complicaciones de la formula
de peso
La formula de peso puede ser
desconocida
El material puede ser no puro
El material puede ser higroscpico
Tal vez usted no puede encontrar una frmula de peso en la etiqueta, o quizs usted est planeando un
protocolo y no tienen los productos qumicos reales en la mano. Se puede calcular el peso molecular de la
frmula qumica con la ayuda de una tabla peridica. Hay que tener en cuenta a la hora de comprar el producto
qumico que el peso de la frmula no puede ser idntica a la del peso molecular. Supongamos que usted ya ha
determinado cunto pesarn, basado en el peso molecular, pero el peso frmula es mayor debido a la
hidratacin o la presencia de material inerte. Su nico recurso es simplemente para multiplicar su masa
calculada por la proporcin entre el peso frmula para el peso molecular (o, simplemente, volver a calcular el
peso necesario).
Por ejemplo, supongamos que usted necesita 10 gramos de CaCl2 puro (MW 111,0 g / mol), pero descubri
que todo lo que tiene es la forma hexahidratado (CaCl2 6H2O, FW 219,1 g / mol). Tome 219,1 dividido por
111,0 y multiplicar por 10. Necesitas 19,7 gramos de CaCl2 6H2O.
Los materiales no siempre estn disponibles en 100% puro. La descripcin de la etiqueta puede indicar que el
producto qumico es> 99% de pureza. Este suele ser el caso de enzimas y otras protenas que debe ser
purificado a partir de fuentes naturales. La mayora de nosotros no te preocupes por la pureza si es superior a
99%. Una mayor precisin podra ser importante para anlisis qumico, por ejemplo, pero rara vez es necesario
en aplicaciones biolgicas. Si hay impurezas significativas o si te empeas en ser tan precisos como sea posible, a
continuacin, calcular la cantidad de material que necesita y se dividen por la fraccin que representa la pureza
de la sustancia. Por ejemplo, si usted necesita 10 gramos de una sustancia pura, pero lo que tenemos es el 95%,
y luego dividir 10 gramos por 0,95 para obtener 10,5 gramos (nota de que el resultado ha sido redondeado a
un nivel razonable de precisin).
La mayora de los productos qumicos tienden a absorber el agua a menos que se encuentren desecado, es
decir, hasta cierto punto, son higroscpicas. Este problema no debe confundirse con el estado de hidratacin,
que se refiere a la asociacin directa de molculas de agua con molculas de la sustancia a travs de puentes de
hidrgeno. Cloruro de magnesio se utiliza comnmente en buffers biolgicos, y es notablemente higroscpica.
El peso frmula no incluye la masa aadida de agua que se absorbe de la atmsfera. De hecho, la cantidad de
contaminacin depende de cunto tiempo y bajo qu condiciones el producto qumico ha sido dejado de lado,
especialmente con respecto a la humedad.
Por lo general no es prctico para preocuparse por el contenido de agua, ya que es tan difcil de controlar. Si la
precisin es fundamental, a continuacin, los productos qumicos deben mantenerse en la desecacin
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt.
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Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice Hall.
Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice (3rd ed.).
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Ejemplo: preparar 200ml. De sacarosa al
70 mM
Quieres preparar 200ml. Entonces son 0.2 L
La concentracin es de 70 mM, entonces es 0.07M
La formula de peso de sacarosa es de 342.3g/mol
Amt./litro= (342.3)(0.07)=23.96 gramo/litro
La cantidad necesaria es 0.2L X 23.96 g/L=4.792
2 digitos es necesarios para precisar
Peso es de 4.8g
Suponga que usted necesita 200 milliters de una solucin de 70 mm
de sacarosa. Doscientos mililitros es 0,2 l, y 70 mm es 0.07M. El
peso molecular de la sacarosa, puede determinarse a partir de su
frmula qumica, es decir, C12H22O11, y los pesos atmicos de
carbono, hidrgeno y oxgeno. El peso de la frmula de la sacarosa
es idntica a su peso molecular, es decir, 342,3 gramos por mol. Una
solucin 1M consistira en 342,3 gramos de sacarosa en un litro de
volumen final.
Una concentracin de 70 mm es el mismo que 0,07 moles por litro.
Multiplique 0,07 moles / litro de 342,3 gramos por mol y se obtiene
23,96 gramos necesarios por litro. Para hacer 200 mililitros de la
solucin, se multiplican gramos / litro de litros necesarios. Desde
200 mililitros es 0,2 l, multiplicar 23,96 gramos de 0,2 l para
obtener los 4,792 gramos necesarios. Desde el tpico Top Electronic
carga masiva muestra equilibrio con una precisin de 0,01 gramos,
la cantidad que se pesarn deben redondearse a 4,79 gramos,
aunque es perfectamente aceptable y quizs incluso preferible
redondear a 4,8 gramos.
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Biomolecular Sciences (2nd ed.). Pearson/Prentice Hall.
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Molaridad y Normalidad
La molaridad se refiere al No. De moles por
unidad de mas, usualmente es usada
Normalidad se refiere al No. De equivalentes
por unidad de volumen
Normalidad no puede ser algn mltiplo de la
molaridad
Normalidad es usada cuando se habla de
cidos y bases
Yo nunca he preparado una solucin de una frmula de molar. Molalidad se refiere a un
nmero de moles por kilogramo de disolvente (disolvente puro, es decir, no el total de
kilogramos de la solucin). Molalidad es til cuando la preocupacin es el efecto de un
soluto en las propiedades fsicas de una solucin, especialmente en el punto de ebullicin o
punto de congelacin. Tenemos algunas aplicaciones para las frmulas de molares en la
biologa. Si encuentra una frmula de molares, las normas para la preparacin de una
solucin molar de aplicacin. Sin embargo, se deber sustituir moles por gramo de la
solucin completa para moles por el volumen final.
La normalidad se refiere al nmero de moles de un nmero de soluto (equivalentes), en
relacin con algn producto. En estos das, la normalidad es la ms utilizada para describir las
concentraciones de cidos y bases. Hidrxido de sodio (NaOH) se utiliza comnmente para
hacer que las soluciones biolgicas ms alcalino. Un mol de NaOH se disocia para producir
un mol de iones hidroxilo. Por lo tanto, hay un equivalente de NaOH por mol de NaOH. Un
mol de HCl se disocia para producir un mol de iones de hidrgeno, por lo que es un
equivalente de HCl por mol.
Por otro lado, el cido sulfrico (H2SO4) libera dos moles de iones de hidrgeno por mol
en la disociacin. Por lo tanto, hay 2 equivalentes de cido sulfrico por mol.
El nmero de equivalentes depende de la reaccin qumica de preocupacin. Si el cido
sulfrico reacciona con otra sustancia qumica para producir agua, por ejemplo, un mol de
cido sulfrico sera uno equivalente, ya que una molcula de agua requiere de dos iones de
hidrgeno. En una reaccin similar, un mol de HCl sera 1 / 2 equivalente. Las soluciones
normales son preparados como se preparan las soluciones de molar, excepto que la
concentracin molar se refiere a la concentracin de grupos reactivos, no de la del
compuesto original.
Farone, M. B. & Farone, A. L. (1999). Dilution Solutions. Kendall-Hunt.
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dilutions, problem sets, and chapters on working with cells, viruses,
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Gerstein, A. (Ed.). (2001). Molecular Biology Problem Solver. John Wiley
& Sons, Inc.
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Seidman, L. A. & Moore, C. J. (2000). Basic Laboratory Methods for
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broad range of laboratory methods and is written at a level suitable
for students. It serves as a good general reference for laboratory
techniques]

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