Depto Cs.

Preclnicas
Facultad Medicina
Microbiologa II - MPC 416

CASO CLNICO 2
MICROBIOLOGA II 2017
T U TO R :
A L E J A N D R O C U E VA S

INTEGRANTES:
P E D R O G A E P I C R I S T I A N G M E Z DAV I D G O N Z L E Z J AV I E R A J A R A
N ATA L I A J O R Q U E R A F A B I A N L E O N E L L I V I C E N T E L I N C O Q U E O
K I M B E R LY M E L L A D O PA U L A M U O Z
 Escenario 1:
Varn 46 aos edad hospitalizado en el Hospital Regional de
Temuco, padece de leucemia mieloide aguda M5.
Ha desarrollado neutropenia severa (recuento < 100
neutrfilos/mm3).
Luego de 11 das haber iniciado su quimioterapia present un
cuadro febril, recibiendo tratamiento ceftriaxona, ceftibuteno,
amikacina, metronidazol y fluconazol.
Pese al tratamiento, se mantuvo febril, presentando cefalea
frontal persistente, acompaada de rinorrea purulenta.
Se realiz tomografa de cavidades paranasales y aseo quirrgico,
obteniendo muestra para biopsia. Se agreg anfotericina B
deoxicolato y vancomicina al tratamiento.
 Escenario 2:
Anatoma patolgica informo probable infeccin por
hongo gnero Aspergillus.
Una nueva tomografa de CPN constat velamiento
pansinusal, se decide cambiar anfotericina B por
caspofungina.
Aparicin de lesiones cutneas en las
extremidades inferiores, redondeadas, de 1 a 4 cm de
dimetro, color violceo, con centro necrtico y
borde eritematoso, tipo ectima gangrenoso, con
progresin a tronco y extremidades superiores.
 Desde una de las lesiones se obtuvo una muestra y se envia al laboratorio de
microbiologa.
El examen microscpico de aspirado cutneo mostr conidiforos cortos, solitarios con
monofilides , macrocondios fusiformes y septados, microcondios abundantes,
elipsoides y cilndricos, generalmente no septados, y clamidoconidios terminales o
intercalares correspondiendo a Fusarium oxysporum.
OBJETIVOS ESCENARIO 1 Y 2
1. Describir micosis oportunistas y sistmicas.
2. Describir factores de virulencia, mecanismos de patogenicidad, cuadros
clnicos y respuesta inmune del hospedero frente a hongos filamentosos.
3. Caracterizar Aspergillus fumigatus y Fusarium oxysporum.
4. Describir antifngicos del caso (nombres de antifungucos).
5. Describir pruebas de diagnsticas para micosis oportunistas.
6. Describir tcnicas de laboratorio empleadas en la determinacin in vitro de la
susceptibilidad frente a antimicticos.
1. DESCRIBIR MICOSIS
OPORTUNISTAS Y SISTMICAS
 MICOSIS OPORTUNISTAS
Termotolerantes y tienen la
Infecciones por hongos que Factores que aumentan
propiedad de presentar
viven normalmente como incidencia:
cambios bioqumicos y
saprobios en el ambiente o en
morfolgicos en contacto con anomalas de la inmunidad y
cavidades naturales de seres
personas que tienen defectos alteraciones de la fagocitosis.
humanos
en sus mecanismos de defensa.

Mortalidad de 10-50% en Ms comunes:

neutropnicos o con trasplante
de mdula sea.
Puede ser causa de
enfermedades intrahospitalaria
Candida spp. Ultimamente han aparecido
otros organismos
Aspergillus spp. como nuevos patgenos,
Cryptococus neoformans, ejemplo; Fusarium spp.
Zygomycetes
2. DESCRIBIR FACTORES DE VIRULENCIA,
MECANISMOS DE PATOGENICIDAD, CUADROS
CLNICOS Y RESPUESTA INMUNE DEL HOSPEDERO
FRENTE A HONGOS FILAMENTOSOS

Rhizopus Fusarium Aspergillus

 RHIZOPUS
Micosis oportunistas del orden Mucorales
Es cosmopolita y poco frecuente.
Caractersticas Rhizopus oryzae (R. arrhizus)
Neutropenia (hsped)

Utilizacin de hierro libre o siderforos (predileccin por

Factores de diabticos cetoacidticos)
Virulencia y Activo sistema enzimtico cetoreductasa
mecanismos de Esporas miden 3-11 m de dimetro (suficientemente pequeas
patogenicidad para evadir mecanismos de defensa de vas respiratorias
superiores).

Primera lnea de defensa: epitelio ciliado de los bronquios.

Respuesta del Segunda lnea de defensa: macrfagos alveolares, clulas
hospedero mononucleares y neutrfilos (lisis de esporas mediante
reconocimiento de receptores tipo Toll-2)

Fiebre (51%)
Afeccin al SNC es muy rara, curso mortal de 3 a 10 das.
Cuadro clnico Rinocerebral (39%), pulmonar (24%), cutnea (19%) y
gastrointestinal (3%)
4. CARACTERIZAR ASPERGILLUS FUMIGATUS
Y FUSARIUM OXYSPORUM .

Aspergillus Fusarium
A. flumigatus F. solani
A. niger F. oxysporum
A. flavus
 A. fumigatus es la especie ms virulenta.

Puede causar enfermedad pulmonar alrgica o

invasiva, aspergiloma, diseminarse al SNC u otros
rganos o localizarse, como en otomicosis y
queratitis.

En personas inmunodeficientes es sistmica y mortal

con una tasa de mortalidad extremadamente
alta (30-95%).
ASPERGILLUS

(Arenas, 2014)
Aspergilosis pulmonar crnica (CPA) Asma grave con sensibilizacin por hongos (SAFS)
Aspergilosis pulmonar necrotizante crnica (CNPA) Aspergilosis broncopulmonar alrgica severa (ABPA)

(van de Veerdonk, Gresnigt, Romani, Netea & Latg, 2017)

(van de Veerdonk, Gresnigt, Romani, Netea & Latg, 2017)
Las hifas de A. fumigatus pueden formar una matriz extracelular que pega las hifas juntas en un biofilm

(van de Veerdonk, Gresnigt, Romani, Netea & Latg, 2017)

 Respuesta inmune contra
Funcin fundamental
Aspergillus fumigatus Macrfagos son la primera lnea de defensa
Inmunidad contra los conidios.
innata

Proporcional
Mediada por linfocitos Th1 Respuesta Disfuncin Germinacin de esporas y
inflamatoria celular produccin de hifas

Reconocimiento de
Receptores
antgenos reconocer
Activacion
Complemento
PAMS Quimiotaxis de neutrfilos,
Toll like tipo 1 destruccin celular, mediante ROS
Lectina 1

Inhibicin Inhibicin del desarrollo de conidios

Lactoferrina

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Factores de virulencia
http://inmunologia.eu/microbios-patogenos-y-enfermedad/aspergillus-fumigatus
 CULTIVO.
El cultivo se realiza en los medios habituales sin cicloheximida agar Sabouraud
25 a 37 C.
Las colonias crecen rapido (en 3 a 4 dias).

MORFOLOGA MACROSCPICA.
Col onias b l ancas y p l an as al i n i c io ve rd e az u l ad o a gr i s al m ad u r ar.
Mi ce l i o ve ge t ativo o re p ro d uctor : b l an c o m ar f i l
Te x t ura e s at e rc io pe lad a o p u l ver ule nta

http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/mod/page/view.php?id=100812
MORFOLOGA MICROSCPICA.
Hifas
Hialinas,
Septadas,
Relativamente anchas,
Con paredes paralelas,
Ramificadas en 45

Conidiforo
Paredes lisas
No septado
(cenocticos)

Vescula
Forma de ampolleta

Filides
Uniseriada
Forma de botella.
Conidios
(Bonifaz, 2012)
Forman una columna
sobre la filides
 FUSARIUM OXYSPORUM

50 especies F. oxysporum Mecanismos Mecanismos Clnica

dentro del cosmopolita de infeccin de infeccin En humanos
gnero saprfito del Inhalacin de Por va cutnea: causan
Fusarium suelo conidias en el onicomicosis, infecciones
patgeno de paciente celulitis en localizadas o
F. solani plantas y predispuesto, relacin con sistmicas.
F. oxysporum bacterias causan quemaduras,
F. verticillioides En humanos: infeccin infeccin del
patgeno pulmonar. catter
oportunista
emergente
FUSARIUM OXYSPORUM
Factores de riesgo Factores de virulencia
Neutropenia Produccin de micotoxinas (tricotecenos)

Inmunodeficiencia de celulas T Fumomisinas

Transplantados Moniliformina

Inmunocomprometidos Fusarocromanona

Leucemia

Altas dosis de cortocoides

DIAGNSTICO
Caractersticas Colonia
Agar
macroscpicas Saboraund

Condiciones 25 30C 5 a 6 das

crecimiento

Lanosa -
Aspecto aterciopeladas
algodonosa

Color Blanco Grisceo

Pigmento Caf Rosado

Caractersticas Hifas
Macro y
miroscpicas microconideas

Azul de
Tincin KOH
lactofenol (?)

Hialinas y Mono o
Hifas septadas polifilide

Solas o
Micronideas Unicelulares
racimos

Septadas (n
Microconideas Fusiformes
septos)
 CLASIFICACIN DE ANTIFUNGICOS
Por estructura

Polienos Nistatina, natamicina, anfotericina B

Sitio de accin en el hongo

Imidazol: miconazol, clotrimazol Antifngicos interactuando en

Triazoles: fluconazol, itraconazol, pared celular
Azoles ketoconazol Lipopptidos
Triazoles de segunda generacin:
voriconazol, ravuconazol, posaconazol

Alilaminas Terbinafina, naftifina Antifngicos interactuando en

membrana celular
Papulacandinas Polienos, azoles, alilaminas
Triterpenos glicosilados
Lipopptidos Equinocandinas: caspofungina,
anidulofungina, micafungina

Pirimidinas Antifngicos
Flucitosina
fluoradas interactuando en ncleo
Pirimidinas fluoradas
Yoduro de potasio, ciclopirox, tolnaftato,
Otros griseofulvin
Susceptibilidad

FLUCONAZOL: Candida
albicans y otras especies.
Cryptococcus,
Histoplasma,
Blastomyces,
dermatofitos, entre otros.

ANFOTERICINA B
DEOXICOLATO:
Aspergillus,Candida,
Histoplasma, entre otros.

CASPOFUNGINA:
Candida y Aspergillus
6. DESCRIBIR PRUEBAS DE DIAGNSTICO
PARA MICOSIS OPORTUNISTAS
Su identificacin se basa principalmente en el estudio de los caracteres
morfolgicos, macroscpicos y microscpicos, del hongo en cultivo.

Obtencin y Cultivo Agar

Examen directo
preparacin muestra Sabouraud glucosa
PRUEBAS SEROLGICAS
Polisacarido
termoestable

Especificidad
Correlacin
de 97.5-99%
con
sensibilidad de
proliferacin
92.1-94%

Deteccin de
Galactomanano

0.8 ng/ml o
dos resultados
Inmunoensayo
consecutivos
de 0.5 ng/ml

Diversas
Es recomendable hacer
muestras determinaciones seriadas para
aumentar la especificidad
7. DESCRIBIR TCNICAS DE LABORATORIO EMPLEADAS EN
LA DETERMINACIN IN VITRO DE LA SUSCEPTIBILIDAD
FRENTE A ANTIMICTICOS.

Mtodos estandarizados:
- CLSI
- EUCAST

Mtodos comerciales
- Etest
- Vitek 2
 M TO D O S
E S TA N DA R I Z A D O S
M27-A3

Mtodo de macro y microdilucin para levaduras. Medio de cultivo RPMI pH 6,9 - 7,1.
Tampn cido mofolino propano sulfnico (MOPS) a una concentracin 0,164 moles/litro
Inculo entre 0,5x103 y 2,5x103 UFC/ml con un tiempo de incubacion variado en cada
especie.

M38-A

Mtodo de macro y microdilucin en caldo para hongos filamentosos.

M44-A

Mtodo de difusin en disco para levaduras. Agar Mueller Hinton + 2% glucosa + 0,5
mg/ml azul de metileno, pH 7,2 7,4 Inculo 0,5 McFarland (1-5 x 106 UFC/ml) Tiempo y
temperatura 35 C durante 20 a 24 h.

AFST-EUCAST

Modificacin del mtodo de microdilucin M27 del CLSI, que sirve para determinar la
sensibilidad a los antifngicos de las levaduras mediante espectrofotometra y
reduciendo tiempos de incubacin para obtener resultados
MTODOS DE DILUCIN EN CALDO PARA HONGOS
FILAMENTOSOS

(Bonifaz, 2012)
MTODO DE DIFUSIN EN DISCO PARA HONGOS FIL AMENTOSOS NO
DERMATOFITOS

(Bonifaz, 2012)
 M TO D O S C O M E R C I A L E S
EXISTENTES EN CHILE

Vitek 2 Etest
Permite determinar CIM
Asociado a el mtodo de
mediante una
microdilucin mediante
tira impregnada con un
lectura fotomtrica permite
gradiente de concentracin
determinar la CIM, est
del antifngico. Buena
asociado mayormente a
concordancia con los
levaduras.
mtodos de microdilucin

Las dificultades de los mtodos de susceptibilidad

para obtener puntos de corte recaen en los
requerimientos para el crecimiento de las especies
fngicas.
CONCLUSIN

Dentro de micosis oportunistas se encuentra una diversidad de gneros siendo los ms

frecuentes Candida spp, Cryptococcus neoformans, Aspergillus spp, Zygomicetes, se han caracterizado
por presentar factores predisponentes, y manifestaciones clnicas similares dificultando el
diagnostico diferencial , por tanto comprometiendo el tratamiento. Adems en las ltimas
dcadas se ha observado un aumento de las infecciones fngicas oportunistas, en especial en
pacientes inmunocomprometidos, con enfermedades de base severas, terapias y
hospitalizaciones prolongadas, provocando un riesgo de generar infeccin fngica sistmica por
lo que han emergido como una importante causa de morbi-mortalidad.
BIBLIOGRAFA
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