Universidad Autnoma Benito Jurez

de Oaxaca

Facultad de Ciencias Qumicas

Lic. QUMICO FARMACUTICO BILOGO

CATEDRTICO:
Q.B. ERIK MARTNEZ TORRES

MATERIA:
BIORREMEDACIN DE AGUAS
Los efluentes industriales que contienen Cr (VI) son descargados
por industrias qumicas, de construccin de maquinarias e
instrumentos, de radio electrnica, entre otras.

La concentracin de Cr (VI) varia en los efluentes desde docenas

hasta cientos de gramos o miligramos.

La cantidad de aguas contaminadas con cromo que se vierten al

ambiente varia de docenas a cientos de metros cbicos por hora.

Las concentraciones internacionalmente mximas

permitidas(MAC) en el ambiente son 0.1 mg/L de Cr(VI) y 0.5 mg/L
de Cr (III).

Las aguas residuales son materiales derivados de la actividad

industrial y de los residuos domsticos, los cuales por razones de
salud pblica no pueden ser vertidos a los cursos de aguas
corrientes o lagos.
Las variaciones en cuanto al volumen de los residuos y a la
concentracin de la carga contaminante se presentan de acuerdo a
la materia prima procesada y a la tecnologa empleada.

El cromo en la etapa de curtido, es uno de los contaminantes que

produce impactos negativos en el crecimiento del pas ya que
compromete la salud humana , daando los procesos ecolgicos
que sostienen la produccin de alimentos .

Existen referencias sobre el cromo que indican que es un metal

pesado que funciona qumicamente con distintas valencias:
bivalente, trivalente y hexavalente siendo este ultimo de gran
importancia por su alto poder toxico.

El cromo trivalente y el hexavalente en particular es un

desnaturalizador de protenas y precipitante de los cidos
nucleicos ; adems , es considerable la accin cancergena de los
cromatos sobre el pulmn y el tubo digestivo.
El Cr(VI) por ser un poderoso oxidante de sustancias orgnicas ,
es peligroso para los organismos vivos y para la salud humana .

El acido crmico y los cromatos pueden producir intoxicaciones

accidentales agudas por va digestiva. El envenenamiento agudo
por ingestin produce vrtigo, sed intensa, dolor abdominal, vomito,
choque y oliguria o anuria. La muerte se produce por uremia.

La inhalacin de vapores de cromo por largos periodos, causa

ulceracin indolora, hemorragia y perforacin del tabique nasal,
acompaado de secrecin nasal ftida.

El cromo y los cromatos son irritantes y destructores para todas

las clulas del organismo.

En la biorremediacion los iones de cromo no son destruidos por

procesos microbianos , sin embargo, la molcula que contiene el
metal puede ser modificada , inmovilizada, o destoxificada
conduciendo a una apreciable o en algunos casos completa
remediacin del ambiente contaminado.
Las principales vas por las cuales se lleva acabo esta biorremediacion
incluyen biosorcion, bioacumulacion, reduccin, solubilizacion ( asociada
comnmente con la oxidacin de sulfuros o ion ferroso), precipitacin y
mutilacin.

Son muchos los microorganismos que pueden llevar a cabo la reduccin de

metales como As, Pb, Cu, Bi, Se, Te, Va, Mn, Fe, Ag, Au, Hg y Cr, mediante la
reduccin convierten un alto estado de oxidacin del elemento a un estado de
oxidacin menor.

Entre los microorganismos capaces de reducir iones metlicos existe una

gran variedad de gneros y las transformaciones las llevan acabo de acuerdo a
su capacidad fisiolgica, algunos lo hacen mediante reacciones enzimticas,
mientras que otros lo hacen mediante la excrecin de un compuesto reductor
que convierte abiticamente el ion de un alto estado de oxidacin a uno menor.

Es ampliamente conocido que las bacterias en cultivo pueden reducir

cromatos y dicromatos, estas bacterias estn ampliamente listas para ser
aisladas del suelo, sedimentos y aguas contaminadas se han reportado
especies de Alcaligenes, Bacillus, Corynebacterium, Enterobacter, Escherichia,
Micrococcus, Pseudomonas, Vibrio, entre otras con capacidad de reducir el Cr
(VI).
Tanto los organismo aerobios como los anaerobios son activos.

Los organismos a elegir deben presentar un alto grado de tolerancia. Bajo

condiciones adecuadas, se ha logrado 99% de reduccin de Cr(VI) pero en
concentraciones muy altas del ion, el porcentaje de reduccin disminuye.

Estos materiales txicos o indeseables deben ser tratados para hacerlos

inocuos.

En el laboratorio, el tratamiento se efecta en un biorreactor en donde se

realiza el proceso en forma controlada, es decir, se suministran nutrientes,
se inocula con los microorganismos deseados, se dan las condiciones
adecuadas de pH y temperatura.

Los investigadores sugieren que la reduccin de Cr(VI) puede ser reducido

en slidos acuferos cuando se agrega benzoato como fuente de carbono y
energa.

Otra manera de lograr la reduccin fue la adicin de sulfato y la provisin

de condiciones anaerbicas y una fuente de carbono disponible que permita
la reduccin de sulfato generando H2S, el H2S reacciona abiticamente para
reducir Cr(VI).
 MATERIAL Y MTODO
MATERIAL BIOLGICO:
Cultivo de Pseudomonas sp.
Ejemplares de Allium cepa.
MATERIAL Y PROCEDIMIENTOS:
Acondicionamiento del biorreactor.
Se acondicion un biorreactor de tanque agitado con turbina tipo
Rushton (2.5 L) con un volumen de trabajo de 2L.
Dispositivos de salida de gases, toma de muestras y monitoreo de
temperatura y pH.
Agitacin constante.
Preparacin del inculo de Pseudomonas sp.
Se prepar una suspensin de solucin salinas similar al tubo N 1 del
Nefelmetro.
Preparar 200 ml de una dilucin al 1/100.
 Preparacin del sistema de tratamiento.
En el biorreactor de tanque agitado se
colocaron en condiciones aspticas:
1675 mL de agua residual de curtiembre.
200 mL de inculo.
20 mL de solucin de glucosa al 25%
100 mL de peptona al 30%
05 mL de solucin de CaCl2 al 32%.
Sistema de agitacin (16 das)
Monitoreo del sistema.
Cada 4 das se tomaron muestras de 50ml para
evaluar:
Concentracin de cromo. Espectrofotometra de
absorcin atmica.
pH
Recuento de bacterias.
 Evaluacin del efecto del cromo sobre el ciclo celular de Allium
cepa cebolla
Se prepararon soluciones ideales de Cromo.
En 4 vasos descartables de 4 onzas se colocaron 100mL de agua de
cao, sobre las que se colocaron los bulbos de Allium cepa.
Cuando las raicillas alcanzaron una longitud de 2.5 a 3.0 cm, los bulbos
se transfieren a otros vasos conteniendo las soluciones ideales de cromo
a diferentes concentraciones, y dejando dos como testigo, Se suministr
aire a los vasos.
A las 2, 12, 16 y 34 horas se cortaron de 5 a 10 raicillas y se fijaron con
Carnoys.
Las raicillas fueron lavadas dos veces con agua destilada y se colocaron
en un luna de reloj.
Se adicionaron 9 gotas de orcena y 1 gota de HCl 1N, se dejo en reposo
30 munitos y se cort el pice, se coloc en el portaobjeto con una gota
de gelatina fenicada, se cubri y se realiz un aplastamiento.
Las laminas se observaron al microscopio a 40 aumentos.
EVALUACIN ESTADSTICA
 RESULTADOS
Al evaluar capacidad de reduccin del Cr VI, por
Pseudomonas sp.

Se determina que la reduccin en mayor cantidad y a la

que se le puede llamar reduccin total, ocurre en mayor
proporcin durante las primeras 24 hora de tratamiento
(de 2460 a 320ppm). A pesar de que el Cr VI mostro una
reduccin progresivas, los niveles de reduccin no son
significativas (0.37 a 0.35 ppm durante las 1ras. (48
horas).

As mismo el incremento de la biomasa de las

Pseudomonas sp ocurre en las primeras 24 horas de
tratamiento alcanza una velocidad de crecimiento de
0.198 h-1.

Otro cambio notable es del pH. Que sufre una variacin

de 6.5 a 5.5
 El resultado del efecto de la Cr VI en el
ciclo celular de Allium cepa, se observo
como el mayor dao celular se ve mas
notoria a las 24 y 48 horas en la cual se
observa endurecimiento y opacidad de
las clulas que impiden la visibilidad de
la zona intracelular. Pero a partir de las
96 horas el dao se reduce aunque se ve
aun hasta el final del tratamiento
(120hras.).
 DISCUSIN
Los resultados obtenidos indican que
Pseudomonas sp posee una gran capacidad
de reduccin de cromo total, sin embargo, la
capacidad de reduccin de cromo VI no es
moy notoria. (no coincide con lo expuesto por
Mc Clean y Beveridge 2000).

Mc clean, et-al, afirm que Pseudomonas

reduca exitosamente a cromo VI en cromo III
en condiciones anaerobios o aerobias
mediante una reductasa soluble contenida en
el citoplasma.
 Algunos de los factores que pueden afectar creando grandes
variaciones son: el pH de la solucin (2), la concentracin de
materia orgnica, la presencia de otras sustancias como sulfatos
metlicos.

La fase logaritmica de Pseudomonas se alcanz a las 24 horas

de tratamieto alcanzando una velocidad de 0.198/hora. Despus
se vio el deceso en el numero de Pseudomonas. Se sospecha
que es debido a que se acaba el nutriente o hay demasiada
concentracion de Cromo que hay lisis.

Con relacin al efecto que causa el agua residual de curtiembre

sobre los organismos vivos, es evidente, ya que esta agua
contienen diferentes compuestos qumicos, principalmente
metales pesados.
 Con relacin al efecto que causa el agua residual de curtiembre
sobre los organismos vivos, es evidente, ya que esta agua
contienen diferentes compuestos qumicos, principalmente
metales pesados.

Las 2 primeras etapas del proceso de curticin, son importantes

por el volumen y la carga contaminante de los efluentes que
descargan al ambiente y el tercero por las cantidades de
residuos slidos generados en las distintas operaciones del
acabado del cuero.

Tambin es preciso indicar que estos compuestos qumicos no

se degradan qumicamente ni biolgicamente, pueden formar
compuestos complejos con diferentes iones y molculas y
solamente estabilizan su estructura ante la efectividad de las
enzimas que controlan las reacciones metablicas
 BIOENSAYO
Se eligio trabajar Allium cepa por tener un ciclo
celular corto y presentar celulas meristematicas
grandes donde se puede evidenciar un ciclo
celular con diferentes fases.
Las raicillas de Allium cepa fueron sumergidas
en las muestras de agua extraidas del
biorreactor.
Cuya concentraciones de cromo total oscilaban
entre 2460 a 293 ppm, y de cromo vI de 0,37 a
0,32 ppm y tuvieron efecto negativo sobre la
division celular.
 Muestra original(2460 ppm), las raicillas
presentaron una reaccion celular notoria,
produciendo un engrosamiento
meristematico.
Esto se debe a la alta concentraciones de
compuestos quimicos , las sales de cromo
que influyen en el proceso
Las leciones en las plantas en el sistema
radicular como en otros organos difieren,
por el modo de asimilar el cromo y el tipo
de lesiones que presentan
Los efectos toxicos que el cromo ejerce en
 Al exponer las raicillas a las
concentraciones de cromo a los
diferentes tiempo de tratamiento.
Alteraciones en la celulas
Fueron los desordenes en la division
celular que impidieron la observacion de la
misma
Cuando la concentacion se reduce, estas
fueron disminuyendo.
 La influencia del cromo hexavalente, este
puede disminuir la replicacion y fidelidad
de la DNA polimerasa
Fijandose directamente a los grupos tioles
a lo largo de la enzima
Produciendo un dao oxidativo que la
llevan a una inhibicin
Altera la sintesis del DNA
 El efecto toxico de algunos metales sobre
las celulas.
Fue de mostrado por Lerda(1992)
Observo que el Pb reduce el crecimiento
radicular y la frecuencia de celulas
mitoticas.
 Los metales pesados pueden acumularse
en forma ionica o como compuestos
organicos por largos periodos de tiempo.
Universidad Autnoma Benito Jurez
de Oaxaca

Facultad de Ciencias Qumicas

Lic. QUMICO FARMACUTICO BILOGO

CATEDRTICO:
Q.B. ERIK MARTNEZ TORRES

MATERIA:
BIORREMEDACIN DE AGUAS
Estos sistemas de descontaminacin se basan en la digestin de las sustancias
orgnicas por los microorganismos , de la cual obtiene su fuente de carbono necesaria
para el crecimiento de sus clulas y una fuente de energa para llevar acabo todas las
funciones metablicas que necesitan sus clulas para su crecimiento.

Estas tcnicas biolgicas pueden ser de tipo aerobio, si se producen en condiciones

aerobias( presencia de un medio oxidante), o bien de tipo anaerobio, en condiciones
anaerobias(medio reductor).

En el articulo se describen 3 tipos de medidas biocorrectoras de tipo aerobio: la

ventilacin forzada del aire en el suelo o bioventing, el compostaje de suelos o
biopilas, y la biorrecuperacion natural del suelo o atenuacin natural.

Para que estos procesos puedan ser utilizados como una tcnica alternativa ser
necesario que exista en el medio unas condiciones fsico-qumicas optimas.

En general se necesitara la existencia de determinadas poblaciones de

microorganismos autctonos capaces de utilizar los hidrocarburos como fuente
nutricional y de energa. A su vez ser necesario un determinado numero de
aceptores de electrones que enzimticamente oxide los carbonos procedentes de los
hidrocarburos, as como unas condiciones adecuadas de pH, nutrientes, temperatura,
humedad, textura y estructura del suelo, y concentracin de los contaminantes.
 FUNDAMENTO BIOQUMICO DE LA
BIODEGRADACIN

DEGRADACIN AEROBIA:

SUSTRATO + 02 BOMASA + CO2 + H2O

DEGRADACIN ANAEROBIA:

SUSTRATO + (NO3-, SO42-, Fe3+, Mn4+, CO2) BIOMASA + CO2 + (N2,

Mn2+, S2+, Fe2+, CH4)
La concentracin y composicin de la comunidad microbiana y la tasa de
transformaciones de contaminantes esta influencia por:

Necesidad de nutrientes.

pH del suelo.
Crecimiento mximo: pH: 6 y 8.
Afecta:
La actividad microbiana
La solubilidad del fsforo
Transporte de metales pesados en el suelo

Temperatura.
Las especies bacterianas crecen a intervalos: 15 y 45C.

Humedad.

Estructura qumica del hidrocarburo.

Halogenacin
Existencia de ramificaciones
Baja solubilidad en el agua
Diferente carga atmica
 FACTORES QUE DETERMINAN LA
EFICACIA DE LA TCNICA.
3.1. BIOVENTING INYECCION DE AIRE.

Este tratamiento es de biorrecuperacin de tipo in- situ.

Consiste en la ventilacin forzada del suelo mediante la
inyeccin de oxigen5o (aire) en la zona no saturada a
travs de pozos de inyeccin.

Despus de la aireacin se ve favorecida la degradacin

de los hidrocarburos por 2 motivos:
 Volatilizacin: facilita la migracin de la fase
voltil de los contaminantes.

Biodegradacin: al incrementar la oxigenacin

del suelo se ve estimulada la actividad
bacteriana.

Factores importantes para su aplicacin:

Se degradan mas fcilmente las molculas mas

pequeas (hasta C 20.). As los compuestos
de cadena lineal y aromtica son fciles de
biodegradar.
 Los suelos tratados deben tener bajo contenido en
arcilla y se homogneos. Con un valor de permeabilidad
de aire adecuado (> 10-10 cm2).

Biodisponibilidad de microorganismos.

No debe existir producto libre en flotacin sobre el nivel

fretico.

Condiciones optimas de pH (6 y 8). De humedad ( 12-

30 % en peso), temperatura (0 40oC). Y los nutrientes
suelo N:P de 10:1

Esta tcnica acta en corto tiempo (meses) y su costo

entre medio alto.
 3.2 BIOPILAS
Tcnica de biorrecuperacin ex - situ en condiciones no
saturadas, se reduce la concentracin de contaminantes
derivados del petrleo en suelos excavados mediante la
biodegradacin.

Consiste en la formacin de pilas de material

biodegradable de varia dimensiones, formadas por
suelo contaminado y materia orgnica (compost) en
condiciones favorables para poder biodegradar los
contaminantes.

Las pilas de compost pueden airarse de forma activa,

volteando la pila, o bien tambin de forma pasiva,
mediante tubos perforados de aireacin.
 FACTORES IMPORTANTES PARA LA
APLICACIN DE BIOPILAS:
Los hidrocarburos deben ser no halogenados y deben tener concentraciones menores a
50 ppm

Una superficie grande para el trabajo.

Una densidad de poblacin microbiana (>1.000 CFU/ gramo de suelo).

Humedad (40-80%).

Temperatura (10- 45oC).

Textura (baja en arcilla).

pH adecuado (6 y 8).

Baja presencia de metales pesados (< 2.500ppm).

Concentracin de nutrientes del suelo C:N:P sea 100:10:1.

Acta en muchos tiempo (meses a aos) .Costo bajo.

 3.3 ATENUACION NATURAL
No es considerada una tcnica de descontaminacin. Pero se
engloba en la in-situ es de muy bajo costo.

Utiliza los procesos FISICO-QUIMICOS de interaccin

CONTAMINANTE-SUELO y los procesos de biodegradacin que
presentan de forma natural en el medio.

Tambin conocido como proceso de biotransformacin natural.

Los procesos de biotransformacin natural son aquellos que

reducen la concentracin de contaminantes ejemplos de ellos son:
dilucin, dispersin, volatilizacin, adsorcin, biodegradacin, y las
reacciones qumicas presentes en agua y suelo que ayudan a la
disminucin de la contaminacin.
 Factores que influyen en su eficacia:
Exigencia de proteccin y riesgo de los potenciales receptores
durante el tiempo de atenuacin.

Existencia de condiciones geolgicas y geoqumicas favorables.

Existencia de microorganismos que degraden los contaminantes.

Conservacin en el medio de subproductos persistentes o ms

txicos que los inciales.

No existencia de producto libre en flotacin sobre el nivel fretico.

Potencial redox situado en un rango de 400 800 mV.

Dispersin de los contaminantes abajo del foco y la direccin de

flujo debe ser adecuada para que exista mayor disponibilidad de
proporcin entre los contaminantes y los receptores de electrones.
 DISEO Y APLICACIN DE LOS
SISTEMAS DE BIOTRATAMIENTO.
1.- Investigacin y caracterizacin de la
contaminacin y del emplazamiento.
2.- Anlisis y eleccin de las medidas
biocorrectivas.
3.- Evaluacin de la efectividad del sistema
elegido.
4.- Diseo y evaluacin del sistema
5.- Evaluacin del control y seguimiento.
6.- Anlisis e interpretacin de resultados.
 Investigacin y caracterizacin de la
contaminacin y del emplazamiento.

Realizacin de una completa investigacion

acerca del medio, principalmente la
caracterizacin del emplazamiento, del tipo y
concentracin de la contaminacin existente.
Adems de condiciones geolgicas e
hidrogeolgicas (analizar pH, granulometra,
humedad, porosidad, etc.
Caracterizacin del contaminante (tipo y
concentracin), as como la biodisponibilidad de
los compuestos en el suelo (aceptores de
electrones, metales pesados, nutrientes, etc)
 Anlisis y eleccin de las medidas
biocorrectivas.

Identificar y cuantificar los contaminantes.

(propiedades fisico-quimicas)
Conocer los factores que influyen en la
transformacin biolgica de los
contaminantes. (factores fisicos)
Designar las medidas biocorrectivas. En
funcin de lo anterior.
Diseo y evaluacin del sistema

Establecer etapas en las cuales se

determinan y evalan parmetros
fundamentales para la eficacia.
Evaluacin de la viabilidad de la tcnica
Evaluacin del diseo.
Evaluacin del control y seguimiento.
 Evaluacin del control y seguimiento.

Control de las condiciones de degradacin

y biodegradacin. Se debe de registrar las
variaciones y analizarlas.
Control de los parmetros que afectan
directamente en el funcionamiento del
sistema.
 Anlisis e interpretacin de resultados.

Se analizan los resultados obtenidos,

haciendo un balance entre objetivos
alcanzados y los marcados inicialmente.
En este punto, si fuese, necesario, se
debern proponer y estudiar aquellas
mejoras o modificaciones necesarias para
la optimizacin del sistema.