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Lic.- T.M.

Jos Chauca Cavero


La tendencia actual de implantar Sistemas de
Gestin de Calidad en los laboratorios clnicos
implica la gestin del proceso en su totalidad,
incluyendo las fases preanaltico, analtica y
Postanaltica.
Clsicamente, la fase analtica ha sido siempre la ms
controlada ya que en sta se producan, gran parte de
los errores del proceso. Sin embargo, en la
actualidad, con la mejora tecnolgica, la fase
preanaltica ha mostrado ser la mayor fuente de
errores en el laboratorio, por lo que los procesos de
mejora de calidad se centran en la utilizacin de
acciones preventivas y correctivas en esta fase
Es responsabilidad del laboratorio garantizar la
calidad de la informacin que proporciona sobre
el estado de salud de una persona, y para ello debe
controlar todos los procedimientos desde que el
mdico solicita el anlisis hasta que ste recibe el
informe final.
El tiempo que transcurre entre la peticin de las
determinaciones analticas por parte del clnico y
el anlisis de la muestra es lo que se conoce como
fase preanaltica. Una preparacin correcta del
paciente, as como una correcta extraccin del
espcimen, cumplimentacin de peticiones,
transporte, identificacin, preparacin para su anlisis
etc., son aspectos fundamentales en esta fase
CAUSAS DE LA VARIABILIDAD DE LAS MAGNITUDES

Las magnitudes biolgicas estn sometidas a dos tipos de


variabilidad; la variabilidad biolgica y la analtica,
responsables de que los valores de un determinado
parmetro sean diferentes entre diferentes individuos y de
que incluso en una misma persona difieran en el tiempo.
- Variabilidad biolgica
Aun siendo conocidos o teniendo controlados
experimentalmente los factores causantes de la variacin
preanaltica y analtica, es un hecho que para una magnitud
concreta los valores observados en diferentes individuos
son distintos. Tambin se observa que una misma
magnitud repetida en un mismo individuo en diferentes
momentos del da o de su vida arrojar diferentes
resultados. Esta variacin es conocida como variacin
biolgica.
La variacin biolgica intraindividual, resultados de las
magnitudes biolgicas varan en un individuo de un
momento a otro. La variacin puede suceder a corto o largo
plazo, y su origen puede ser:
- Sistemtico: fundamentalmente relacionados con los
ritmos biolgicos o con la edad debido a las modificaciones
que comporta el crecimiento o el envejecimiento.
-Aleatorio: causado por las variaciones metablicas
relacionadas con la homeostasis. La variacin es tanto
menor cuanto ms estrecho sea el control o la regulacin
metablica del analito. Tambin forman parte del
componente aleatorio las variaciones introducidas por la
dieta, clima, estados emocionales, etc.
La variacin biolgica interindividual, justifica por qu
los valores medios de una magnitud concreta son
diferentes entre los distintos individuos de una poblacin.
Este componente existe en todas las poblaciones, y
determina la necesidad de calcular en cada una de ellas sus
propios valores de referencia. Los factores que con ms
frecuencia causan este tipo de variacin en las magnitudes
de laboratorio son: la edad, la raza, el sexo, el ciclo
menstrual, la gestacin, la lactancia, la menopausia,
la alimentacin, el ejercicio fsico, la masa muscular,
la obesidad, la localizacin geogrfica, etc.
El conocimiento de la variacin biolgica en el laboratorio
clnico, tiene una importancia extrema porque resulta
imprescindible para la interpretacin correcta de los
resultados de las pruebas de laboratorio.
Variabilidad analtica
- La variabilidad analtica engloba a todos aquellos factores
que pueden afectar al espcimen durante todo el proceso
analtico. Se entiende como proceso analtico al conjunto
de procedimientos que tienen lugar desde la solicitud del
anlisis y preparacin del paciente hasta que el informe
llega al mdico que lo solicit. Est dividido en tres fases:
- Preanaltica: comprende la fase desde la preparacin del
paciente y toma de muestra hasta la preparacin de sta
para su anlisis
- Analtica: abarca todos los procedimientos relacionados
con la medida de la magnitud que se estudia.
- Postanaltica: incluye la elaboracin del informe analtico
y envo al mdico solicitante. Todas estas fases presentan
una gran importancia, ya que un error en cualquiera
de ellas puede llegar a invalidar el informe final.
Variabilidad preanaltica

Son diversos los factores que pueden influir en la calidad


de la muestra y que han de conocerse para interpretar
correctamente el resultado final. Estos factores deben ser
conocidos por todos los profesionales que intervienen
en el proceso, tanto por los mdicos (de forma que
puedan interpretar correctamente el informe
analtico), as como por el personal de extracciones,
que ser consciente de la trascendencia que puede
tener una incorrecta obtencin del espcimen.
Igualmente, es importante que en el laboratorio se
disponga de los datos completos del paciente, edad, sexo,
condiciones de extraccin etc., ya que en base a estos datos
se validarn o rechazaran los resultados.
Factores fisiolgicos

- Edad: algunas magnitudes presentan diferentes valores segn


la edad, por lo que es importante conocer la edad del paciente
para poder interpretar correctamente un resultado. Ej.- Una
fosfatasa alcalina con niveles patolgicos para un adulto es
normal para un nio en edad de crecimiento; el nmero de
hemates, hemoglobina y hematocrito se encuentra ms elevado
en neonatos que en adultos; los niveles normales de PSA son
superiores en ancianos mayores de 65 aos, etc.

- Sexo: algunas magnitudes como CK, mioglobina, creatinina,


cido rico etc., presentan diferencias segn el sexo del paciente.

- Embarazo: diversas magnitudes se ven afectadas por un efecto


de dilucin producido por el aumento del volumen plasmtico,
aumenta el aclaramiento de creatinina. Se produce un
incremento de los niveles sricos de lpidos (colesterol,
triglicridos, etc. ).
Ciclos biolgicos: es importante informar sobre el
momento del ciclo en que se extrae la muestra ya que
ciertos parmetros pueden variar siguiendo ritmos
biolgicos. As, las hormonas sexuales varan a lo largo del
ciclo menstrual (FSH, LH, estradiol, etc.), hormonas como
el cortisol se ven afectadas por el ritmo circadiano,
presentando un pico mximo a las 8 h y un pico mnimo a
las 20 h.
- Estacin: algunos parmetros varan segn el periodo
estacional. As, los niveles de vitamina D se incrementan en
verano.
- Altura: algunos parmetros como la hemoglobina
aumenta con la altura.
- Estilo de vida: el tipo de dieta, consumo de caf, alcohol,
tabaco, etc. Tambin son variables fisiolgicas a tener en
cuenta.
PREPARACIN DEL PACIENTE

En la preparacin del paciente para la flebotoma se debe


tener en cuenta para minimizar los factores relacionados
con las actividades que influyen en el resultado
Estos factores incluyen:
El ejercicio Ingestin de drogas
El ayuno La postura
La dieta El estado de animo
El consumo de alcohol El fumar tabaco
El ejercicio puede elevar a CK, AST, LDH, y activar la
coagulacin, la fibrinlisis y las plaquetas.
Los efectos a largo plazo del ejercicio puede amentar los
valores de Aldolasa, AST y la LDH, los niveles de hormonas
sexuales : la testosterona, androsterona y la hormona
luteinizante.
Despus de 48 horas de ayuno la concentracin de
bilirrubina en el suero se puede incrementar
Un ayuno de 72 horas disminuye los niveles de glucosa en
mujeres sanas hasta 45 mg/dl, en el hombre aumentan los
triglicridos y los cidos grasos libres y cambios en el
colesterol.
Cuando se determinan componentes como glucosa,
colesterol, triglicridos y los electrolitos , la extraccin se
realiza en estado basal
Una carne roja o cualquier otra dieta rica en protenas
puede aumentar los niveles de urea en suero, de
amoniaco y de urato.
Una dieta rica en purinas mostrar unos niveles altos
de uratos
Los alimentos como los pltanos, las pias, los tomates
y los aguacates son ricos en serotonina.
La bebidas ricas en cafenas elevarn los cidos grasos
libres en plasma y provocan la liberacin de
catecolaminas desde la mdula suprarrenal y desde el
tejido cerebral.
La ingestin de alcohol incrementar las
concentraciones de lactato plasmtico y de
triglicridos.
Los niveles elevados de colesterol de la lipoprotena de
alta densidad (HDL), la GGTP, el urato y el VCM, han
sido asociados con el abuso crnico de alcohol.
Los fumadores de tabaco tienen niveles altos de
catecolaminas, carboxihemoglobina y de cortisol en
suero .
Los fumadores crnicos, llevan a aumentar la
concentracin de hemoglobina, recuento de
eritrocitos, VCM, el recuento de leucocitos.
En algunos casos los anlisis de laboratorio han
servido para predecir los resultados de los pacientes.
Por ejemplo la albmina, se ha utilizado como un vaticinio
de resultados quirrgicos, el descenso de 46 g/l a 21g/l se ha
asociado con ndices de mortalidad del 1 al 29% y con
ndices de morbilidad de 10 al 65%.
Cuando el paciente se mueve de una posicin de supino a
otra de estar de pie hay un eflujo hidrosttico de agua y de
sustancias que se filtran desde el espacio intravascular al
fluido intersticial dependiente del espacio extravascular.
Los niveles de calcio y albmina pueden elevarse segn uno
cambia de posicin de supino a erguido.
Los elementos que se ven afectados por los cambios
posturales son la albmina, protenas totales, enzimas,
calcio, bilirrubina, colesterol, triglicridos, hemoglobina,
hematocrito, leucocitos.
La aplicacin prolongada del torniquete tambin eleva
las enzimas del suero, las protenas y las sustancias
ligadas a las protenas, incluidos colesterol, el calcio y
los triglicridos
El estrs, la ansiedad y la hiperventilacin pueden
afectar a la secrecin de hormonas y el equilibrio cido
bsico, elevar el recuento de leucocitos, el lactato en
suero o los cidos grasos libres.
POR REGLA GENERAL: LOS PACIENTES CITADOS A
SOMETERSE A UNA FLEBOTOMIA DEBERN
ABSTENERSE DE UNA ACTIVIDAD FSICA INTENSA,
DEL ALCOHOL, LAS DROGAS, O DE CAMBIOS DE
DIETA DURANTE LAS 24 HORAS ANTERIORES AL
PROCEDIMIENTO
ANTICOAGULANTES

Sustancia que in vivo o in vitro retarda o anula la coagulacin de


la sangre . Los utilizados comnmente en el laboratorio so.
EDTA, Citratos, Oxalatos, Fluoruros y Heparina. Los
anticoagulantes tambin son usados en forma teraputica para
evitar la enfermedad tromboemblica: la heparina, empleada por
va parenteral, la warfarina empleada por va oral, que inhiben la
sntesis de los factores de la coagulacin dependiente de la
vitamina K.
EDTA.- Es un agente quelante, las sales de Na y K del EDTA extra
en el calcio de la sangre evitando as la coagulacin. La sal
dipotasica se emplea ms como anticoagulante , mientras que la
sal disdica se emplea en el diagnstico y tratamiento del
envenenamiento por plomo, acta unindose a ste aumentado
as su excrecin en la orina.
El EDTA no se recomienda como anticoagulante para
procedimientos qumicos, no sirve para el estudio de la
coagulacin o de la funcin delas plaquetas.
Preprese una solucin al 2.5% de sal dipotasica de EDTA
en agua.
Para 5ml de sangre colquese 0.2 ml de solucin en frascos,
desecar. Mezclar al agregar la sangre.
Utilcense para: Recuento de clulas sanguneas
Clculo de hemoglobina
Hematocrito
Identificacin de grupos sanguneos
Velocidad de Sedimentacin.
Coloraciones hematolgicas.
CITRATO TRISODICO.- Es una quelante, actan como
amortiguadores al combinarse con el calcio
Se prepara en una solucin acuosa al 3%. Es isotnica
Se emplea en una proporcin para la VSG
Se emplea en una proporcin 1/9 para el estudio de
trastornos de la coagulacin.
MEZCLA DE WINTROBE.-La sal de amonio aumenta el
volumen de los glbulos rojos y la de potasio la disminuye,
con las proporciones utilizadas los eritrocitos no se alteran
Oxalato de amonio: 1.2 g
Oxalato de potasio: 0.8 g
Agua destilada : 1000 ml
Esta mezcla se pone en tubos o en frascos de tapa rosca se
colocan en la incubadora hasta secar .
La ventaja de est mezcla son su precio la facilidad de
preparacin y que no requiere de diluciones , es adecuado
para VCM , recuento de glbulos rojos leucocitos,
hemoglobina, hematocrito.

OXALATO DE FLUOR, se utiliza para el dosaje de glucosa


en LCR , se utiliza 0.1 ml para 2.0 ml de sangre
Flor sdico . 12 g
Oxalato de potasio . 6 g
Agua destilada .. 100 ml
Esquema tubos de extraccin sangre laboratorio
El fluoruro inhibe la gluclisis de las clulas de la sangre que de otra
forma podra destruir la glucosa con un ndice de 5% por hora.
En presencia de contaminacin bacteriana de las muestras de sangre, la
inhibicin de la gluclisis por fluoruro no es la indicada.
La rpida separacin de la muestra del plasma o del suero de las clulas
es importante , evita los movimientos de los componentes
intracelulares (Ca, K).
La actividad de la amilasa se puede inhibir por oxalato o citrato,
mientras que LDH y la fosfatasa cida se inhiben por oxalato.
Es particularmente til el uso de una jeringa cuando se extrae una
muestra de mano, del tobillo o de nios pequeos.
Los pacientes con venas dbiles o pequeas pueden experimentar un
colapso de las venas con el uso del sistema de tubos al vaco.
Interferencias en las determinaciones
analticas:
- Hemlisis: salida de los componentes de las clulas sanguneas al plasma o
suero, lo que da lugar a un color ms o menos rojizo en funcin del grado de
hemlisis. Algunos analitos tales como LDH, GOT(AST) y K se encuentran en
mayor concentracin dentro del hemate, luego se ven incrementados con la
hemlisis. La presencia de hemlisis, segn el grado de sta, o bien invalida la
muestra o bien hay que informar de su presencia.
- Lipemia: presencia de turbidez en suero o plasma por incremento de la
concentracin de lipoprotenas, debido a que no se ha guardado el ayuno
recomendado o a enfermedades metablicas. Puede producir interferencias
pticas en la determinaciones analticas.
- Ictericia: originada por elevada concentracin de bilirrubina en suero o
plasma.
- Anticuerpos heterfilos: pueden originar interferencias sobre el analito o
sobre el proceso de medicin (reaccin antgeno-anticuerpo).
- Frmacos: pueden producir interferencias en la medida de diversos analitos.
FARMACOS QUE PUEDEN AFECTAR A LOS ANALISIS DE LA FUNCION
HEPATICA

Acido aminosalicilico Anfotericina B


Agentes anablicos Andrgenos
Ciclofosfamida Eritromicina
Indometacina Isoniazida
Lincomicina Metildopa
Acido nicotnico Nutrofurantoina
Noboviocina Fenilbutazona
Tetraciclinas Anticonceptivos ORALES
ETAPAS DE LA FASE PREANALTICA
La fase preanaltica es la secuencia de
acontecimientos que tienen lugar antes de que la
muestra convenientemente preparada sea sometida al
proceso de anlisis propiamente dicho.
Actualmente se considera la fase ms crtica de
proceso ya que en ella es donde se produce un mayor
nmero de errores y donde se puede perder ms
tiempo. Hasta hace muy pocos aos era una fase
totalmente manual pero la tendencia actual es la de su
informatizacin, automatizacin y robotizacin. Las
etapas que forman parte de fase son:
Solicitud de anlisis por parte del Clnico
La peticin es el comienzo del proceso del laboratorio y es
la accin mediante la cual se provee al laboratorio de la
informacin necesaria para llevar a cabo su trabajo. De su
calidad va a depender en gran medida el resto del proceso.
Es imprescindible que en la solicitud se encuentren
correctamente cumplimentados varios tipos de datos:
Identificacin de la peticin: a sta se le asigna un
cdigo de identificacin (nmero de peticin,) que la
identifica inequvocamente en el sistema del que procede.
Tipo de peticin: ordinaria o urgente. Normalmente el
tipo de peticin condiciona una logstica diferente.
Datos de filiacin del paciente: son los que identifican
inequvocamente al paciente y lo relacionan con otros
datos. Ejemplo: nombre, apellidos, nmero historia,
nmero de la S.S., etc.
Datos clnicos y demogrficos: son necesarios para la
correcta interpretacin de los resultados, para llevar a cabo
estudios complementarios, revisar la congruencia de los
resultados y realizar recomendaciones desde el laboratorio.
Ejemplo: fecha de nacimiento, sexo, diagnstico y otras
informaciones en funcin de las pruebas solicitadas.
Datos administrativos de la solicitud: indican de qu
persona y organizacin procede la solicitud, a dnde se
enva el informe y quin se hace cargo administrativamente
de la peticin (mdico, procedencia, destino, etc.).
Pruebas o estudios solicitados: aqu se indica qu
pruebas o grupos de pruebas se desea realizar y sobre qu
espcimen; por ejemplo: glucosa en suero, amilasa en
orina.
Tambin es frecuente la peticin por perfiles, por ejemplo
perfil cardaco o perfil bsico. En estos casos existen
acuerdos entre el laboratorio y los clnicos para definir
estos perfiles y protocolos.
La solicitud en papel resulta relativamente sencilla desde el
punto de vista del clnico, pero necesita una transcripcin
de la informacin al SIL (sistema informtico de
laboratorio) producindose, en ocasiones, errores de
transcripcin.
La peticin electrnica permitira al clnico realizar la
solicitud desde su puesto de trabajo, mediante un acceso
directo al SIL si dispone de un cliente de la aplicacin del
Extraccin de muestras

Una vez realizada la solicitud y citado el paciente, ste debe


de acudir al lugar de extraccin de muestras. La obtencin
de muestras es otro de los momentos crticos del proceso ya
que si el paciente no est en las condiciones adecuadas, las
muestras no se obtienen correctamente, no estn
convenientemente tratadas o se produce algn problema de
identificacin, el resultado de los anlisis posteriores va a
resultar gravemente afectado.
Una vez obtenidas las correspondientes muestras, se les
colocan etiquetas con el nmero de identificacin que
corresponde a la solicitud. Las etiquetas contienen
nmeros o cdigos de barras.
La contribucin de los sistemas informticos a la obtencin
e identificacin de muestras es cada vez mayor.
Transporte de muestras
Una vez realizada la extraccin, los diferentes
especmenes deben ser organizados por cdigos de
procedencia para facilitar un reconocimiento rpido y
efectivo durante el transporte y posterior recepcin de
estos. Asimismo, deben efectuarse comprobaciones
previas al transporte de los especmenes concernientes
sobre todo a una identificacin correcta de los mismos,
del impreso de peticin y del paciente.
Esta buena identificacin puede llevarse a cabo de
diferentes formas: identificacin manual , cdigos de
barras, etc.
Despus de asegurar que los especmenes estn
correctamente identificados, se centrifugan (cuando
existan centrfugas en los puntos de extraccin) y se envan
en gradillas, de forma ordenada segn cdigos de barras y
tipo de tubo y en posicin vertical para evitar interferencias
de diverso tipo. Algunos tipos de muestras
especialmente sensibles es posible que necesiten
adems sistemas de refrigeracin, recipientes
especiales para protegerlas de la luz, etc.
En toda determinacin analtica es imprescindible remitir
los especmenes desde los centros de extraccin con la
mayor rapidez posible y evitando cualquier tipo de
interferencias o errores. Esto no siempre es posible,
sobre todo si las extracciones son extrahospitalarias.
Existen una serie de normas generales establecidas para
cada tipo de espcimen:
Sangre: los especmenes de sangre deben ser recibidos por el
personal del laboratorio en 1-2 horas como mximo desde la
extraccin. Durante su transporte, ha de evitarse la agitacin
(por la posible hemlisis) y se deben proteger de la
exposicin directa a la luz (debido a la degradacin de
algunos constituyentes, como la bilirrubina). Para la
determinacin de algunos parmetros inestables (lactato,
amonio, renina plasmtica, fosfatasa cida, ...) los especmenes
deben mantenerse refrigerados a 4 C, inmediatamente
despus de la toma, y deben transportarse en hielo.
Los tubos de sangre deben estar en posicin vertical durante su
transporte, con el tapn hacia arriba, lo que favorece la
formacin completa del cogulo y reduce la agitacin del
contenido del tubo.
Orina: los especmenes para anlisis de orina se
recogen y transportan en contenedores de plstico
estriles y desechables (de unos 200 ml). La orina
de pacientes peditricos se recoge en bolsas
flexibles de polietileno, que pueden sellarse para el
transporte.
Heces: se puede transportar en los contenedores
para orina citados anteriormente.
En el caso de especmenes provenientes del
exterior, (consulta mdica, mdulo de extracciones
lejano o perteneciente a otro laboratorio), debe
prestarse una atencin especial al embalaje y
manipulacin adecuados del espcimen para
asegurar la estabilidad de la magnitud que se
quiere determinar. As, por ejemplo, si un
espcimen externo no puede enviarse al
laboratorio en un momento determinado, se
deber centrifugar para separar el suero o plasma
de las clulas y guardar en condiciones adecuadas
hasta que pueda ser llevado al laboratorio.
Registro de datos
La entrada de datos al SIL es otro paso crtico.
Cualquier error a este nivel va a repercutir
directamente en la veracidad del resultado y por
otro lado la propia velocidad de entrada de estos
datos va a condicionar toda la logstica del
laboratorio, ya que hoy en da no se puede
comenzar ningn procesamiento de las muestras
hasta que los datos no estn en el SIL. Por estos
motivos se tiende a utilizar sistemas cada vez ms
rpidos y fiables.
Recepcin y distribucin de muestras
Una vez que las muestras llegan al laboratorio es necesaria
una serie de acciones para prepararlas convenientemente
antes de ser enviadas a cada una de las reas que van a
llevar a cabo el anlisis propiamente dicho.
En primer lugar se hace una recepcin que supone la
aceptacin de la solicitud y las muestras. Para ello
debe hacerse una inspeccin fsica de las muestras y
su identificacin, se controla el tiempo transcurrido
desde la extraccin y la temperatura a la que han
permanecido las muestras. Aqu se registran las
incidencias detectadas, las horas de llegada, el
registro de la presencia de la muestra, peticiones
incongruentes o redundantes, protocolos
inadecuados, etc.
Una vez aceptadas las muestras y solicitudes, las
muestras deben ser clasificadas, centrifugadas en
caso necesario, destaponadas, y si es necesario
alicuotadas (subfraccionadas en varios
contenedores).
ERRORES EN LA FASE PREANALTICA
El error preanaltico es el ms frecuente. En distintos
estudios se estima su frecuencia en un 17%, 31%, 75% e
incluso hay autores que llegan a encontrar un 84%.
No obstante, los errores descritos en la literatura con mayor
frecuencia son los que se refieren a la calidad de la muestra
recibida en el laboratorio: muestra hemolizada, lipmica,
insuficiente, incorrecta o coagulada.
En la fase preanaltica pueden diferenciarse dos etapas; una
primera extra-laboratorio y la segunda dentro del
laboratorio. Los errores que pueden generarse son de
significacin distinta y su medida es difcil ya que algunos
de ellos se ponen de manifiesto en la fase analtica y otros
no se evidenciarn.
Errores en la fase preanaltica extra-laboratorio
Solicitud de anlisis por parte del mdico clnico:
eleccin de la magnitud, informacin precisa.
Caractersticas y condiciones previas del paciente:
edad, sexo, biorritmo, estado fsico, ayuno, reposo,
hbitos alimentarios y txicos, medicacin.
Obtencin del espcimen: identificacin del
espcimen y del paciente, tubos y contenedores
apropiados, orden correcto de llenado de los tubos,
evitar la contaminacin de las infusiones intravenosas.
Transporte al laboratorio.
Errores en la fase preanaltica intra-laboratorio
Registro administrativo: entrada de datos del paciente
y peticiones.
Almacenamiento: tiempo de espera de las muestras
hasta su manipulacin.
Centrifugacin.
Distribucin y alicuotado.
Preparacin de especmenes.
Eleccin del espcimen correcto
Demostrar la causa que puede generar una interferencia y conocer el
nmero de errores de laboratorio procedentes de la fase preanaltica
que la provocan es una tarea difcil, pero si se analiza paso a paso todo
el proceso, se comprueba que muchas de ellas tienen su origen en esta
fase. Entre las posibles causas de error se pueden citar:
La medicacin administrada al paciente y una mala preparacin del
mismo para la magnitud a medir.
La extraccin incorrecta de la muestra: estasis venoso, toma de una va,
higiene defectuosa.
La recogida en recipiente inadecuado, conservante incorrecto,
contaminacin por arrastre en el llenado de los tubos.
El transporte y almacenamiento sin las condiciones adecuadas o de
duracin prolongada, que puede alterar las condiciones fsico-qumicas
de las muestras o deteriorarlas.
La centrifugacin insuficiente o excesiva.
La demora en la medida de la magnitud o la mala preparacin del
espcimen.
Algunos errores no afectan clnicamente al paciente, pero otros
implican la repeticin de la solicitud analtica o la generacin de
exploraciones innecesarias, dando como resultado un incremento de
los costes y en ocasiones, incluso un diagnstico incorrecto o un
tratamiento inadecuado que incide en la salud del paciente.
Las normas legales y administrativas y los sistemas de calidad nos obligan a que
Trazabilidad de las muestras
todo el proceso de laboratorio sea rastreable, de tal manera que el sistema
permita reconstruir todo lo acontecido desde que se realiza la solicitud hasta
que se recibe o se ve el informe.
Esto supone conocer qu persona o instrumento ha llevado a cabo cualquier
accin en todo el proceso, el momento en que ha ocurrido y el resultado de la
accin. Algunos ejemplos seran: quin y cundo se hizo la solicitud, quin y
cundo obtuvo la muestra y cuntos tubos se extrajeron, quin y cundo realiz
el fraccionamiento de una muestra (alicuot) y cuntas fracciones (alcuotas)
se obtuvieron, cundo ha entrado una muestra en un determinado analizador y
qu pruebas se le solicitaron, etc.
Por supuesto, y en este caso, en cumplimiento de la LOPD (Ley Orgnica de
Proteccin de Datos de carcter personal), cualquier accin realizada sobre los
datos: registro, consulta, validacin, informe, etc., debe quedar registrada.
Esta ingente cantidad de informacin nos sirve para delimitar
responsabilidades, para establecer acciones de mejora y para la obtencin de
indicadores de calidad que nos permitan marcar objetivos y realizar su
seguimiento.
TOMA DE MUESTRAS SANGUNEAS
En general el momento ms adecuado para realizar la
toma de muestra es entre las 7;30-9:30 de la maana,
(las determinaciones que necesiten extraerse en otra
banda horaria debern de especificarse por el
laboratorio). Adems se recomienda un ayuno previo
de 8-10 horas y extraer la muestra antes de iniciar
procedimientos diagnsticos o teraputicos que
puedan interferir. Se debe registrar la hora exacta de la
toma de muestra y enviar sta al laboratorio en el
contenedor adecuado.
Etapas en la extraccin de muestras sanguneas
Para asegurar una correcta extraccin sangunea es importante tener en cuenta
las siguientes consideraciones:
- Identificacin del paciente: es responsabilidad del operador asegurarse de
que la muestra de sangre se extrae a la persona que figura en la peticin;
En pacientes ambulatorios/consultas externas: se debe solicitar al paciente
que se identifique con su nombre completo y comparar este nombre con el que
figura en el impreso de peticin y el nmero de identificacin de esa peticin
con el nmero de etiqueta de los tubos.
En pacientes hospitalarios: debe asegurarse de que el paciente y n de
habitacin se corresponden con los datos indicados en la peticin y con las
etiquetas identificativas de los tubos.
- Comprobar que el paciente est en ayunas. Algunas determinaciones
requieren que el paciente se encuentre en ayunas o que realice dietas especiales
antes de la extraccin de la muestra.
- Sosiego del paciente y adoptar postura correcta: el brazo del paciente debe
estar colocado en lnea recta y apoyarse firmemente en apoyabrazos, sin
doblarse a nivel del codo.
- Preparar materiales adecuados:
o Tubos de recogida de muestras, agujas y jeringas.
o Compresores.
o Alcohol isoproplico al 70% y compresas de gasa o
compresas preparadas con alcohol (en pacientes con
problemas de dermatitis deben utilizarse torundas de
algodn seco).
o Torundas de Povidona-iodada, si van a extraerse
hemocultivos.
o Rollos de gasa.
Los tamaos de agujas que se utilizan con ms frecuencia
son los correspondientes a los calibres 19, 20 y 21 (cuanto
mayor es el nmero menor es el calibre).
Sistema Vaco
El sistema de vaco constituye la forma ms frecuente de
obtencin de muestras sanguneas en la actualidad, son tambin
ms cmodos de utilizar, ms baratos y evitan que se escape la
sangre cuando se cambian. El sistema consta de tres elementos
bsicos:
Una aguja estril con la que se obtiene la sangre, un soporte para
asegurar la aguja y el tubo, y un tubo en el que se ha hecho el
vaco y al que se han aadido unos aditivos. Las agujas estn
especialmente diseadas para usarse con el tubo de vaco.

La sangre venosa es el espcimen utilizado de forma habitual en


los estudios analticos ya que su obtencin es rpida y
relativamente fcil. Segn el tipo de estudio que se vaya a realizar
se puede obtener:
Sangre total:
La sangre obtenida por venopuncin se recoge en un tubo con
anticoagulante en una proporcin determinada. Generalmente es la
muestra usada para estudios hematolgicos cualitativos, cuantitativos,
grupo sanguneo, etc.
Plasma:
Se obtiene aadiendo la sangre en tubo con anticoagulante (heparina
litio, citrato), centrifugando la muestra y alicuotando el lquido
sobrenadante. Es fundamental mantener la proporcin correcta de
sangre-anticoagulante para asegurar resultados correctos. Esta muestra
es la utilizada para estudios de coagulacin.
Suero:
Se obtiene dejando coagular la sangre sobre tubo seco sin
anticoagulante. La sangre se deja reposar 10 minutos a Temperatura
ambiente para que se forme el coagulo y posteriormente se centrifuga
obteniendo el suero en el sobrenadante. Es la muestra utilizada en el
laboratorio de bioqumica, serologa e inmunologa.
La puncin venosa en adultos generalmente se utilizan las venas
del brazo, siendo la cubital media la ms habitual por su calibre,
accesibilidad y por ser menos dolorosa, aunque tambin son
frecuentes la ceflica y la baslica. Otras zonas utilizadas , son el
rea de la mueca, dorsal de la mano y antebrazo.
Debe evitarse zonas con hematomas, quemaduras, tobillos
o pies en pacientes diabticos y con trastornos
circulatorios. Se debern extremar los cuidados en pacientes
con venas difciles (recin nacidos, obesos, pacientes con
perfusin intravenosa). Se seleccionar el lugar de extraccin
utilizando tcnicas para favorecer la palpacin de la vena
(cerrando el puo, colocar previamente el compresor 30 seg.,
golpear con el dedo ndice el lugar de puncin, aplicar calor en la
zona, masajear el brazo, etc.). Hay que tener en cuenta que un
compresor no debe de mantenerse ms de 1 minutos ya que
puede producir hemoconcentracin, alterando el equilibrio entre
el lquido y los elementos formes de la sangre.
Tambin es conveniente tener en cuenta que el desinfectante
utilizado (alcohol de 70) se debe de dejar secar para evitar
hemlisis y escozor en la zona.
Para evitar hematomas durante la puncin venosa se recomienda utilizar venas grandes,
quitar el compresor antes que la aguja y aplicar cierta presin en el lugar de la puncin
tras la extraccin sin flexionar el codo.
Una puncin venosa dificultosa o incorrecta puede ser una frecuente causa de
hemlisis, pudindose producir sta en ciertas ocasiones:
- Cuando se utiliza una aguja muy fina
- Al forzar el paso de la sangre de la aguja al tubo
- Si se agita en exceso el tubo en vez de agitarlo suavemente
- Si se tira con demasiada fuerza del mbolo de la jeringa
- Al extraer sangre de hematoma
Como normas bsicas en extracciones se tendr en cuenta:
- No destapar los tubos y volverlos a cerrar ya que el tapn podra saltar por exceso de
presin y la muestra se derramara.
- Hay que respetar SIEMPRE la proporcin sangre-anticoagulante.
- Para evitar hemlisis dejar resbalar suavemente la sangre por la cara interna del tubo.
- Invertir suavemente varias veces el tubo lleno (si lleva anticoagulante), para
homogeneizar la muestra.
El ORDEN de extraccin de los tubos sera:
1. Frascos hemocultivo.
2. Tubos secos.
3. Tubos de coagulacin (citrato).
4. Tubos de VSG (citrato).
5. Tubo de hemograma (EDTA).
6. Tubos con aditivos (heparina, fluoruro oxalato.).
Consideraciones especiales en extraccin de sangre
venosa
En ocasiones en necesario realizar una extraccin de
sangre venosa a pacientes en situaciones especiales. En
estos casos es conveniente tener en cuenta una serie de
consideraciones.
1.- En pacientes sometidos a infusin intravenosa
debe elegirse un punto de extraccin sangunea en
el brazo opuesto al que se encuentra el gotero, debido
a que si se extrajese sangre de un punto por encima del
lugar de infusin se correra el riesgo de que sta se
encontrase diluida con la solucin administrada.
En el caso de que en ambos brazos se est realizando
infusin intravenosa se pueden extraer muestras (siempre
por debajo del punto de infusin) con la siguiente
sistemtica:
- El personal de enfermera debe suspender
momentneamente la infusin de lquidos.
- Esperar 2-3 minutos, colocar un compresor por debajo del
lugar de la administracin Intravenosa y seleccionar una
vena distinta de la que tiene el gotero.
- Realizar la extraccin 5 ml de sangre venosa y desecharla.
- Extraer una nueva muestra para realizar las pruebas.
- Reanudar la infusin intravenosa.
- Informar al laboratorio sobre el procedimiento que se ha
seguido en la peticin de anlisis.
2.- Cuando se solicita una muestra para la realizacin de una prueba de
alcohol en sangre no debe limpiarse con alcohol el lugar donde se va a
efectuar la puncin venosa porque puede contaminarse la muestra y
producir una falsa elevacin de los resultados. Puede limpiarse la piel
con agua y jabn pero debe de estar completamente seca antes de
intentar la puncin.
3.- Una mala extraccin venosa puede inducir a que se obtengan
resultados errneos en los estudios de coagulacin. En este tipo de
estudios es necesario que la muestra no se encuentre
hemolizada, seleccionando el segundo o tercer tubo de extraccin
para las determinaciones de coagulacin.
En el resultado de estas pruebas influye el tipo de anticoagulante
utilizado, el procedimiento de extraccin y almacenamiento. Estas
muestras no deben recogerse en recipientes hechos de cristal corriente,
sino en tubos hechos de materiales inertes que no muestren
interacciones con el sistema de coagulacin, tales como plstico, cristal
borosilicatado o cristal siliconado.
El anticoagulante de eleccin es normalmente una solucin de citrato
sdico (relacin nominal de anticoagulante y sangre de 1:9).
Se prefiere citrato tamponado para mantener el pH en un estrecho
intervalo de 7.10 a 7.35 para pruebas como el tiempo de protrombina o
el tiempo parcial de tromboplastina
4.- Se recomienda la no utilizacin de muestras recogidas de
catteres intravenosos, pero en el caso de realizarlo se
debe indicar en el volante de peticin que la muestra
se obtuvo por este procedimiento.
Despus de sacar sangre de los catteres ya colocados, se
tendr en cuenta la necesidad de heparinizar para reducir
el riesgo de trombosis. Debe mantenerse un procedimiento
estril para reducir la posibilidad de una contaminacin
bacteriana. Hay que tener en cuenta que se debe extraer y
desechar un volumen de lquido al menos el doble o triple
del que haba en el catter y si se han solicitado pruebas de
coagulacin, el volumen extrado debe ser cuatro o cinco
veces mayor, porque incluso la presencia de cantidades
mnimas de heparina pueden alterar los resultados de las
pruebas.
Extraccin de sangre capilar (puncin cutnea)
Este mtodo de extraccin sangunea se suele utilizar en nios para obtener
una pequea cantidad de muestra. Hay diferencias entre la sangre capilar y
venosa, especialmente en la prueba de tolerancia oral a la glucosa. La sangre
obtenida por la puncin cutnea se compone de una mezcla de sangre
procedente de las arteriolas, vnulas y capilares, y puede tambin estar diluida
con fluido intersticial e intracelular.
La composicin relativa de la sangre obtenida por este mtodo depender de
variables tales como el flujo de sangre a la piel durante la recoleccin. Los
lugares para la obtencin de sangre incluyen la superficie palmar de la falange
distal de cualquier dedo y la superficie plantar lateral o medial del taln.
La puncin del dedo no deber realizarse en lactantes menores de 18 meses ya
que hay una cierta probabilidad de lastimar el hueso.
A mayor profundidad de penetracin en el sitio de puncin, mayor volumen de
sangre se obtendr, por lo tanto, la lanceta debera seleccionarse segn el sitio
de puncin y la cantidad de sangre necesitada.
La profundidad de la incisin hecha en el taln de un infante es
crtica ya que una puncin ms profunda de 2,4 mm sobre la
superficie plantar del taln especialmente de nios muy
pequeos puede daar el calcneo o hueso del taln. Esto puede
evitarse con el uso de lancetas semiautomticas desechables de
flujo de seguridad. Despus de la seleccin del lugar de puncin
cutnea, y antes de realizar la misma, se debe:
- Limpiar la zona con una solucin acuosa de alcohol al 70 %
(evitar otros desinfectantes ya que pueden alterar las
concentraciones de urato, fosfatos o potasio).
- Secar el lugar con una gasa estril para asegurar que el alcohol
residual se ha eliminado.
- La puncin cutnea deber realizarse con una lanceta
desechable.
- Desechar la primera gota de sangre que fluye, ya que puede
estar contaminada con fluidos titulares.
- Recoger en el recipiente de micromuestras las gotas de sangre
que fluyen en el tubo colector realizando una ligera presin en el
lugar de puncin pero sin apretar demasiado la zona
Al terminar la recoleccin de sangre, deber cerrarse el tubo firmemente. Los
tubos que contienen aditivos debern mezclarse bien despus de la recoleccin
de la muestra, invirtiendo suavemente el tubo varias veces.
La recoleccin de muestras de sangre en tubos capilares heparinizados
destinados a las mediciones relacionadas con los gases de la sangre debera
hacerse despus de calentar la zona de puncin con una toalla empapada en
agua corriente a una temperatura no mayor de 42 C para conseguir la
arterializacin del lugar de puncin.
Los tubos capilares deben estar libres de burbujas de aire despus de la
recoleccin. Estas muestras deben colocarse durante su transporte al
laboratorio, en un recipiente con agua y trozos de hielo, para evitar que se
produzcan cambios de importancia en su pH.
Como una medida de seguridad, es aconsejable no aplicar vendajes adhesivos
sobre la zona de puncin de recin nacidos y nios pequeos, no solamente a
causa de la irritacin que el adhesivo puede ocasionar sino tambin debido a
que el vendaje podra llegar a soltarse y ser tragado por el nio.
Las lancetas desechables usadas para la puncin cutnea debern depositarse
en un contenedor de seguridad resistente a la perforacin.
Extraccin de sangre arterial
La puncin arterial se lleva a cabo para realizar una gasometra arterial
(que puede indicar problemas respiratorios o de trastornos
metablicos). Sin embargo, las punciones arteriales se realizan
ocasionalmente para obtener un cultivo de sangre o muestras para
qumica srica.
Para realizar este examen se toma una muestra de sangre arterial con
una aguja pequea; dicha muestra puede tomarse de la arteria radial de
la mueca, de la arteria femoral en la ingle (no recomendada en nios
recin nacidos por la posibilidad de lesionar la cadera y la vena y nervio
femoral) o de la arteria braquial en el brazo. Esta ltima es ms difcil
de pinchar, y adems, el nervio mediano descansa cerca de la arteria
braquial.
Tambin se puede realizar la extraccin de la arteria peda dorsal, en la
parte superior del pie, en situaciones especiales como lesiones en
brazos, quemaduras, etc.
La arteria temporal se utiliza especialmente en nios pequeos.
Despus de extraer la sangre arterial, se debe aplicar presin en el
lugar de la puncin durante por lo menos cinco minutos para
detener el sangrado. Si el paciente est recibiendo un
tratamiento anticoagulante o si tiene un tiempo de coagulacin
prolongado, debe mantenerse la presin ms tiempo. Dos
minutos despus de comenzar a aplicar la presin, hay que
inspeccionar de nuevo el lugar para cerciorarse de que no se est
desarrollando un hematoma. Si la hemorragia no cesa dentro de
un tiempo razonable, hay que avisar al mdico encargado del
paciente.
Hay que comprobar si la jeringa tiene burbujas de aire.
Se quita la aguja y se tapa la jeringa con un tapn o se pincha la
aguja en un tapn para hacer que la jeringa sea impermeable al
aire y al agua. El doblar la aguja es una prctica INACEPTABLE.
La muestra debe enviarse inmediatamente al laboratorio para su
anlisis, de lo contrario, la exactitud de los resultados no se
puede garantizar.
- Paciente no estabilizado
Factores que pueden
Es imprescindible alterarrepose
que el paciente los resultados
unos 10-15 minutos antes de la
extraccin, si tiene ventilacin asistida las constantes deben estar
estables 20 min antes de la extraccin. Se debe minimizar la ansiedad y
el dolor ya que afectan al patrn respiratorio.
- Burbujas de aire
Las burbujas de aire pueden alterar en gran medida el valor de la pO2,
dependiendo de la cantidad y tamao de las mismas; cuanto ms
pequeas sean las burbujas, mayor ser la superficie de contacto con la
sangre, y ms rpidamente se producir la variacin.
Una vez obtenida una muestra deben eliminarse inmediatamente las
posibles burbujas que haya en ella, y sellar hermticamente la jeringa
con un tapn en el cono.
Las muestras de gases en sangre deben ser anaerobias, por tanto, las
que contengan burbujas se rechazarn.
- Dilucin con la heparina
El uso de heparina lquida para heparinizar la jeringa con que se va a
realizar la extraccin, puede provocar errores en la medicin como
consecuencia de la dilucin de la muestra. Este problema se evita si
usamos heparina liofilizada.
- Refrigeracin
La forma de eliminar o limitar los procesos metablicos de la muestra
es refrigerndola en un frigorfico hasta el momento de la medicin.
Est especialmente contraindicada la inmersin en un recipiente con
hielo despus de su extraccin, debido a los procesos de hemlisis que
provocan las grandes diferencias de temperatura que el contacto con el
hielo produce.
- Tiempo
La muestra debe ser entregada en el laboratorio para su anlisis antes
de 15 minutos.
- Cogulos
Debe rechazarse cualquier muestra que contenga cogulos. Los
cogulos tienden a formarse cuando se hace difcil realizar una puncin
y la sangre no se mezcla bien con la heparina o queda estancada en la
aguja.
ORINA
Las muestras de orina son utilizadas por el laboratorio para
diagnosticar y controlar el tratamiento de las enfermedades
del rin o del tracto urinario y en la deteccin de
enfermedades metablicas o sistmicas. Los mtodos y
horarios de recogida de las muestras dependen de las
pruebas solicitadas por el mdico.
Son muchos los parmetros susceptibles de analizarse en
orina. Actualmente, las determinaciones en orina que
representan el mayor volumen de trabajo en el laboratorio
es el Sistemtico de orina mediante tiras multirreactivas
junto con el anlisis del sedimento urinario y los
urocultivos.
Orina de miccin aislada
El anlisis sistemtico de orina y sedimento se
solicita en funcin de una gran variedad de
indicaciones que incluyen:
Ayuda en el diagnstico de enfermedades.
Seguimiento del progreso de enfermedades.
Cribados poblacionales a pacientes asintomticos
o con enfermedades congnitas.
Control de la eficacia de los tratamientos
Toma de muestra orina miccin aislada
Se prefiere la orina de 1 hora de la maana ya que presenta una mayor
osmolalidad, lo que refleja la capacidad que presenta el rin para concentrar
la orina. En esta orina de 1 hora se encuentran ms concentrados elementos
como leucocitos, bacterias, cilindros, hemates, optimizndose as el
rendimiento diagnstico de las pruebas de laboratorio.
Adems, presenta menores fluctuaciones en las determinaciones influidas por
la dieta, actividad fsica, etc.
Las orinas de miccin aislada obtenidas de forma aleatoria se aceptan en
situaciones especiales como analticas urgentes.
Se debe recoger la orina de la porcin media de la miccin . Se recomienda
lavado previo de genitales externos con jabn y aclarado posterior con
abundante agua (si la orina se contamina con jabn pueden verse afectados
determinados parmetros como pH, o incluso el crecimiento bacteriano puede
verse inhibido).
En los pacientes peditricos se deben utilizar bolsas colectoras con adhesivos
hipoalergnicos, cambindose cada 15-20 minutos para evitar contaminaciones.
El procedimiento de recogida de la muestra es realizado por el propio paciente,
por lo que debe estar informado correctamente, verbal y por escrito; adems, el
procedimiento vara para hombres, mujeres y nios.
Es fundamental extremar en esta tcnica las condiciones higinicas para
asegurar la esterilidad de la muestra.
Tcnicas para mujeres
Se recoger la primera orina de la maana.
Lavarse las manos cuidadosamente con agua y jabn.
Lavarse despus la zona perineal, separando los labios mayores
(que se mantendrn as en todo momento), con agua, jabn y
una gasa que se pasar de delante hacia atrs; repetir el proceso
varias veces.
Enjuagar con agua para eliminar los restos de jabn,
manteniendo siempre los labios separados.
Empezar a orinar en el W.C. desechando los 20-25 primeros
mililitros, tras lo cual y sin interrumpir la miccin, recoger la
orina en el recipiente, sin que sta toque la piel.
El frasco debe sujetarse para que no tenga contacto con las
piernas, vulva o ropa del paciente. Los dedos no deben tocar el
borde del frasco o su superficie interna.
Tcnica para hombres
Se recoger la primera orina de la maana.
Lavarse las manos cuidadosamente con agua y jabn.
Retraer completamente el prepucio, que se mantendr as en
todo momento, hasta que se haya recogido la orina.
Lavarse el glande con agua, jabn y una gasa.
Enjuagar los restos de jabn con agua, manteniendo el prepucio
retrado.
Empezar a orinar en el W.C. desechando los primeros 20-25
mililitros y, sin interrumpir la miccin, recoger el resto de la
orina en el recipiente estril.
El frasco debe sujetarse para que no tenga contacto con las
piernas, piel o ropa del paciente. Los dedos no deben tocar el
borde del frasco o su superficie interna.
Tcnica para nios
En nios y nias ms pequeos, la orina se recoger en colectores o bolsas
estriles especialmente diseadas para ellos de la siguiente forma:
Lavado cuidadoso de los genitales y rea perineal igual que en los adultos.
Colocar la bolsa de plstico o el colector estril.
Retirar la bolsa en cuanto el nio haya orinado.
Cada 20 minutos debe cambiarse la bolsa y reiniciar el proceso.
Se recomienda obtener un volumen mnimo de orina de 8-12 ml para el anlisis
de anormales y sedimento. Se pueden aceptar volmenes menores en muestras
procedentes de nios o pacientes oligo-anricos.
Para cultivo bacteriano se necesita un volumen mnimo de orina (1-10 ml de
orina). Sin embargo, para el cultivo de hongos y virus, se necesitan volmenes
mayores (20-50 ml de muestra). Para la bsqueda de micobacterias, la orina se
recoge durante tres das consecutivos, en este caso el volumen de orina debe ser
100-150 ml. En el caso de parsitos se recoger la orina de 24 horas.
A continuacin se muestra esquemticamente el volumen de orina
recomendado para las diferentes determinaciones:
Los contenedores donde se recoge la muestra de orina deben ser
limpios, de boca ancha y con tapa de rosca. Los recipientes
utilizados para cultivo microbiolgico debern ser
obligatoriamente estriles.
El personal encargado de recepcionar la muestra deber
alicuotarlas previa homogeneizacin de las mismas y deber
etiquetarlas correctamente. Las muestras se trasportarn al
laboratorio en el menor tiempo posible. Si el anlisis se va a
demorar ms de dos horas el transporte deber ser refrigerado (2-
8C), aunque esta medida puede producir la precipitacin de
uratos o fosfatos amorfos.
Para el anlisis sistemtico de orina y sedimento no se
recomienda el uso de ningn conservante qumico, aunque si el
anlisis se va a demorar pueden utilizarse recipientes con
conservantes (cido brico), principalmente si la muestra va
destinada a urocultivo.
Tanto para anormales y sedimento como para urocultivo la
muestra debe procesarse en las 2-3 horas posteriores a su
recogida, ya que algunos analitos pueden verse afectados.
As, las bacterias a Temperatura ambiente se
multiplican constantemente, y pueden modificar
la glucosa y el pH. El calcio, oxalato, cido rico
tienden a formar cristales a pH fisiolgico.
Tambin, se ha comprobado que los hemates son
especialmente sensibles a la lisis si se demora el
anlisis. El resto de parmetros suele ser estable
durante 24 h si se mantiene la orina refrigerada
(excepto en orinas muy diluidas o Ph muy
alcalino).
Sedimento urinario
El anlisis del sedimento microscpico de forma manual
presenta falta de precisin y una gran variabilidad
interobservador. Para disminuir los factores que afecten a la
reproductibilidad de la tcnica se ha de estandarizar el
procedimiento preanaltico de la muestra:
Partir de un volumen de orina de 8-12 ml
Centrifugar 5 minutos a 1500 rpm
El factor de concentracin del sedimento depende del volumen
inicial y final de orina tras decantacin (1:8, 1:10, 1:12)
Volumen de sedimento a examinar segn la capacidad de la
lmina
Dejar reposar el sedimento en la lmina 1 minuto
Observar microscpicamente al menos 10 campos (x40)
Orina de 24 horas
La orina recogida durante 24h se obtiene con el fin de
conseguir una muestra homognea y representativa de los
analitos que se excretan de forma inconstante a lo largo del
da.
Sin embargo, la recogida de orina de 24h es un
procedimiento engorroso sujeto a numerosos errores
preanalticos y de estabilidad de los analitos.
En algunas de estas frmulas intervienen determinaciones
en suero de albmina, creatinina, urea, factores
antropomtricos como peso o superficie corporal y
caractersticas demogrficas como sexo, edad y raza.
Recogida de orina de 24 h
Debido a los errores preanalticos que pueden surgir por
una recogida inadecuada de la orina de 24h, el paciente
debe ser informado de forma oral y escrita del
procedimiento de toma de muestra.
Cuando se entreguen recipientes que contengan
conservantes que puedan suponer un riesgo para el
paciente se deber informar oralmente sobre la forma
correcta de manipulacin del envase.
Igualmente, el paciente debe ser informado si las
determinaciones a realizar necesitan algn tipo de dieta
previa o si existe algn tipo de interferencia farmacolgica.
Conservantes para orina de 24 h
En ocasiones en necesario aadir a la orina de 24 h
determinados conservantes antes de comenzar el proceso
de recogida con el fin de evitar el deterioro de algunos
analitos. El conservante ser suministrado por el
laboratorio, y el personal encargado deber informar
debidamente al paciente sobre las precauciones que ha de
tomar y del riesgo que implica manipular los recipientes
con ciertas sustancias.
Si existen varias opciones de conservacin de la muestra se
optar siempre por la menos peligrosa para el paciente.
Si los anlisis a realizar requieren el uso de diferentes
conservantes se citar al paciente en das distintos a pesar
de que puede resultar algo incmodo para el paciente.
Principales metabolitos en orina de 24 h. que necesitan
conservantes

cido 5- aminolevulnico
Este metabolito es estable a pH < 5.5, por lo que se
debe recoger con cido actico como conservante. En
los casos en los que se solicite junto con otras
determinaciones como Porfobilingeno y Porfirinas,
(inestables en medio cido) se recomienda utilizar
carbonato sdico previa recogida de la orina y congelar
inmediatamente una alcuota para el anlisis de ALA.
La muestra congelada es estable durante 10 das.
La muestra debe protegerse de la luz (usar recipientes
opacos).
cido 5-hidroxiindolactico
Recoger la muestra con 10 ml de cido clorhdrico 6N como
conservante. Se puede recoger la muestra sobre 10g de
cido brico con refrigeracin o incluso nicamente
refrigerada sin conservantes, ajustando posteriormente el
pH en el laboratorio adicionando cido clorhdrico.
Estabilidad: 2 semanas a 4C y 1 mes a -20C.
Condiciones especiales a tener en cuenta:
- Suprimir de la dieta durante 3-4 das antes del anlisis
alimentos como pltanos, berenjenas, pia, ciruelas y
nueces as como frmacos como Reserpina (pueden
aumentar falsamente los niveles de c 5- OH-
IndolActico).
cido homovalnico
Utilizar como conservante 10 ml de cido clorhdrico 6N o 15 ml
de cido Actico
Estabilidad: 24 h a 4C . Si no se va a analizar en las primeras 24 h
congelar.
cido rico
El cido rico precipita a pH cido, por lo que para su
determinacin se deber ajustar el pH en el laboratorio hasta
alcanzar un valor superior a 6 aadindole Carbonato Sdico o
Hidrxido Sdico y dejando reposar la orina 1 hora para que se
redisuelvan los cristales que se hayan podido formar.
cido vanilmandlico
Recoger sobre 10 ml de cido clorhdrico 6N y refrigerarse
durante recoleccin.
Estabilidad: 24h a 4C. Congelar para tiempos mayores.
Interferencias: Frmacos como L-Dopa usada en Prkinson
aumenta la excrecin de AVM. La Iproniazida y Pergilina pueden
reducir la excrecin de AVM.
Microalbuminuria
Se recomienda utilizar orina refrigerada sin conservantes. Se admite la orina
recogida sobre cido brico o sobre cido actico glacial. Las orinas muy cidas
precipitan las protenas.
Estabilidad: 7 das a Temperatura ambiente, 4C durante 2 semanas y a -5C
durante 5 meses. Las orinas congeladas se deben de homogeneizar antes de
usarlas para determinacin de microalbmina.
Interferencias en la determinacin de microalbmina:
- Ejercicio fsico intenso
- Infeccin del tracto urinario
- Despus de ciruga
- Tras ingestin de grandes cantidades de lquido
Calcio
Se recomienda recogerlo sobre cido clorhdrico 6N (aunque se puede
acidificar posteriormente en el laboratorio dejndolo reposar al menos 1 h para
que se redisuelvan los cristales de calcio que hayan podido precipitar).
Estabilidad: a pH cido es estable durante 2 das a Temperatura ambiente, 4
das refrigerada 4-8C y ms de 3 semanas congelada.
La excrecin de calcio en orina tambin puede determinarse en orina de
miccin aislada (preferentemente 2 orina de la maana) calculando el cociente
Calcio/Creatinina, til principalmente en nios incontinentes en los que es
difcil recoger orina a tiempo controlado.
Catecolaminas
Debe recogerse la orina sobre 10 ml de cido Clorhdrico 6N y mantener la orina
refrigerada.
Estabilidad: 24 h a 4C. Para periodos ms largos mantener congelada.
Frmacos que pueden interferir en la determinacin de catecolaminas:
- alfa-metildopa
- alfa-metil noradrenalina
- alfa-metildopamina
- isoproterenol
Se recomienda que durante tres das previos a la recogida de orina se mantenga una dieta
normosdica, e ingerir al menos un litro de agua diario. A valorar por el mdico la
supresin de medicamentos tipo hipotensores, sedantes, tranquilizantes, salicilatos,
tetracicilinas al menos un semana antes de realizar el test.
Citrato
Se recomienda recogerlo sobre cido clorhdrico 6N o bien mantener refrigerado y aadir
posteriormente el cido en el laboratorio y dejndolo homogeneizar.
Estabilidad: 24 h a Temperatura ambiente y 1 semana congelada.
Cortisol
Se puede recoger la orina sin conservante, mantenindola refrigerada. Admite el uso de
algunos conservantes como cido brico, cido actico o cido clorhdrico.
Estabilidad: 48 h a Temperatura ambiente, y una semana a 4C.
Creatinina
Recoger la orina sin conservante, aunque se admite orina acidificada.
Estabilidad: 48 h Temperatura ambiente, 4C durante 1 semana y -20C
durante 6 meses.
Su concentracin aumenta tras ejercicio fsico, y dieta rica en carne.
Fsforo
Se recomienda recogerlo sobre conservante cido aunque tambin se
puede recoger sin conservante y adicionar ste posteriormente en el
laboratorio dejando homogeneizar la muestra durante 1 hora para que
se redisuelvan los cristales de fosfato que se hayan formado.
Estabilidad: a pH cido es estable durante 48h a Temperatura ambiente
y durante 6 meses refrigerada 4-8C.
La excrecin de fsforo en orina tambin se puede determinar en orina
de miccin aislada (se prefiere orina de 2 hora de la maana)
calculando el cociente fsforo/creatinina.
Glucosa
Recoger muestra de orina sin conservantes, refrigerada. Tambin se
admite orina recogida con cido brico como conservante.
Estabilidad: 2 h a Temperatura ambiente o 48 h congelada.
Porfobilingeno
La recogida es igual que para las porfirinas, pero admite pH
ligeramente cido, por lo
que se puede recoger sobre cido actico glacial, principalmente
si se solicita la determinacin de porfobilingeno con ALA y no
con porfirinas.
Protenas
Recoger muestra de orina sin conservantes, refrigerada (se
admite el uso de cido brico como estabilizante). No se admite
orinas recogidas sobre cido clorhdrico ya que precipitan.
Estabilidad: 24 h a Temperatura ambiente, 4C durante 7 das y 1
mes a -20C.
Urea
Recoger muestra de orina sin conservante, refrigerada.
Estabilidad: 48 h a Temperatura ambiente, 1 semana a 4C y 1
mes a -20C.
El examen de heces est indicado en las diarreas
HECES
crnicas y de forma general en los procesos que cursan
con insuficiencia digestiva, o en los que se busca un
germen o parsito de la enfermedad.
La determinacin de sangre oculta en heces tiene
inters cuando se sospecha hemorragia digestiva
subclnica.
Preparacin al paciente. Toma de
muestra
Durante los 3 das previos a la recogida de muestra se debe evitar:
1.-Medicamentos opacos no absorbibles:
Compuestos farmacuticos que contengan carbn vegetal, sales de magnesio,
caoln, creta o benzonaftol.
Productos opacos radiolgicos.
Sustancias grasas: aceites, laxantes, supositorios.
Su presencia en heces hace el examen microscpico inviable, ya que aumenta el
volumen del sedimento de centrifugacin, o el volumen de pelculas de
flotacin, causando errores de identificacin.
2. Alimentos que dejan muchos residuos:
Cereales, coles, ensaladas...
Frutas de cutcula resistente (tomates, melocotones...).
Granos de envoltura dura (guisantes, lentejas, ..).
Las heces deben ponerse en un frasco limpio, con cierre hermtico y el anlisis
se realizar dentro de las 12 horas siguientes a la deposicin, mantenindose en
la nevera a 4 C.
Test Sangre Oculta en heces
Se recomienda recoger muestras seriadas en das diferentes, en diferentes
frascos y conservar en nevera hasta envo al laboratorio.
Durante los 3 das anteriores a la toma de muestras, consistir en un rgimen
sin carne, embutidos, pescados, huevos, lentejas, espinacas ni pltanos.
Tampoco medicamentos que contengan hierro o hemoglobina y debe evitarse
todo tipo de legumbres verdes.
Se permitir: leche, cebollas, arroz, pan, garbanzos.
Digestin (principios inmediatos)
En los das previos a la prueba debe de seguirse la alimentacin habitual
siempre que contenga grasa, protenas y almidones. Interrumpir toma de
bismuto, carbn supositorios o parafina y estudios baritados.
Parsitos en Heces
Es aconsejable que en los tres das previos al estudio parasitolgico, el enfermo
siga una dieta en la que queden restringidos, medicamentos, papilla de bario,
patatas, verduras, legumbres y frutas.
En ocasiones puede ser necesaria la administracin de un purgante salino,
como sulfato de sodio o fosfato y carbonato de sodio. No deben usarse aceites
minerales o compuestos de bismuto o magnesio, ya que las gotas o cristales
procedentes de ellos pueden enmascarar los parsitos o confundirse con
trofozoitos.
Con una cucharilla se recoger una pequea cantidad de heces recin
emitidas y se enviarn en un recipiente estril con tapa de rosca.
Cuando macroscpicamente se hayan visto formas compatibles con
parsitos en el ano o en las heces, se recogern en el recipiente y se
aadir una pequea cantidad de suero fisiolgico.
Es suficiente un volumen de heces similar a una cucharada de caf (2-4
g).
Un estudio parasitolgico completo debe constar de tres muestras
recogidas en das sucesivos, ya que la expulsin de parsitos puede ser
intermitente.
Si las muestras tardaran mucho en ser examinadas, debern ser
mantenidas a temperatura ambiente o ligeramente frescas y nunca en
estufa o nevera, a cuya temperatura se destruyen muchos parsitos.
Pero si el retraso va a ser grande, para preservar huevos, larvas o
quistes, se deben mezclar las heces con algn conservante que evite su
destruccin (Formol al 5-10%; se mezcla un volumen de la muestra con
tres del formol as diluido).
Test de Graham para determinacin de Enterovius
Vermicularis
Consiste en el empleo de un depresor de lengua (madera,
plstico, etc.), de 7-8 cm de longitud por 1,5 cm de anchura,
en uno de cuyos extremos se coloca la cinta de papel
adhesivo transparente con la cara engomada hacia fuera, o
sea, contraria al depresor. Por la maana, antes de
levantarse el explorado, se separan las nalgas y se hace
presin hacia ambos mrgenes, para que en la cara
engomada queden adheridos los huevos.
La cinta adhesiva se coloca sobre un portaobjetos con la
cara engomada hacia el cristal, y se enva al laboratorio en
un sobre o envuelto en varias capas de papel.
LQUIDOS BIOLGICOS
Lquido cefalorraqudeo
El diagnstico y tratamiento correcto de una enfermedad del SNC puede
depender de los resultados del examen del LCR en el laboratorio; debido a esto,
este lquido tiene que extraerse y manipularse correctamente.
El LCR es normalmente estril y puede obtenerse mediante puncin lumbar o,
con menos frecuencia, por puncin cisternal, cervical o ventricular; cada uno
de estos procedimientos debe ser realizado aspticamente por un mdico con
experiencia en el mismo y alertado el paciente sobre sus indicaciones y posibles
complicaciones.
La zona de puncin es generalmente la lumbar, pero tambin habra de
nombrarse la ventricular, suboccipital o por una derivacin.
Se debe marcar y desinfectar la zona de puncin. Es deseable para el paciente
un tratamiento paliativo del dolor con un anestsico local. La puncin deber
ser sagital y ligeramente inclinada hacia arriba (20).
La cantidad que se recoja depender de la situacin clnica, cuando se estn
buscando clulas tumorales, es importante obtener tanto lquido
cefalorraqudeo como se pueda (hasta 30 ml sera un volumen ptimo en
adultos).
El tiempo de recoleccin de la muestra deber ser tan largo como sea posible,
usando una aguja lo ms fina posible, para evitar el dolor de cabeza siguiente a
la puncin.
Factores a tener en cuenta durante la toma de muestra:
El paciente en ayunas,
Debe anotarse la hora en que se toma la muestra, junto con
informacin sobre cualquier tratamiento inicial (p. ej. en la
meningitis bacteriana).
Con el fin de evitar la contaminacin de la muestra, se debe
obtener y transportar el lquido cefalorraqudeo en tubos
cerrados.
El lquido cefalorraqudeo deber distribuirse, en condiciones
aspticas, en varios tubos de poliestireno transparente con tapn
(estriles y sin aditivos). Para citologa, debe evitarse el uso de
aditivos tales como EDTA y fluoruro..
Los pacientes debern guardar reposo tendidos boca abajo al
menos durante 30 minutos para evitar prdidas subsiguientes.
Es muy importante despus de tomada la muestra, enviarla al
laboratorio lo antes posible por el medio ms rpido.
Indicaciones a tener en cuenta para la recoleccin de
muestras de lquido cefalorraqudeo:

En ocasiones es til la recoleccin de muestras en diferentes


porciones indicando la secuencia de llenado ya que facilita la
determinacin del origen de los posibles hematies.
No es aconsejable el uso de guantes empolvados con talco
cuando se est extrayendo lquido cefalorraqudeo, ya que podra
alterar el examen citolgico del lquido cefalorraqudeo.
El LCR debe ser centrifugado de inmediato. Si la centrifugacin
se lleva a cabo rpidamente, la sangre proveniente de una
puncin traumtica no generar xantocroma.
La congelacin del lquido cefalorraqudeo es mejor llevarla a
cabo a -70C que a -20C ya que, por ejemplo, las bandas de
protenas oligoclonales desaparecen lentamente despus de estar
almacenadas durante unos 6 meses a -20C.
Lquidos serosos; lquidos pleural, pericrdico y peritoneal

Los lquidos serosos son lquidos corporales que derivan del


plasma y se encuentran en la cavidad pleural, pericrdica y
peritoneal. Los lquidos serosos son ultrafiltrados del plasma que
derivan de la abundante red capilar de la membrana serosa.
El examen del lquido en el laboratorio puede suministrar con
frecuencia una informacin diagnstica de utilidad sobre las
alteraciones que han motivado su formacin y servir de gua para
un tratamiento adicional.
Se denomina paracentesis la extraccin de lquido de una cavidad
serosa del organismo mediante aspiracin percutnea.
Adems de su valor diagnstico, la paracentesis, que debe ser
hecha con una tcnica asptica por un mdico con experiencia en
el procedimiento y al corriente de sus indicaciones y
complicaciones potenciales, puede contribuir a mejorar los
sntomas del derrame, facilitar una descompresin de un rgano
que supona un peligro para la vida del paciente, o permitir la
instilacin de frmacos en una de las cavidades corporales.
Debido a que la mayora de los derrames son abundantes
(generalmente ms de 100 ml), es fcil obtener suficiente lquido
para realizar todas las pruebas diagnsticas de laboratorio.
Debe bastar una muestra de 50 ml para realizar un examen
completo de laboratorio. El lquido debe transportarse
rpidamente al laboratorio (en la hora que sigue a su recogida) o,
si el retraso es inevitable, debe estar refrigerado a 4C para evitar
el crecimiento bacteriano y la alteracin de los componentes
celulares, o de la composicin qumica.
Para los estudios de bioqumica el lquido debe recogerse sobre
un recipiente estril y tapn de rosca (8-10 ml), dejar que
coagulen las muestras y eliminar el cogulo o cualquier otro
material en suspensin (ej. clulas) mediante centrifugacin. Se
aconseja procesar paralelamente sangre del paciente.
Para los estudios de citologa se proceder igual pero utilizando
el tubo con EDTA (1 mg/ml) como anticoagulante, no debe
usarse citrato sdico u oxalato. Las clulas se conservan
relativamente bien entre 24 y 48 horas si las muestras se
mantienen refrigeradas.
Estudios Microbiolgicos
Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera la
investigacin de Mycobacterium sp. u hongos se enviar un volumen superior a 10 ml.
Esta es la mnima cantidad necesaria para el estudio bacteriolgico del lquido empleado
en la dilisis peritoneal.
Si es necesario evitar la coagulacin de algunos de estos lquidos se usar heparina sin
conservantes; otros anticoagulantes pueden tener accin bacteriana.
Los recipientes idneos son tubos estriles de tapn de rosca o de presin negativa sin
conservantes. Se llenarn hasta cerca del tapn, de esta forma pueden ser tiles para el
estudio de anaerobios, especialmente si la muestra es purulenta.
Es aconsejable para este tipo de muestras inocular paralelamente, en el lugar de la
extraccin, dos frascos de hemocultivo, uno para aerobios y otro para anaerobios.
Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio y hasta su procesamiento
se mantendrn a temperatura ambiente.
Cuando las muestras se destinen a la investigacin de micobacterias y hongos, debern
mantenerse en nevera.
Los hemocultivos se mantendrn entre 35C y 37C, o en su defecto a temperatura
ambiente.
Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringuilla y aguja para hacer la
extraccin de la muestra, ya que los anestsicos pueden inhibir el crecimiento bacteriano.
Lquido Sinovial
Los trastornos de la membrana sinovial, la alteracin en los elementos de sostn articular
y la presencia de cuerpos extraos pueden producir la acumulacin de grandes
cantidades de lquido sinovial en las articulaciones. Su posterior anlisis en el laboratorio
puede ser decisivo para el diagnstico de la patologa subyacente.
La obtencin del lquido debe realizarse con una jeringa sin anticoagulante. Una vez
recogida la muestra, en funcin del volumen obtenido, debe distribuirse en los diferentes
contenedores necesarios para realizar su estudio:
a - Tubo estril para examen microbiolgico.
b - Tubo sin aditivos para el estudio de cristales.
c - Tubo heparinizado o con EDTA para el recuento celular.
Para el estudio bioqumico puede utilizarse el tubo b o el tubo c. La observacin
microscpica de los cristales debe realizarse en el menor tiempo posible tras la
artrocentesis y siempre sin anticoagulante para evitar la aparicin de artefactos.
La muestra obtenida debe ser transportada al laboratorio a la mayor brevedad posible,
para evitar la degeneracin celular. Si existe demora en el transporte, es necesario
conservar la muestra a temperatura entre 2 y 8 C para reducir el metabolismo celular, a
excepcin de la muestra para cultivo que ha de transportarse a temperatura ambiente. En
este caso tambin puede utilizarse un tubo con EDTA-fluoruro para el estudio
bioqumico y recuento celular.
La muestra destinada al estudio bioqumico debe ser centrifugada de inmediato para
separarla del contenido celular.
Lquido Seminal
Las instrucciones sobre la toma de muestra y las condiciones preanalticas a
seguir sern facilitadas al paciente tanto por el clnico que solicita el anlisis
como por el laboratorio mediante hoja informativa supervisada por el
facultativo. Las recomendaciones a seguir son:
Perodo de abstinencia
Debe guardarse abstinencia sexual durante un periodo entre 3 y 5 das (y
no ms de 7 das), lo que implica no tener ninguna prdida de semen por
coito, masturbacin, polucin nocturna o cualquier otra circunstancia durante
estos das.
Si el perodo de abstinencia es inferior a 48 horas, la muestra se debe
considerar como no vlida para su estudio. Si va a ser sometida a
tratamiento para su uso en tcnicas de reproduccin asistida, su utilizacin es
inevitable pero conviene que el paciente sea advertido de la posible prdida de
calidad de la muestra entregada.
Medidas higinicas
Lavarse el pene con jabn y aclararse abundantemente con agua para evitar
restos de jabn. No se debe aplicar ningn tipo de pomada. Recoger la muestra
sobre un frasco de plstico de boca ancha estril, cerrndolo con su tapa tras la
obtencin del semen.
Lugar de obtencin
Es importante recoger la muestra en una sala anexa o prxima al laboratorio
para asegurar el tiempo transcurrido desde la obtencin hasta el inicio del
estudio.
Tambin la muestra se puede obtener en el domicilio del paciente hacindola
llegar al laboratorio lo antes posible, preferiblemente antes de que hayan
transcurrido 30 minutos desde la obtencin del semen y siempre antes
de los 60 minutos, protegindola durante el transporte de cambios de
temperatura (envolviendo el frasco en papel de aluminio, guardndolo en un
bolsillo en contacto con el cuerpo) y siguiendo la normativa horaria de
recepcin de muestras que indique el laboratorio al pedir la cita.
Obtencin de la muestra
La muestra debe obtenerse por masturbacin, los preservativos no pueden
usarse debido a que contienen lubricantes y espermicidas y el coitus
interruptus es inaceptable debido a que la primera fraccin, rica en
espermatozoides, se puede perder fcilmente.
Es importante recoger el contenido total de la eyaculacin. En caso de que se
pierda o se vierta alguna cantidad, por pequea que sea, el paciente deber
comunicarlo al personal de laboratorio ya que para el estudio de fertilidad la
muestra no sera vlida.
Recepcin de la muestra y anamnesis
El personal del laboratorio debe identificar el frasco para la obtencin de semen en el momento de
entrega por el paciente junto con el formulario de solicitud y la hoja de trabajo del laboratorio.
La hoja de trabajo consta de los siguientes apartados:
-Etiqueta de identificacin de la muestra
-Primer apellido
-Segundo apellido
-Nombre
-Edad
-Telfono
-N de hijos
- Motivo del anlisis
La persona que recibe la muestra, deber efectuar una breve entrevista al paciente referente a:
Hora de recogida de la muestra.
Das de abstinencia sexual (mnimo 72 h y mximo 7 das). Si es inferior, la muestra no se deber
aceptar en caso de su uso para estudio diagnstico. Se citar otro da al paciente.
Recogida completa del volumen del eyaculado: en caso de prdida, si se trata de un estudio
diagnstico la muestra no es vlida.
Posibles procesos febriles en los 3 ltimos meses: Las altas temperaturas pueden afectar al
espermatozoide en cualquiera de las fases previas a la eyaculacin.
Motivo del anlisis de semen y si se ha realizado anlisis seminales anteriormente.
El personal del laboratorio debe saber que las muestras de semen, al igual que cualquier otra
muestra en el laboratorio, pueden contener virus patgenos (HIV, virus de hepatitis, herpes)
y por consiguiente deben ser manejadas con cuidado.
El establecimiento de criterios de aceptacin-rechazo de los
CRITERIOS PARA
especmenes o lasEL RECHAZO
muestras DE MUESTRAS
obtenidos que llegan al laboratorio,
debe ser una de las medidas a tomar para el establecimiento de
un sistema de calidad adecuado.
En el laboratorio no podemos aumentar la calidad de las
muestras que van a ser analizadas y por tanto debemos
asegurarnos no malgastar tiempo y recursos en muestras
de baja calidad, que por definicin proporcionan
resultados no fiables.
Este es uno de los aspectos ms crticos de la actividad
preanaltica. No existe una lnea clara que diferencie cundo
la calidad de una muestra no es vlida, el laboratorio debe
fijar su criterio (no procesar si puede obtenerse nueva
muestra, procesar acompandolo de un comentario sobre
la calidad de la muestra, etc.). La prctica demuestra que el
laboratorio que acepta prcticamente todo lo que entra deja de
poder garantizar la calidad de sus anlisis.
Las causas ms frecuentes
Cumplimentacin de rechazo
incorrecta de especmenes
del llenado son:
de solicitudes
Con el fin de evitar un elevado nmero de devoluciones de
muestras, se podran guardar durante un tiempo establecido (Ej.:
3-4 das) aquellas muestras cuyos solicitudes no estuvieran
correctamente rellenos e intentar contactar con el mdico
solicitante para que nos facilitara los datos necesarios y entonces
realizar el ensayo siempre y cuando las condiciones preanalticas
lo permitieran. Esta medida podra ser al principio
contraproducente pero sera una buena labor de formacin
hacia los mdicos solicitantes, que luego repercutira en
beneficio del paciente, disminuyndose el nmero de
incidencias originadas por esta causa.
Un caso especial es el de las muestras que son de difcil
obtencin o rpido deterioro (LCR, gases). La recomendacin
habitual es procesar dichas muestras, pero obligar a que el
responsable de la extraccin acuda al laboratorio para dejar
constancia escrita del error y asuma la responsabilidad de las
posibles consecuencias de una identificacin errnea
Utilizacin de contenedor inadecuado:
En el manual de toma de muestras debe quedar bien claro el tipo
de recipiente/tubo adecuado para cada determinacin.
Hay determinados analitos que se pueden determinar
indistintamente en diferentes tipos de muestras (por ejemplo,
creatina-cinasa o colesterol), y tambin hay ciertos analitos para
los que bajo ninguna circunstancia se admite otra muestra
diferente a la estipulada (por ejemplo, el litio, cuya
concentracin lgicamente no se puede determinar en plasma
obtenido con Heparina de Litio).
Volumen de muestra incorrecto:
Este criterio de rechazo de muestras es crtico en la
determinacin de las pruebas de coagulacin o en la velocidad de
sedimentacin globular, ya que se debe mantener la proporcin
exacta entre el volumen de muestra y el de anticoagulante. Los
tubos de llenado por vaco estn preparados para que el volumen
de muestra que entre sea el correcto. Cuando se llenan los tubos
con jeringa debe tenerse mucho cuidado especialmente para las
determinaciones que exigen que esta proporcin sea exacta.
Hemlisis:
Se produce por diferentes motivos que deben ser evitados:
Venopuncin difcil, manejo incorrecto del espcimen obtenido,
consecuencia de una enfermedad que produzca destruccin in vivo de
los eritrocitos.
El grado de interferencia de la hemlisis depende evidentemente de la
intensidad de la misma, de la concentracin real del analito y de la
metodologa empleada.
Muestra lipmica:
Aquella muestra de plasma o suero con alto contenido en grasa.
Presenta un aspecto blanquecino, y puede deberse a una extraccin de
una muestra de un enfermo con alimentacin parenteral o tras una
ingesta copiosa. Hay determinaciones cuyos resultados se alteran
cuando existe este problema.
Muestra coagulada:
Aquella muestra que se presenta coagulada parcial o totalmente, y que
se extrajo con anticoagulante en el tubo. Puede deberse a una
extraccin lenta, a una mezcla incorrecta del anticoagulante con la
muestra o a un defecto del propio anticoagulante. Hay determinaciones
cuyos resultados se alteran cuando existe este problema.
Muestra insuficiente:
Aquella muestra a la que no se le pueden realizar todas las
determinaciones solicitadas al agotar el espcimen. No entrar en esta
categora la muestra que se agote por una repeticin o por un mal
procesamiento en el Laboratorio.
Muestra no recibida:
Aquella muestra que no se ha recibido en el Laboratorio, cuando en la
peticin se solicitaba.
Muestra mal identificada:
Las muestras que consideramos mal identificadas son aquellas en las
que: no coinciden datos de peticin y muestras; no coincide cdigo de
barras de peticin y muestras; cdigo de barras mal colocado; muestras
sin identificar; cdigo de barras despegado; manipulacin del cdigo de
barras.
Estas causas sern motivo de rechazo de las muestras, por lo que no se
procesarn.
Muestra deteriorada en Laboratorio:
Aquella muestra que viniendo correctamente se deteriora en el proceso
de preparacin: rota en centrfuga, derramada, cada al suelo,
extraviada...
Temperatura de transporte inadecuada:
Hay determinaciones que slo se pueden realizar bajo
estrictas condiciones preanalticas. Por ejemplo, cido
lctico, gases, amonio u homocistena, exigen el transporte
en hielo del espcimen, mientras que las crioglobulinas
exigen que este transporte sea en caliente. El laboratorio
debe ser intransigente con las condiciones preanalticas de
este tipo de determinaciones.
En la mayora de analitos la temperatura es una variable
continua y que por tanto no afecta de una forma brusca
sino que disminuye gradualmente la calidad de la muestra
en tanto en cuanto ms se aleje de la temperatura ptima
de transporte o de conservacin
Recorrido preanaltico inadecuado:
Este parmetro es especialmente crtico en las muestras que
llegan desde los centros perifricos de extraccin. Se expresa en
unidades de tiempo a temperatura fija. Cuando el tiempo
mximo permisible es excedido se deben tomar las
medidas de aviso o bien de rechazo para analizar diferentes
pruebas.
Para la mayora de los analitos habituales, se acepta que un
recorrido preanaltico de dos horas es vlido, y por encima
de cuatro muchos de ellos disminuyen su calidad de
manera significativa.
Nosotros pensamos que una buena medida pudiera ser el
establecimiento de dos puntos de corte:
1er punto: Recorrido preanaltico entre 2-4 horas: Aviso de
interpretar con precaucin.
2 punto: Recorrido preanaltico mayor de 4 horas: Rechazo de
realizacin de determinadas pruebas.
Muchas gracias

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