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ENTEROBACTERIAS

Salmonella y
Helicobacter pylori

Eq 8
Martnez Hernndez Sergio Ivn
DONDE SE ENCUENTRA...
El sector avcola (fuente principal)
(carnes de puerco, de res, de cordero, leche y
sus derivados)

Las frutas y verduras fuentes de salmonelosis en


aos recientes
Esto se presenta por factores como:

La fertilizacin de sembrados con lodos sin


tratamiento

Irrigacin de los campos con aguas


contaminadas
PROPENSOS
El desarrollo incompleto del sistema inmune
en recin nacidos, el abatimiento en la
respuesta inmunolgica en individuos de
la tercera edad,
Baja produccin de cidos gstricos
en estos sectores de la poblacin
facilita la colonizacin intestinal.

La dosis infectiva en humanos


flucta entre 1 a 10 clulas.
Las infecciones por Salmonella en humanos pueden originar varias condiciones
clnicas, incluyendo fiebre entrica (tifoidea), enterocolitis e infecciones
sistmicas por microorganismos no tifoides. La fiebre entrica es una infeccin
grave asociada con las cepas tifoidea y paratifoidea, las cuales estn
particularmente bien adaptadas para invadir y sobrevivir en los tejidos del
husped. Las manifestaciones clnicas de la fiebre entrica aparecen despus de
un periodo de incubacin de 7 a 28 das y pueden incluir diarrea, fiebre prolongada
con variaciones en la misma, dolor abdominal, dolor de cabeza, y debilitamiento
Especies
IDENTIFICACIN
Bacilos gram (-)

Catalasa (-)

Oxidasa (-)

Fermentadores facultativos

Moviles (Flagelos peritricos) algunos no como S. enterica serovar Pullorum y S.


enterica serovar Gallinarum, as como cepas no mviles debido a la presencia de
flagelos disfuncionales
AGARES

AGAR XLD
Rojo fenol

desoxicolato de sodio como agente


selectivo (inhibe gram +)

Descarboxila la lisina ( alcalina genera


cadaverina)

Produce H2S (formado por tiosulfato


sdico y citrato frrico amnico)
colonias negras
AGAR BILIS VERDE BRILLANTE

La lactosa y la sacarosa son los


hidratos de carbono fermentables

rojo fenol

verde brillante acta como


agente selectivo

Rosas , blancas o transparentes


sobre fondo blanco
Agar Hektoen
Sales biliares hacen que sea selectivo contra
gram +

azul de bromotimol y fucsina cida como


indicadores de la fermentacin
de carbohidratos

citrato de hierro como un indicador de la


formacin de SH2 a partir del tiosulfato.

Se incluyen lactosa, sacarosa y salicina La


Salmonella no fermentan estos compuestos de
carbono y, por tanto, no ocasionan un cambio
de color en el sistema indicador del pH, en tanto
que los microorganismos como la E. coli,
por ejemplo, que fermentan uno o ms de tales
compuestos hasta convertirlos en cidos,
causan un cambio de color a amarillo o anaranjado
AGAR BISMUTO SULFITO

modificacin del Medio Wilson Blair, utilizado para la deteccin de Salmonella, en


particular Salmonella typhi de muestras clnicas.

El Verde brillante y el bismuto-sulfito inhiben


considerablemente los grmenes de
acompaamiento.

El sulfato de hierro (III) es un indicador del


sulfuro de hidrgeno que producen las
colonias de Salmonella H2S-positivas (negras)
AGAR SALMONELLA SHIGELLA

Inhibe microorganismos gram positivos y Enterobacteriaceae por sales biliares,


verde brillante y citratos.

Lactosa en el medio. Los organismos que fermentan lactosa producen cido que,
en presencia del indicador rojo neutro, propicia la formacin de colonias de color
rojo.
Los organismos no fermentadores de lactosa
forman colonias incoloras (Salmonella y Shigella)
El tiosulfato sdico y
el citrato frrico permiten la deteccin de
produccin de cido sulfhdrico, como lo
demuestran las colonias con centros de
color negro.
Evaluacin de un ensayo de PCR mltiplex (escalera de Bruce)
Tipificacin de todas las especies de Brucella, incluidas las cepas de
vacuna

La brucelosis es causada por una bacteria intracelular facultativa del gnero Brucella,
El gnero Brucella consiste de seis especies reconocidas
B. ceti (cetceos) y B. pinnipedialis (pinnpedos) .
25 caractersticas fenotpicas, incluido el requisito de CO2,
Produccin de H2S, sensibilidad a los colorantes, fagos, y
otras sustancias metablicas

Pruebas son lentas, requieren tcnicos capacitados, y


no son directos, y algunos reactivos no estn disponibles
comercialmente.
Adems, el manejo de este microorganismo representa
un alto riesgo para el personal de laboratorio.
A fin de que superar la mayora de estas dificultades, se utiliza PCR.

Alto grado de homologa gentica (DESAFO) . Este artculo describe la evaluacin de un nuevo ensayo
multiplex de PCR , llamado Bruce-ladder, en siete diferentes laboratorios europeos.
La seleccin de las secuencias de ADN para disear los cebadores de PCR se basaron en especies
especficas (Tabla 1).
Cada laboratorio us su propio Coleccin de cepas de Brucella
Se usaron un total de 625 cepas de Brucella (Tabla 2).de humanos y de animales domsticos y
salvajes
El ADN genmico se extrajo de cultivos puros mediante el uso de
kits de aislamiento de ADN microbiano estndar

La amplificacin se bas en el nmero y tamao de siete productos amplificados por PCR.


Un ejemplo representativo del mltiplex El resultado de la PCR se presenta en la Fig. 1.
Diferenciacin de todas las especies de Brucella y cepas de vacunas S19, RB51 y Rev.1 mediante PCR multiplex de Bruce-Ladder.
Carril 1 (A), B. abortus; (M), B melitensis; carril 3 (O), B. ovis; carril 4 (S), B. suis; carril 5 (S19), cepa vacunal B. abortus S19; carril 6
(RB51), cepa de la vacuna B. abortus RB51; carril 7 (Rev.1), cepa de vacuna B. melitensis Rev.1; carril 8 (C), B. canis; carril 9 (N), B.
neotomae; carril 10 (Bp), B. pinnipedialis; carril 11 (Bc), B. ceti.
VENTAJAS
Una gran ventaja del ensayo de PCR Bruce-ladder sobre las pruebas de PCR mltiple descritas
anteriormente es que puede identificar
y diferenciar por primera vez a todas las especies de Brucella y las cepas vacunales en la misma prueba.

En contraste con AMOS PCR, PCR de Bruce-ladder tambin es capaz de detectar ADN de B. canis, B.
neotomae, Brucella aislados de mamferos marinos,
Otras ventajas son la velocidad (la PCR se puede realizar enmenos de 24 h),

No utilizar a brucella viva

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