INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR EL ORO

Ciencia y Tecnologa para el Progreso

CICLO II / COHORTE II

Microbiologa

Docente: Ing. Diego Cumbicos

Machala 2017
 CONTENIDOS

Introduccin a la Microbiologa

Diversidad Microbiana.
Microorganismos Procariticos: bacterias y arqueas.
Microorganismos Eucariticos: algas, hongos y protozoos.
Virus

Microscopa y Cultivo de Microorganismos

Microscopa ptica.
Preparacin y tincin de las muestras.
Microscopa de fluorescencia.
Microscopa electrnica de transmisin y de barrido.
Manipulacin de microorganismos.
Esterilizacin y asepsia.
Medios de cultivo lquidos y slidos.
Medios sintticos o definidos, medios complejos, medios diferenciales y
medios selectivos.
.
 CONTENIDOS

Aislamiento de cultivos puros.

Influencia de los factores ambientales sobre el crecimiento.

Virus

Propiedades generales de los virus.

Morfologa de los virus. Composicin y estructura del virin: cpsida y
cido nucleico. Crecimiento y cultivo de los virus.
Ciclo de vida de los virus (ciclo ltico):
Fases de adsorcin, penetracin, expresin gnica y replicacin, y
liberacin.
Alternativas al ciclo ltico: lisogenia en bacterifagos, infecciones latentes,
persistentes y transformacin tumoral en virus de animales
 Breve Resea Histrica Microbiologa
Periodo I: Especulativo, desde la Antigedad hasta los primeros Microscopistas

Periodo II: Lenta acumulacin de Observaciones. Desde 1675 hasta la mitad del
Siglo XIX, surge con el descubrimiento de los Microrganismos (MO) por
Leeuwenhoek (1675).

Periodo III: Cultivo de Microorganismos, abarca hasta finales del Siglo XIX.
Pasteur y Koch cristalizan a la Microbiologa como Ciencia Experimental.

Periodo IV: Extraordinario crecimiento de la Microbiologa, surgimiento de

Disciplinas Microbiolgicas Especializadas, estrecha relacin de la Microbiologa
con las Ciencias Biolgicas. Abarca desde principios del Siglo XX hasta la
Actualidad; ya no se estudian los mo aislados sino en toda su complejidad
fisiolgica, gentica, bioqumica y ecolgica.
 Diversidad Microbiana

Microorganismos Procariticos Micoorganismos Eucariticos Virus

Bacterias Hongos Microscpicos Levaduras

Arqueas

Protozoos
Algas Verde-Azules
Microorganismos Procariotas
 Clasificacin General de las Bacterias

A.- Segn su Morfologa (Forma): Cocos Esfricas

Bacilos Bastones
Espirilos Helicoidales
Vibriones Coma

B.- Segn su Pared Celular: Gram Positiva (G+)

Gram Negativa (G-)

C.- Segn su Nutricin: Fototrofas Requieren Luz

Quimiotrofas Procesos de Oxidorreduccion
Litotrofas Sustrato Mineral
Quimiorganotrofa Materia Orgnica (Patgena)

D.- Segn su Respiracin: Aerobias Requieren Oxigeno

Anaerbicas No Necesitan Oxigeno
 Ciclo Vital Bacteriano

Fases Ciclo Bacteriano

Fase 1 Latencia (Lag): Reconocimiento

de las condiciones ideales para
crecimiento

Fase 2 Crecimiento Exponencial (Log): Si

las condiciones ambientales son optimas,
se inicia el crecimiento logartmico
bacteriano por Mitosis.

Fase 3. Estacionaria: Al empezar a

agotarse los nutrientes, disminuye la
reproduccin bacteriana.

Fase 4. Declive y Muerte; Al agotarse los

nutrientes, se crean condiciones adversas
y se inicia la sucesin microbiana, con la
disminucin y muerte de las bacterias.
Fision binaria
Consiste en la
divisin del
ADN, seguidas
de la divisin
del citoplasma
(citocinesis),
dando lugar a
dos clulas
hijas.
Esporulacin
Donde una celula se
separa y su nucleo se
fragmenta cada ncleo
fragmentado se rodea de
una membrana llamada
espora la cual hace que
la celula se rompa
permitiendo su salida y en
condiciones favorables
da origen a otra alga ,
hongo u helecho
 Arqueas
Tipo de microorganismos muy antiguos que se consideran como
precursores de las bacterias actuales. Aun persisten en entornos
ambientales extremos y aunque se parecen mucho a las bacterias, se
diferencian de estas en su genoma y rutas metablicas distintas.
 Algas Verde-Azules
Las algas verdeazules o cianofitas son organismos acuticos, marinos o continentales,
desarrollan diversos tipos de estructuras de resistencia, como las paredes que impiden
la desecacin, lo que les permite sobrevivir las estaciones desfavorables. Se
reproducen asexualmente
Muchas especies de cianofitas son capaces de utilizar directamente el nitrgeno
molecular atmosfrico como fuente de nitrgeno para la sntesis de aminocidos.
pueden servir como alimento rico en protenas;
 Microorganismos Eucariotas

Protozoos:
Son organismos microscpicos, unicelulares eucariotas; hetertrofos, fagtrofos,
depredadores o detritvoros, a veces mixtrofos (parcialmente auttrofos); que viven
en ambientes hmedos o directamente en medios acuticos.
o Etapas biolgicas de los Protozoos:
Trofozoito: Forma activa del protozoario, en esta se alimenta, se reproduce,
moviliza y ejerce la accin patgena.

Quiste: Forma de resistencia y transmisin, durante su etapa infectante y tambin

de multiplicacin.

Ooquiste: proviene de la fusin de los gametos, corresponde a la etapa sexuada

de reproduccin y est presente solo en algunas especies. Tambin conocido
como cigoto.
o Hbitat de los Protozoos:
Habitan en ambientes acuticos tanto de agua dulce como salada, donde
constituyen medios ricos en alimentos. Se integran al Zooplancton Aunque existen
especies terrestres.

o Reproduccin
Rproduccin Asexual (mayoria), por Fisin Binaria (el organismo se divide en dos o ms
clulas hijas,)

Reproduccin Sexual (menos frecuente), por Fusin o Singamia (union de gametos

idnticos o diferentes en tamao y estructura.)
 Clasificacin de los Protozoos

Ciliados: Poseen dos ncleos (macro y microncleo) encargados de las

funciones de nutricin y reproduccin. Introducen la comida por una
cavidad bucal denominada citoplasma.

Rizpodos: Se mueven mediante pseudpodos que son prolongaciones

del citoplasma, pueden ser parsitos o de vida libre.

Flagelados: Protozoos que presentan un solo ncleo.

Esporozoos:Todos suelen permanecer inmviles al tratarse de parsitos

internos, por tanto poseen un ciclo de vida asociado al individuo que
parasitan.
 Hongos Microscpicos (Mohos)

Son hongos filamentosos de pequeo tamao qu crecen en la

superficie de los alimentos y otros materiales orgnicos formando
una capa algodonosa o aterciopelado

Estructura Celular Estructura de los mohos

 Clasificacin de los Mohos
Moho Alergnico: Producen biotoxinas que causan reacciones alrgicas en
animales y humanos.
Moho Patognico: Producen algn tipo de infeccin en vegetales, animales y el
hombre.
Mohos Txicos: Producen mcotoxinas qu afecta la salud de animales y hombre

Requisitos de Crecimiento y Desarrollo

Disponibilidad de Oxigeno
Disponibilidad de Materiales Orgnicos
Humedad y Temperatura adecuada

Crecimiento y Desarrollo: Una vez formada la espora comenzara a liberarse en el

aire y se extender formando nuevas colonias y si cae una espora en un material
adecuado y las condiciones ambientales son las indicadas, puede germinar en
una clula hifal nueva y comenzar una nueva colonia de mohos.
 Hbitats de los Mohos

Moho Acutico

Moho Terrestre

Moho Areo
 Tipos de Reproduccin Hongos Microscpicos

Huevo
(Fusin de Filamentos)
(Mezcla Patrimonio Gentico)
Individuo Diferente Hongos Perfectos Esporas Reagrupadas
Esporas Reproduccin
Sexual
Germinacin Ascas
Diseminacin
 Tipos de Reproduccin Hongos Microscpicos

Conidiforos
(Clulas Especializadas)
(Herencia Gentica Inalterada)
Individuo Idntico Hongos Imperfectos Nacimiento
Esporas Reproduccin
Conidios Asexual
(Vegetativa)
Germinacin Micelio
Diseminacin
 Virus
Son agentes infecciosos microscpicos acelulares, que solo puede multiplicarse
dentro de otra clula; por ello son considerados paraditos celulares.

Estructura General de los Virus:

 Virus
Clasificacin de los Virus, segn su Forma:
Virus Helicoidal: Cpsides helicoidales de un nico tipo de capsomero apilado alrededor de un
eje central para formar una estructura helicoidal que puede tener una cavidad central o un tubo
hueco.

Virus Icosaedrica: la mayora de los virus que infectan los animales son icosaedrica o casi esfricos
con simetra icosaedrica. Un icosaedro regular es la mejor manera de formar una carcasa cerrada
a partir de subunidades idnticas.

Virus con Envoltura: algunas especies de virus se envuelven en una forma modificada de una de
las membranas celulares, ya sea la membrana externa que rodea una celula husped infectado,
o bien membranas internas como La membrana nuclear o el retculo endoplasmatico,
consiguiendo asi una bicapa lipdica exterior conocida como envoltura vrica.

Virus Complejos: los virus tienen una cpside que no es ni puramente helicoidal, ni puramente
icosaedrica, y que puede poseer estructuras adicionales como colas proteicas o una pared
celular compleja.
 Microscopia y Cultivos de Microorganismos

Robert Hooke
Leeuwenhoek

Leeuwenhoek Pasteur Koch

 Microscopia ptica

Microscopio
Imagen
ptico
Microscopia Partes Microscopio ptico
ptica
 Microscopia de Fluorescencia

Microscopio Imagen por

Partes Microscopio
Fluorescencia Microscopia
Fluorescencia
Fluorescencia
Preparacin y Tincin de Muestras
Tinciones Bacterianas
Microscopia Electrnica de Transmisin

Imagen
Microscopio de Transmisin
Microscopia de
Transmisin
 Microscopia Electrnica de Barrido

Microscopio Imagen Microscopia de

Microscopio de Barrido
de Barrido Barrido
 Manipulacin de Microorganismos

Medios de Cultivos: Son sustancias nutritivas de origen natural o artificial que permiten el
crecimiento de los microorganismos

Cultivo Microbiano: Es el crecimiento de los microorganismos

Condiciones Generales para el Cultivo de Microorganismos:

1.- Disponibilidad de Nutrientes

2.- Consistencia Adecuada del Medio

3,. Presencia o Ausencia de Oxigeno y Otros Gases

4,. Condiciones Adecuadas de Humedad, Luz, pH y Temperatura

5.- Esterilidad del Medio

 Esterilizacin y Asepsia
Esterilizacin:
Tcnica de uso comn en microbiologa que consiste en la reduccin y eliminacin
de formas microbianas presentes en superficies, ambiente y seres vivos.

Asepsia:
Procedimiento mediante el cual, se realiza la limpieza y desinfeccin de un rea
determinada, puede aplicarse al plano personal o al rea destinada al trabajo en el
laboratorio, zona de campo o productividad.

Etapas:
1.- Limpieza. Eliminacin de la suciedad superficial por accin mecnica (uso de algodn,
toalla o papel)
2.- Desinfeccin: Eliminacin o disminucin de formas microbianas potenciales agentes
infecciosos, por accin qumica (uso de soluciones desinfectantes)
3.- Esterilizacin: Eliminacin de formas microbianas resistentes y patgenas, por accin del
fuego (flameado) y/o uso de equipos especiales como autoclaves o esterilizadores que
combina aire hmedo y seco con altas temperaturas.
 Tcnicas de Cultivo y Recuento Microbiano

Tipos de Medios de Cultivos

A.- Segn su Naturaleza:

a.1.- Medios Naturales. Ej: frutas, carnes, suelos, agua estancada
a.2.- Medios Artificiales o Sintticos. Ej: Medios qumicos comerciales usados
en el laboratorio

B.- Segn su Consistencia o Estado Fsico:

b.1.- Medios Lquidos (Caldos)
b.2.- Medios Solidos (Agares)
b.3.- Medios Semi-Slidos Geles (Gelatinas)

C.- Segn su Uso o Utilidad Practica:

c.1.- Medios de Crecimiento o Aislamiento Primario
c.1.1.- No Selectivos. Ej: Agar Agar, Agar Nutritivo
c.1.2.- Selectivos. Ej: Agar Mac Conkey, Kanamicina
c-1-3.- Enriquecidos. Ej: Agar Selenito-Cistina, Medios con Vitamina K
c.1.4.- Aislamientos Especializados. Ej: Lowenstein, Salmonella
c.2.- Medios de Identificacin. Ej: Oxidacin- Fermentacin
 Tcnicas de Siembra

Homogenizado Vaciado en Placas

Diluciones Seriadas

REP. Mtodo Superficie NMP Serie 5 Tubos

NMP Serie 3 Tubos
 Recuento Microbiano
Contaje Microscpico Directo (CMD)

Contaje Indirecto por Reduccin del Colorante

Mtodo Estndar Contaje en Placas (REP)

Numero Mas Probable (NMP)

Aislamiento de Cultivos Puros
 Procedimiento Aislamiento Cultivo Puro
Siembra Microbiana

Identificacin Colonias Sospechosas

Re-Siembra y Enriquecimiento Cultivo

Siembra en Medios de Cultivos Diferenciales

Identificacin Cultivos Puros por Pruebas Bioqumicas Diferenciales

 Influencia de los Factores Ambientales sobre el Crecimiento

Temperatura:

A Mayor Temperatura, Mayor Crecimiento Microbiano

Humedad:
12% Humedad: No Hay Crecimiento Microbiano
15% Humedad: Pueden Crecer Hongos
>18% Humedad: Crecen Hongos, Levaduras y Bacterias

Presin Osmtica:
A Mayor Presin Osmtica, Menor Crecimiento Microbiano

pH