UTN

BIOTECNOLOGA-2012
Facultad Regional Neuqun
JTP: Ing. Mariela Daz
Ingeniera Qumica

Esterilizacin
TEMAS

1.Conceptos

2.Criterios de viabilidad para evaluar la eficacia de un agente

3.Factores que influyen en la velocidad de destruccin de

los microorganismos

4.Limpieza y desinfeccin

5.Mtodos de esterilizacin
1.-Conceptos

Esterilizacin
Desinfeccin
Antisepsia
Asepsia
Microbiostasis
Microbiocida
2.- Criterios de viabilidad para evaluar la
eficacia de un agente
Muerte: (desde punto de vista microbiolgico)
Es la prdida irreversible de la capacidad de reproducirse.
M.O. viables
aquellos capaces de multiplicarse

M.O. muertos
aquellos que no pueden multiplicarse

La determinacin de la muerte de los m.o. requiere de tcnicas de

laboratorio que revelen si el m.o. crece cuando se inocula en
medios de cultivos lquidos o slidos adecuados.
3.- Factores que influyen en la velocidad de
destruccin de los microorganismos

Temperatura
Tipo de microorganismos
Estado fisiolgico de las clulas
Ambiente
4.- Limpieza y desinfeccin

Limpieza
Proceso de remover, a travs de medios mecnicos y/o
fsicos, el polvo, la grasa y otros contaminantes de las
superficies, equipos, materiales, personal, etc.

Para que sea adecuada hay que considerar.

tipo de accin del agente utilizado (remocin mecnica,
disolucin o detergente),
las condiciones requeridas para aplicar la solucin limpiadora
y el tiempo de contacto necesario para que sta ejerza su
efecto.
4.- Limpieza y desinfeccin

Desinfeccin
Es el proceso en el que se destruyen las formas
vegetativas de los microorganismos ms comunes pero
no las esporas.

Para realizar este proceso se usan:

agentes qumicos (desinfectantes)
procesos fsicos como el calor.
4.- Limpieza y desinfeccin

Desinfeccin
Generalmente los desinfectantes qumicos son
excesivamente txicos para ser usados directamente
sobre tejidos vivos.
Muy pocos desinfectantes llegan a esterilizar.
Se emplea cuando se tratan los instrumentos de uso
mdico, utensilios, ropa, paredes y pisos de las
habitaciones de los enfermos, etc., con el propsito de
evitar una posible infeccin.
5.- Mtodos de esterilizacin
 Esterilizacin por Calor Seco

Es aire a temperatura elevada

Tipos :
Fuego directo (llama)
Incineracin en hornos crematorios
Aire caliente (estufa o mufla)
 Esterilizacin por Calor Seco
Fuego directo:
Consiste en exponer directamente a la llama el
material a esterilizar, lo que se logra por oxidacin
violenta.
Usos
ansas, agujas, flameado de bocas de tubos u otros
recipientes y destruccin de material contaminado
 Esterilizacin por Calor Seco
Incineracin en hornos crematorios:
Se aplica a elementos contaminados de los que no
importa su destruccin, como apsitos, cadveres de
animales infectados o material plstico contaminado.

Se utiliza la combustin directa o el horno crematorio

 Esterilizacin por Calor Seco
Aire caliente
Estufas de calor seco
el aire caliente circula por el espacio que existe entre la doble
pared, transmitiendo as el calor a los objetos que se encuentran
en su interior.
Los m.o. se mueren por oxidacin de sus estructuras previa
deshidratacin, pudindose llegar a una ligera
carbonizacin
Tiempo requerido: 1,5-2 hs, a una temperatura de 160 a
180C.
Usos: esterilizacin de material de vidrio
 Esterilizacin por Calor hmedo
Mediante el uso del vapor de agua
Es uno de los mtodos ms eficaces para destruir
microorganismos.

A igualdad de temperatura, es mucho ms eficaz

que el calor seco (aire).
 Esterilizacin por Calor hmedo
Hay varias formas de emplear el calor hmedo.
Agua a ebullicin
Vapor fluente
Vapor a presin
Tyndalizacin
Pasteurizacin
 Esterilizacin por Calor hmedo
Agua a ebullicin
Se colocan los objetos en el agua y se lleva a ebullicin
durante un tiempo no menor de quince minutos.
Se utiliza para jeringas, agujas, ampollas, etc.

Precaucin:
Los grmenes esporulados y ciertos virus no mueren con 15
minutos de ebullicin
 Esterilizacin por Calor hmedo
Vapor fluente
Tratamiento con vapor de agua a presin atmosfrica (o
sea vapor saturado a 100 C).
Tcnica til para tratar sustancias que no admiten
calentamientos superiores a 100 C sin perder alguna de
sus propiedades.
Los equipos usados son sencillos y estn constituidos por
recipientes con falso fondo perforado, sobre el cul se
acomoda el material a esterilizar.
Se puede realizar tambin en el autoclave, trabajando con la espita
abierta.
 Esterilizacin por Calor hmedo
Vapor a presin
Uno de los mtodos ms utilizados.
Tiene gran poder de penetracin
Razn por la cual la esterilizacin se puede llevar a cabo a menor
temperatura y tiempo que cuando se emplea la estufa (calor seco)
Est especialmente recomendado para la eliminacin de
formas esporuladas.
Equipo: el autoclave para esterilizar material en general y
particularmente para medios de cultivo y otros compuestos
qumicos utilizados en el laboratorio de microbiologa.
 Esterilizacin por Calor hmedo
Vapor a presin
El equipo que se usa: Autoclave
Esterilizar
material en general
medios de cultivo
y otros compuestos qumicos utilizados en el
laboratorio de microbiologa.

Tiempo y Temperaturas requeridos:

Para esterilizar medios de cultivo de 107-121C
durante 10 a 15 minutos.
El Autoclave
 El Autoclave
Consiste en un cilindro de bronce,
horizontal o vertical, con una tapa
del mismo material que se apoya
sobre una arandela de goma y se
cierra por pestillos o cerrojos
quedando hermticamente
cerrado.
 El Autoclave
Adems, posee en la parte superior
una llave de vapor (o espita),
un manmetro
y una vlvula de seguridad.
 El Autoclave
En el interior del autoclave se
coloca un volumen de agua
que se hace hervir, ya sea por
medio de quemadores
externos que se encuentran
en la parte inferior del
aparato, o mediante
calentadores elctricos de
inmersin.
 Esterilizacin por Calor hmedo
Tyndalizacin
Es un procedimiento de calentamiento discontinuo que
permite esterilizar, a bajas temperaturas, aquellas
sustancias que se alteran a altas temperaturas como
algunos azcares.

Se puede realizar a bao Mara o autoclave abierta.

 Esterilizacin por Calor hmedo
Tyndalizacin
Tratamiento:
1. Temperatura de 60-80 C por 30 minutos (se eliminan las
formas vegetativas pero no las esporuladas).
2. Se deja el material a 30-37C hasta el da siguiente,
3. y se lo somete nuevamente al tratamiento inicial.
4. Esta operacin se repite despus de 24 horas (esterilizacin
fraccionada).

La discontinuidad de calor- reposo permite a las bacterias

desarrollar nuevas clulas vegetativas a partir de sus esporas,
hasta que por ltimo, en el tercer calentamiento, ya no quedarn
formas esporuladas.
 Esterilizacin por Calor hmedo
Pasteurizacin
Tiene muy poca aplicacin en bacteriologa
y es usada especialmente en leche, ya que destruye la
totalidad de los grmenes patgenos y la mayora de la
flora banal, respetando la estructura fsica y
composicin qumica de la misma (otros ejemplos son
la nata, bebidas alcohlicas, mosto, etc.).
 Calor hmedo
Pasteurizacin
Consiste en someter el lquido a un calentamiento rpido
seguido de un enfriamiento posterior.
La temperatura aplicada es de 63C, durante 30 minutos
con lo que se consigue la destruccin de las formas
vegetativas, excepto las termfilas.
Existe una pasteurizacin denominada alta o instantnea,
en las que mantienen delgadas pelculas de leche
vaporizada sobre tubos o placas a 71C, con lo que se
requiere una exposicin de slo quince segundos
 Resistencia a calor

RESISTENCIA
Priones +
Endosporas bacterianas
Mycobacteria
Virus sin envoltura lipdica
Hongos
_
Bacterias
Virus con envoltura lipdica
 Prin
Protena de carcter infeccioso capaz de
autorreproducirse, procedente de una protena natural
e inocua que se transforma en una forma nociva,
resistente a las proteasas y a las radiaciones ionizante y
ultravioleta, responsable de enfermedades como la
encefalopata espongiforme bovina (enfermedad de la
vaca loca).