Sunteți pe pagina 1din 58

CROMOPROTEINELE

CURSUL 4
CROMOPROTEINELE
DEFINIIE

sunt structuri proteice


specializate alctuite
dintr-o component
proteic i o
component prostetic
numit hem
CROMOPROTEINELE
STRUCTURA I ROLUL HEMULUI

este format din 4 nuclee pirolice legate ntre


ele prin puni metilenice
n centrul su se gsete un ion de fier
bivalent (Fe2+), meninut prin intermediul a 2
legturi coordinative i 2 legturi covalente cu
atomii de azot din inelul porfirinic
Fe2+ mai poate forma 2 legturi suplimentare,
una deasupra i cealalt sub planul inelului
porfirinic
CROMOPROTEINELE
STRUCTURA I ROLUL HEMULUI

rolul hemului este determinat de mediul generat de


structura tridimensional a proteinei:
n structura citocromilor, rolul hemului este de a
transporta electroni
n structura catalazei, rolul hemului este de
participare n centrul activ al enzimei, conducnd
la descompunerea apei oxigenate
n structura mioglobinei i hemoglobinei, rolul
hemului este de a lega reversibil moleculele de
oxigen
CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA, HEMOGLOBINA
*
CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA
este format dintr-o caten polipeptidic i o
component prostetic HEM
catena polipeptidic conine 153 de resturi de
aminioacizi avnd o aranjare globular compact
prezena resturilor de prolin determin prin
radicalul su plierea catenei i formarea a 8
segmente peptidice
C
B
F
A D

G E

H
CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA
aminoacizii cu radicali nepolari se vor orienta ctre
interiorul moleculei de mioglobin datorit hidrofobicitii
lor
excepie fac 2 resturi de histidin prin intermediul crora
se fixeaz hemul

aminoacizii cu radicali polari ncrcai electric se vor


orienta ctre exteriorul proteinei, predominnd la
suprafa i determinnd solubilitatea n ap a acesteia

aminoacizii cu radicali polari nencrcai electric se vor


aranja la interior sau exterior, n funcie de posibilitile
sterice ale catenei polipeptidice
CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA
componenta prostetic, hemul, se gsete ntr-o fisur a
proteinei aflat la distan de mediul hidrofil (punga
hidrofob), de care se asociaz prin legturi necovalente

n centrul hemului se gsete un Fe2+

Fe2+ din hem formeaz:


2 legturi covalente 2 dintre atomii de N
2 legturi coordinative cu ceilali 2 atomi de N
1 legtur coordinativ cu un rest imidazolic al His (His F8)
1 legtur coordinativ cu His E7 (histidina distal) prin
intermediul unei molecule de O2
CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA
este format din 4 catene polipeptidice, 2 de tip
(141 aa) i 2 de tip (146 aa), fiecare dintre
acestea avnd cte un hem

catenele polipeptidice de tip au o aranjare rigid


fa de cele , conducnd la formarea celor 2
dimeri

dimerii 11 i 22 i pot modifica poziia reciproc


n procesele de oxigenare/deoxigenare
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA
cele 4 catene polipeptidice sunt asociate prin
legturi necovalente ntr-o structur cuaternar, cu
o geometrie aproximativ tetraedric

oxigenarea Hb ncepe la nivelul protomerului ,


ceea ce determin deplasarea Fe2+ din poziia
exterioar planului hemului ntr-o poziie coplanar

deplasarea Fe2+ este urmat de deplasarea restului


de His F8, ce va conduce la ruperea unor legturi
stabilizatoare a structurii tensionate a Hb
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

Starea tensionat a Hb Starea relaxat a Hb


CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA
CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI
din punct de vedere funcional, Mb i Hb fixeaz O2
la nivelul hemului

Mb fixeaz o singur molecul de O2

Hb are structur tetrameric i fixeaz patru


molecule de O2

diferena dintre Mb i Hb se reflect n aspectul


hiperbolic al curbei de oxigenare a Mb fa de cel
sigmoidian n cazul oxigenrii Hb
CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI
ntr-o soluie de Mb
deoxigenat, respectiv Hb
deoxigenat, se introduce
O2 la presiuni ce cresc
treptat, de la 0 la 100
mmHg
se obine o curb hiperbol
pentru Mb
se obine o curb sigmoid
pentru Hb
presiunile de semisaturare
(P50) sunt net diferite:
1 mmHg pentru Mb i
26 mmHg pentru Hb
CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI
Hb deoxigenat este n stare tensionat:

structural, aceast stare se caracterizeaz printr-un


numr de interaciuni intercatenare (Asp--Arg+) i
intracatenare (Asp--His+)
Fe2+ din fiecare subunitate este situat n afara
planului protoporfirinei IX (la o distan de 0.6 A),
ca urmare a legrii lui de histidina proximal
acceptarea O2 de ctre Hb deoxi se face prin
creterea presiunii O2 la nivelul protomerilor
Hb deoxi are afinitate foarte redus pentru O2
CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI
Hb oxigenat este n stare relaxat:

oxigenarea protomerului este urmat de deplasarea


Fe2+ din poziia exterioar planului porfirinic ntr-o poziie
coplanar
Fe2+ ajunge n poziia optim formrii unei legturi
coordinative cu O2, prin intermediul cruia se va lega de
His distal
cum legtura Fe2+ cu His proximal nu se rupe n urma
legrii O2, prin intermediul acestui aminoacid, se vor
produce modificri n structura teriar i cuaternar a Hb,
ceea ce constituie tranziia ntre starea T n starea R a
hemoglobinei
CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI

oxigenarea protomerilor va fi urmat de a celor ,


fapt datorat eliberrii restului de valin din punga de
oxigenare
Hb oxi are afinitate mare pentru O2
afinitatea mare pentru O2 a strii relaxate a Hb este
exprimat prin fixare rapid a acestuia la celelalte
subuniti
n apropierea presiunii de 100 mmHg, capacitatea
de de fixare a O2 diminu ca urmare a saturrii
CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I
HEMOGLOBINEI
n plmni, presiunea parial a O2 nu variaz ntre
0 i 100 mmHg (pO2 plmni = 100 mmHg)
din aceste condiii deriv necesitatea desfurrii n
plamn doar a ultimei poriuni a curbei de
oxigenare a Hb, explicnd uurina de oxigenare a
Hb
disocierea O2 de Hb se face dup aceeai curb
dar parcurs n sens invers
presiunea parial a O2 n esuturi este de 30
mmHg, ceea ce favorizeaz deoxigenarea Hb oxi
pn cnd mai este oxigenat n proporie de 50-
60%
Hb va prelua n plmni restul de 40-50% O2, ceea
ce favorizeaz suplimentar oxigenarea
CROMOPROTEINELE
EFECTUL BOHR
Christian Bohr a constatat c Hb oxi cedeaz mai
uor O2 dac pH-ul este mai sczut dect cel
fiziologic

ecuaia chimic de oxigenare a Hb:


Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

prin oxigenarea Hb deoxi, se rup legturile ionice


intracatenare (Asp-- His+) i sunt eliberate resturile
de His+

unele dintre resturile His+ vor putea elibera protonii


asociai lor (His146 de la captul C-terminal al
protomerilor sunt implicai n efectul Bohr)
CROMOPROTEINELE
EFECTUL BOHR
la nivelul capilarelor alveolelor pulmonare

reacia chimic este deplasat spre dreapta


Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

H+ eliberai prin deprotonarea resturilor de His+ vor


fi tamponai cu HCO3- ,component al tamponului
sanguin, formnd H2CO3
H2CO3 sub aciunea anhidrazei carbonice va fi
descompus n ap i CO2, acesta din urm se
elimin prin expiraie
CROMOPROTEINELE
EFECTUL BOHR
la nivelul capilarelor esutului muscular

reacia chimic este deplasat spre stnga


Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

n urma metabolismului celular se obin


compui cu caracter acid, care vor determina
scderea pH-ului local, favorizndu-se
deoxigenarea Hb oxi
CROMOPROTEINELE
EFECTUL BOHR
la nivelul capilarelor esutului muscular

80% din CO2 rezultat la nivelul muscular


reacioneaz cu H2O, sub aciunea anhidrazei
carbonice, formnd H2CO3

ionul bicarbonat rezultat prin descompunerea


H2CO3 la acest nivel, va intra n rezerva alcalin a
sngelui

15% din CO2 rezultat la nivel muscular este


transportat la plmn sub form de
carbaminhemoglobin
CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

2,3 BPG este un ester bifosforic esenial n


exercitarea funciei de transport a O2 de ctre Hb

se formeaz printr-o deviere a 1,3 BPG din calea


glicolitic desfurat n eritrocit

25% din cantitatea de glucoz angajat n glicoliz


va intra n aceast bucl, nsoindu-se cu "risip"
energetic
CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
ADP + Pi
NAD+ NADH + H+

1,3
glucoza 3 PG pyr lactat
BPG

untul
Rappapor-Luebering

H20

PO -
CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

2,3 BPG se intercaleaz n zona central a Hb


tensionate ca urmare a atraciilor electrostatice
ntre gruprile sale ncrcate negativ i gruprile
amino protonate ale lanurilor i

n acest mod, starea Hb tensionate este


consolidat suplimentar, crescnd dificultatea
oxigenrii sale (curba de oxigenare a Hb se
deplaseaz la dreapta)
CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
dup fixarea primei molecule de O2 la nivelul
subunitii , modificrile conformaionale aprute
fac imposibile rmnerea 2,3 BPG-ului n zona
central a Hb, care se micoreaz

2,3 BPG reduce afinitatea Hb pentru O2, astfel


favorizeaz deoxigenarea Hb oxi

n lipsa 2,3 BPG, curba de oxigenare a Hb este nu


numai deplasat spre stnga dar i pierde n mare
msur aspectul sigmoidian, tinznd spre cel
hiperbolic (aspectul curbei de oxigenare al Mb)
CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
La nivelul esuturilor periferice, are loc deoxigenarea Hb
nsoit de intercalarea 2,3 BPG n zona central.
O2

O2

La nivel pulmonar, are loc oxigenarea Hb nsoit de


scoaterea 2,3 BPG din zona central a acesteia.
CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT IMPORTAN BIOLOGIC

creterea concentraiei de 2,3 BPG apare ca


urmare a prezenei hipoxiei cronice (exp.:
emfizem pulmonar obstructiv sau la altitudini
nalte), precum i n contextul anemiilor cronice,
cnd numrul redus de hematii nu poate asigura
necesarul de oxigen al organismului

asigur transferul oxigenului din circulaia


matern ctre eritrocitele ftului
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

Hb F este un tetramer format din 2 catene


polipeptidice , identice cu cele din Hb A, i 2
catene polipeptidice (22)

Hb F prezint afinitate pentru oxigen mult mai mare


comparativ cu Hb A, aspect explicat prin faptul c
Hb F leag slab 2,3 BPG

lanurile polipeptidice din Hb F nu conin


aminoacizi cu radical ncrcat electric pozitiv
responsabili de ataarea Hb F
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

afinitatea crescut
pentru oxigen a Hb F
faciliteaz transferul
oxigenului din circulaia
matern,
transplacentar, ctre
eritrocitele ftului
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL
n primele sptmni de la concepie, sacul vitelin
sintetizeaz o hemoglobin embrionar (Hb Gower
1), alctuit din 2 catene polipeptidice zeta () i 2
catene polipeptidice epsilon () (22)

dup alte cteva sptmni, ncepe s se


sintetizeze Hb F, pentru ca n ultimele luni ale vieii
embrionare aceasta s reprezinte aprox. 60% din
hemoglobina eritrocitar total

n jurul lunii a opta de sarcin, mduva


hematopoietic ncepe sinteza Hb A, care ulterior
va nlocui progresiv Hb F
HEMOGLOBINELE
Tip de Catene Procent din
hemoglobin polipeptidic hemoglobina
total
lanurile din
Hb A 22 90% aceste tipuri

NORMALE ALE ADULTULUI


de
Hb F 22 <2% hemoglobine
sunt identice
Hb A2 22 2-5%

Hb A1c 22 - 3-9%
glucoz
CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI

Oxihemoglobina Carbaminhemoglobina

15% din cantitatea total


HbO2, Hb(O2)2, Hb(O2)3 de CO2 din snge
i Hb(O2)4 reacioneaz cu gruprile
amino ale resturilor de
ecuaia chimic: valin - aminoacidul N-
terminal al celor 4
Hb(O2)n+O2Hb(O2)n+1
protomeri ai Hb A
n= 0, 1, 2, 3.

R-NH2+CO2R-NHCOOH
CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI

Carboxihemoglobina Methemoglobina

afinitatea Hb pentru dac Fe2+ este oxidat la


CO este de 200 de ori Fe3+, hemul se numete
mai mare dect pentru hemin iar met-Hb
O2 rezultat nu se mai poate
oxigena
ageni oxidani:
intoxicaia cu CO poate
fericianurile, peroxizii,
fi tratat prin creterea chinonele
pO2 n aerul inspirat,
n eritrocitul normal met-
astfel ndeprtndu-se Hb reprezint cca 1 % din
CO de pe Hb A cantitatea total de Hb
CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI

Methemoglobina

nivelul redus al met-Hb este meninut datorit


prezenei n eritrocit unei enzimei: methemoglobin
reductaza, care catalizeaz reducerea Fe3+ + e
Fe2+ i astfel conversia met-Hb n Hb
CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Ageni oxidani

met-Hb reductaza met-Hb reductaza


redus oxidat

NADP+ NADPH H+

Calea pentozofosfailor
CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI

Glicohemoglobina

gruprile -NH2 ale resturilor de valin de la capetele


N-terminale din componena protomerilor b din Hb A
reacioneaz neenzimatic cu glucoza liber din snge
formnd baze Schiff

nivelul Hb A1c depinde de nivelul glucozei i durata


meninerii la valori ridicate a concentraiei acesteia
CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI

Glicohemoglobina

un indicator al hiperglicemiilor cronice este


reprezentat de proteinele glicozilate: hemoglobina,
albumina, fructozamina

hemoglobina este preferat altor proteine pentru c


t1/2 este lung, aproximativ durata de via a
hematiilor 120 zile

albumina are t1/2 de 20 zile


CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

definiie sunt afeciuni genetice determinate


de sinteza unor tipuri de hemoglobin care nu
mai prezint funcie biologic (hemoglobine
patologice), precum i de sinteza unor cantiti
insuficiente de Hb datorat deficienei sintezei
globinei

clasificare:
o hemoglobinopatii prin deficit calitativ
o hemoglobinopatii prin deficit cantitativ
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie


falciform, siclemie sau drepanocitoz

afeciune ereditar determinat de o mutaie


punctiform la nivelul genei responsabile de sinteza
lanurilor ale Hb (mutaie pe suprafaa moleculei Hb)

este o afeciune cu transmitere autozomal recesiv,


devenind manifest clinic la persoanele care au
motenit 2 gene mutante (cte o gen de la fiecare
genitor)
Mutaie punctiform n
secvena ADN

Mutaie cu sens greit

.GAG .GTG

-GAG- Secvena ARN -GUG-

aa1-aa2-aa3-aa4- aa1-aa2-aa3-aa4-
aa5-Glu-aa7.aan aa5-Val- aa7.aan
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform,


siclemie sau drepanocitoz

rezultatul mutaiei este sinteza unei hemoglobine


anormale, n care un rest de Val (aminoacid cu
radical nepolar) nlocuiete restului de Glu6
(aminoacid cu radical polar ncrcat electric
negativ)

Hb S conine 2 lanuri i 2 lanuri s (22s)

Hb S determin apariia fenomenului de siclizare


CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform,


siclemie sau drepanocitoz

nlocuirea unui aminoacid polar cu unul nepolar


determin rearanjarea spaial a lanului , care are
ca rezultat apariia unei protuberane pe suprafaa
lanului

aceast protuberan ptrunde ntr-o concavitate


complementar situat pe lanul a altei molecule
de Hb, astfel deoxi-Hb S sufer un proces de
polimerizare
s

s
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

Imagine prelucrat folosid imagini preluate de pe site-ul


Wikipedia (Free encyclopedia)
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform,
siclemie sau drepanocitoz

polimerizarea deoxi-Hb S determin apariia unei


reele de polimeri fibroi, care rigidizeaz i
distorsioneaz eritrocitele

eritrocitele iau un aspect falciform caracteristic


(celule n form de secer)

eritrocitele nu se mai pot deplasa cu uurin prin


vasele mici i rmn blocate n lumenul capilar
determinnd obstrucia vaselor sanguine mici
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
hemoglobinopatia Hammersmith

afeciune ereditar determinat de o mutaie


punctiform la nivelul genei responsabile de sinteza
lanurilor ale Hb (mutaie n interiorul moleculei de
Hb)

rezultatul mutaiei este sinteza unei hemoglobine


anormale, n care un restul de Phe42 a lanului
este nlocuit cu un rest de Ser

produii degradrii lanurile globinei mutante sunt


insolubili, i vor polimeriza formnd corpusculii
Heinz
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
o hemoglobinopatia o hemoglobinopatia
Boston Saskatoon
rezultatul mutaiei rezultatul mutaiei genice
genice este nlocuirea este nlocuirea restului
restului de His58 a de His63 a lanului cu
lanului cu un rest de un rest de Tyr
Tyr heterozigoii sunt
cele 2 nlocuirile asimptomatici, cu
determin meninerea excepia prezenei
fierului n stare de cianozei
oxidat (Fe3+), astfel Hb starea de homozigot
i pierde capacitatea de este incompatibil cu
transport al oxigenului viaa
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

Talasemiile clasificare

talasemiile talasemiile
apar prin mutaii de apar prin mutaii
tip deleie care produc punctiforme care afecteaz
scderea sintezei ARNm funcional, astfel
lanurilor sinteza lanurilor este
sinteza lanurilor i redus sau absent
este pstrat sinteza lanurilor este
pstrat n limite normale
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

talasemiile

sunt afeciuni determinate de sinteza redus sau


absent a lanurilor globinice

genomul uman conine 4 copii ale genei globinice;


deleia lor determin diferite grade de deficite
cantitative ale sintezei lanurilor

cte o pereche de gene se gsete pe fiecare


cromozom 16
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
este afectat numai una dintre gene
1. forma
heterozigot stare de purttor silenios
nu prezint manifestare clinic
2. forma
homozigot talasemia minor
dubl sau
heterozigot stare de purttor care transmite boala
dubl
sunt afectate 3 gene
Hb H este format din 4 lanuri (4)
3. hemoglobi-
nopatia H Hb Bart (4)
forme uoare i moderate de anemie
hemolitic
4. forma toate cele 4 gene sunt nefuncionale
homozigot anemie sever incompatibil cu viaa
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
talasemiile
sunt afeciuni determinate de sinteza redus sau
absent a lanurilor globinice

genomul uman conine numai 2 copii ale genei


globinice

cte o gen pe fiecare cromozom 11

lanurile se sintetizeaz n limite normale dar


aceste nu pot forma tetrameri stabili, precipitndu-
se i determinnd moartea prematur celular
CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
este deficitar o singur gen
se sintetizeaz n cantiti reduse
talasemia lanuri
manifestrile clinice apar strict dup
minor natere
de obicei nu necesit tratament de
specialitate
ambele gene sunt deficitare
nou-nscui , aparent sntoi la
talasemia natere, pot dezvolta anemie sever
major n primii 2 ani de via
(anemia
Cooley) necesit transfuzii regulate
transplantul de MO poate fi o an
pentru aceti pacieni