VECTOR pTrcHis2 A

Yulieth Padilla, Roberth Cardenas, Hussey Quevedo

Biotecnologia II
2017
 Sitio de
Promotor Seleccin Tag escisin de Anfitrin Origen Fuente Descripcin
proteasa
Vector de
trc / lac Ampicilina C-His none BL21 pUC Invitrogen
expresin

Nuestros vectores pTrcHis A, B y C

estn diseados para ofrecer una
iniciacin de la traduccin mejorada y
una expresin de alto nivel en E. coli

Caracteristicas:

alto nivel de transcripcin debido al

promotor.
eficacia de traduccin mejorada de
genes eucariotas en E. coli
El lacO (operador) y lacIq gen represor
para la regulacin transcripcional en
cualquier cepa de E. coli
regin promotora trc: bases 190-382
-35 regin: bases 193-198
-10 regin: bases 216-221
operador lac (lacO): bases 228-248
seal antiterminacin rrnB: bases 264-333
regin del gen 10: bases 346-354
Sitio de unin al ribosoma: bases 369-373
pTrcHis sitio de cebado directo: bases 370-390
Minicistron ORF: bases 383-409
Reinicio RBS: bases 398-403
Expresin ATG: bases 413-415
Sitio de clonacin mltiple: bases 411-464
eptopo myc: bases 471-503
Terminadores transcripcionales rrnB T1 y T2: bases 639-796
Resistencia a la ampicilina ORF: bases 1076-1936
Origen ColE1: bases 2081-2754
Lac Repressor (lacIq)

Fuerte promotor de E. coli, un hbrido entre los

promotores trp y lac UV5.
Una etiqueta myc es una
protena polipeptdica derivada del producto
del gen c-myc que se puede agregar a una
protena usando tecnologa de ADN
recombinante . Se puede usar
para cromatografa de afinidad , luego se usa
para separar protenas recombinantes,
sobreexpresadas, de protenas de tipo salvaje
expresadas por el organismo
husped. Tambin se puede usar en el
aislamiento de complejos proteicos con
mltiples subunidades.

Una etiqueta myc puede usarse en muchos

ensayos diferentes que requieren
reconocimiento por un anticuerpo . Si no hay
anticuerpos contra la protena estudiada, la
adicin de una etiqueta myc permite seguir la
protena con un anticuerpo contra el eptopo
Myc. Los ejemplos son estudios de localizacin
celular por inmunofluorescencia o deteccin
por transferencia de Western .
 Es un anfitrin ejemplar para la expresin de protenas
recombinantes. Como una cepa de E. coli B, carece adems de la
proteasa principal, codificada por el gen lon, que cataliza la
escisin endoproteoltica de protenas daadas y recombinantes
en la clula.

BL21 E. coli competente es una cepa de E. coli

de expresin no T7 ampliamente utilizada y es
adecuada para la transformacin y la expresin de
protenas. Esta cepa no expresa la ARN polimerasa T7.

Ideal para vectores de expresin Plac, Ptac, Ptrc.