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MEDICAL PARASITOLOGY

ANNÉE UNIVERSITAIRE 2017-2018

TRAVAUX PRATIQUES 6
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LES FUNGI HYALINS NON
SEPTÉS (ZYGOMYCÈTES
D’INTÉRÊT MÉDICAL)

LES FUNGI HYALINS SEPTÉS


2 (ASPERGILLUS)
LES CARACTÉRISTIQUES GÉNÉRALES DES
FUNGI HYALINS
NON SEPTÉS (ZYGOMYCÈTES D’INTÉRÊT
MÉDICAL)

 Les Fungi hyalins non septés (zygomycètes) se


caractérisent:

 Macroscopiquement par :
 l’aspect laineux de la colonie,

 la couleur blanche-grisâtre,

 le développement rapide, invasif;

 Microscopiquement: par la présence du mycélium


non septé, formé d’hyphes hyalins, à diamètre 3
irrégulier.
REPRODUCTION:
 Asexuée:

 est assurée par les endospores produites à l’intérieur


des structures appelées sporocystes (sporanges)

 les sporocystes contiennent des sporangiospores, qui


sont diffusés au milieu environnant par la déhiscence
de la paroi du sporocyste

 le filament mycélien qui soutient le sporange s’appelle


sporocystophore (sporangiophore),

 la jonction entre les deux éléments est connue sous le4


nom d’ apophyse.
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 Sexuée:
 se réalise par:

 homothalisme (entre structures appartenant au

même individu)
 hétérothalisme (entre structures appartenant à
des individus différents)

 se matérialise par la formation des zygospores (spores


sexuées).

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HABITAT:
 sol,
 matière organique en décomposition,

 fruits,

 graines de céréales,

 restes d’aliments.

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PATHOGÉNIE:

 Les Fungi de la famille Mucorales:

 Absidia, Rhizopus, Mucor, Rhizomucor,

 déterminent des infections pour les pacients


immunodéprimés,

 des infections cutanées et viscérales profondes


(formes rhino-cérébrales, pulmonaires, gastro-
intestinales, disséminées),

 prognostic non favorable pour la majorité des


pacients. 8
 Les Fungi de la famille Entomophthorales

 Conidiobolus, Basidiobolus,

 déterminent des infections chez les pacients


immunocompétents,

 des infections localisées dans le tissu sous-cutané,

 présentent un prognostic favorable.

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PRODUITS PATHOLOGIQUES:

 aspiration bronchique dans les infections


respiratoires,

 raclage ou biopsie dans les mycoses cutanées


(souvent au niveau du visage),

 LCR dans la zygomycose rhino-cérébrale,

 fréquent chez les personnes diabétiques.

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L’EXAMEN MICROSCOPIQUE DIRECT:

 préparés microscopiques similaires aux frottis


colorés Gomori ou avec calcofluor

 on visualise:
 des filaments mycéliens larges, jusqu’à une

épaisseur de 25 μm,
 à diamètre irrégulier,

 ramifiés sous forme d’angle droit.

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LA CULTURE DES PRÉLEVÉS:

 sur des milieux usuels, sans ajouter de la


cycloheximide

 la température d’incubation recommandée


est de 370C.

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L’IDENTIFICATION DES GENRES ET DES
ESPÈCES:

 Caractéristiques de la culture:
 colonies laineuses, à développement rapide, de
couleur blanche-grisâtre,
 à la surface, on remarque les sporocystes sous
forme de granules grises-noires.

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 Caractéristiques morphologiques:

 peuvent être observées par:


 le préparé extemporané avec scotch en bleu-

lactophénol
 la dilacération du mycélium avec des

aiguilles en bleu- lactophénol

 on poursuit les détails morphologiques pour


l’établissement du genre

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Genre Rhizoïdes Sporangio Sporocyste Apophyse Sporangios
phore pores
ramifié
Rhizopus ++ non sphérique + Angulaires,
striées
Absidia + oui piriforme ++ Rondes-
ovoïdes,
lisses

Rhizomuco + oui sphérique _ Rondes-


r ovoïdes,
lisses

Mucor _ oui sphérique - Rondes-


ovoïdes,
lisses

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FUNGI HYALINS SEPTÉS
(ASPERGILLUS)

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 Généralités:
 Le terme de „hyalin” se réfère au manque du
pigment brun-noir du niveau des hyphes, in vivo.

 Habitat:
 sol,
 air,
 plantes.

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 Genres:
 Aspergillus

 Penicillium

 Fusarium

 Acremonium

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 L’examen microscopique direct:

 s’effectue à l’aide des prélevés à l’état frais, avec ou


sans coloration préalable (calcofluor, Giemsa):
 biopsies (frottis par empreinte),

 expectorations (après traitement avec

N-acétylcystéine),
 hémocultures,

 prélevés superficiels- cutanés, sinusaux,


conjonctivaux, au niveau des ongles ou auriculaires.

 les éléments morphologiques fréquemment identifiables


sont les fragments d’hyphes, fins (3-12μm en diamètre),
réguliers, septés, ramifiés dichotomiquement en angle 19
aigu (450)
ASPERGILLUS FUMIGATUS

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ASPERGILLUS FUMIGATUS

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 La culture des prélevés:

 Milieu PDA (potato-dextrose-agar) ou agar avec


matţ- milieux électifs pour les fungi
filamenteux

 Milieu Agar Sabouraud avec chloramphénicol

 Milieu Agar Czapek- milieu sélectif pour


Aspergillus

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 Incubation:
 370C pour les prélevés profonds,

 300C pour les prélevés superficiels,

 Aspergillus fumigatus peut se développer à 450C.

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 Caractéristiques de la culture:

 Aspergillus fumigatus: colonie bleue-verdâtre


foncé, parfois pigment rouge,

 Aspergillus niger: la superficie de la colonie noire


(grâce aux bouts aspergillaires), aspect
granulaire,

 Aspergillus flavus: colonie jaune-verdâtre, aspect


granulaire.
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ASPERGILLUS NIGER

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 Penicillium spp: colonies à développement rapide,
moelleuses, jaunes, blanches, vertes ou
rougeâtres selon l’espèce,

 Fusarium spp: colonies laineuses, de couleur rose,

 Acremonium spp: colonies veloutées, de couleur


blanche-jaunâtre ou rose.

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LE GENRE ASPERGILLUS

 du point de vue morpho-structural, les fungi de ce


genre se caractérisent par la présence de formations
de fructification à l’aspect particulier, connues sous
le nom de bouts aspergillaires.

 au niveau de ces structures se forment les spores


asexuées ou les conidies.

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 Selon la rangée des cellules conidiogènes, les
bouts aspergillaires peuvent être:

 unisériés (une seule rangée de cellules


conidiogènes – les phialides) ou

 bisériés (deux lignes de cellules


conidiogènes-métules + phialides).

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 Les espèces du genre Aspergillus peuvent être:

 unisériées (présentent uniquement des bouts


aspergillaires unisériés),

 uni-bisériées (présentent dans la même


culture des bouts aspergillaires unisériés aussi
bien que bisériés) ou

 bisériées (présentent uniquement des bouts


aspergillaires bisériés).

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LE DIAGNOSTIC DE LABORATOIRE

1.Le prélèvement des produits pathologiques doit se


faire attentivement afin de limiter la contamination.

 Les produits pathologiques:


 aspiration bronchique: aspergilose pulmonaire
invasive, aspergilose bronchopulmonaire
allergique
 sécrétion de la ponction sinusale
 LCR
 raclage tégumentaire
 sang dans l’endocardite

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 Le transport du prélevé se fait immédiatement.
2.L’examen direct peut relever:

des filaments mycéliens, septés, à diamètre de 2 – 4


μm, ramifiés dichotomiquement (dans l’aspiration
bronchique, le lavage bronchopulmonaire, etc.)

la tête aspergillaire (dans les otites, les sinusites)

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3.Cultivation:

 Aspergillus se développe sur milieu Czapek, milieu


Sabouraud avec gentamicine ou chloramphénicol.

 L’apparition rapide, dans 2 – 3 jours, de colonies


caractéristiques, permet le diagnostic de genre.

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4.Identification:
 L’identification de l’espèce se fait à partir des
caractéstiques microscopiques et de culture.

5.L’Antifongigramme: permet l’établissement de la


sensibilité aux antifongiques.

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