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Biologia Celular – Capítulo 10

Biogénese Membranar
Retículo Endoplasmático:
• Durante tradução, são importadas proteínas para o retículo
endoplasmático – translocação co-traducional, geralmente;
Por outro lado, proteínas são importadas para mitocôndrias ou outros
organelos após a tradução: Daí os ribossomas estarem associados ao RE e
não a outras membranas;

RE liso:
Regiões das quais vesículas com biomoléculas novas se deslocam para o
complexo de Golgi – RE transicional;
RE rugoso:
Ribossomas, cisternas;
Túbulos

“Folhas” ou
cisternas
(sheets)
Variações Células musculares: retículo sarcoplásmico – release and reuptake of
Ca2+ by the sarcoplasmic reticulum trigger myofibril contraction and
no RE: relaxation,

Células especializadas em metabolismo lipídico: cells synthesize steroid


hormones from cholesterol - expanded smooth ER accommodates the
enzymes that make cholesterol and modify it to form the hormones;

Hepatócito (fígado): RE liso abundante – produção de partículas de


lipoproteínas; enzimas situadas na membrana;
Translocação Co-traducional

2 tipos de proteínas: transmembranares (ficarão integradas na membrana do RE) e solúveis (serão libertadas para o lúmen do RE);
Técnica utilizada no estudo – homogenização  rutura de RE em fragmentos, formando vesículas – microssomas (com e sem ribossomas na superfície);
Processo:
• RNA mensageiro começa a ser traduzido no citosol;
• Tradução de sequência sinalizadora (aminoácidos hidrofóbicos)
• Sequência guiada para RE por: signal-recognition particle (SRP) e SRP receptor; SRP: uma extremidade ligada a sequência, outra impede
enlongamento de tradução*
• SRP liga-se a recetor de SRP (situado na membrana do RE)
• Translocão proteico (complex sec61) transfere cadeia traduzida através da membrana (tradução retomada)
• SRP e seu recetor libertados do ribossoma e tradução continua
• Cleavage of the signal sequence by signal peptidase
• Estrutura: complexo sec61 – abertura de poro permite passagem de cadeia peptídica; também ocorre abertura lateral: allows release of a cleaved
signal peptide into the membrane and for the integration of transmembrane proteins into the bilayer (Figura 4)

• Side note: SRP - estrutura cristalina de proteína permite que complexo se ligue a várias sequências (binding site is hydrophobic pocket lined by methionines. Methionines have unbranched, flexible
side chains, the pocket is sufficiently plastic to accommodate different hydrophobic signal sequences)
*important for secreted and lysosomal hydrolases, which could wreak havoc in the cytosol; cells that secrete large amounts of hydrolases, however, take the added precaution of having high
concentrations of hydrolase inhibitors in their cytosol.
Figura 3

Figura 1 –
Ribossoma SRP

Figura 2 - Microssomas
Figura 5 – estrutura sec61
Translocação Pós-traducional
Comum em:
• Membrana do RE de leveduras;
• Membrana plasmática de bactérias;
Processo:
• Bactérias: Proteína motora de translocação – ATPase SecA – liga-se a lado citosólico de
translocador  ocorrem mudanças cíclicas conduzidas pela hidrólise de ATP  por cada
moléc. ATP hidrolisada: porção de SecA é inserida em poro de translocador levando
segmento de proteína passageira  cadeia é empurrada ao longo da membrana;
• Eucariontes: Tradução  Chaperonas citosólicas mantém sequência traduzida
desenrolada  Sequências sinalizadoras são reconhecidas por recetores (complexo
Sec62/63) associados ao translocão  outra chaperona – BiP – empurra cadeia através
do canal
• DÚVIDA: “Na tradução pós-traducional, proteínas acessórias que se associam ao
complexo sec61. Proteínas acessórias depositam BiP, que vem de um translocador
presente no lumen do RE, na cadeia traduzida.” Não percebi, donde é que vem o BiP?
´Proteínas acessórias são complexo com sec62, 63, …?
• Características, funções e formação dos lisossomas.
• Características e funções dos vacúolos das células vegetais
• Características dos diversos tipos de endocitose: fagocitose, pinocit
ose e endocitose mediada.
• Mecanismo de formação das vesículas revestidas de clatrina.
• Exemplo da endocitose do colesterol (partículas LDL) e de casos de
doenças associadas ao mau funcionamento dos lisossomas e da en
docitose mediada por receptores.
Características, funções e formação dos lisoss
omas.
Características/Estrutura:
• Lisossoma: organelo (com membrana) que contem enzimas digestivas
(hidrolases ácidas – são funcionais em meio ácido, são ativadas por
clivagem proteolítica);

• Membrana: bicamada de fosfolípidos, proteínas integradas


(lysosome-associated membrane proteins (LAMPS)), bomba tipo V
(ATPase);
• Heterogeneidade – diferentes fases de digestão;
Proteínas glicolisadas – protegidas contra proteases
lisossomais no lúmen;
Membrana mantém pH baixo no interior do lisossoma:
bombas tipo V em membrana: H+  interior de lisossoma;
Enzimas lisossomais funcionam em meio ácido – libertação
de enzimas para citosol (meio neutro) não é prejudicial;
Formação:
• Transcrição e tradução de proteínas lisossomais Passagem
proteínas para complexo de Golgi
• Manose 6-fosfato é adicionado a cadeia peptídica
• Ligação a recetores de manose 6-fosfato
• Formação de vesícula (face trans)
• Fusão com endossoma
• Acidez: dissociação de enzimas de recetores de manose 6-fosfato;

Função:
• Digestão de macromoléculas;
• Autofagia, renovação celular;
Características e funções dos vacúolos das células vegetais

Vacúolo – saco com enzimas digestivas; membrana: tonoplasto –


bicamada lipídica
Função:
• Armazenamento;
• Excreção;
• Hidratação;
• Autólise: ruptura de tonoplasto  libertação componentes de
vacúolo (enzimas);
Características dos diversos tipos de endocitose:
fagocitose, pinocitose e endocitose mediada.
Revisão Sistema Endomembranar
Mecanismo de formação das vesículas revesti
das de clatrina.

Exemplo da endocitose do colesterol (partículas L
DL) e de casos de doenças associadas ao mau fun
cionamento dos lisossomas e da endocitose medi
ada por receptores.

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