INTRODUCCIÓN A LA

TECNOLOGÍA ENZIMÁTICA
Productos obtenidos en cantidades mayores a 1000 t/año por
diferentes compañías con enzimas o células como biocatalizadores
Clasificación de procesos biocatalíticos con enzimas como catalizadores. I debe
realizarse con enzimas en células vivas, II puede realizarse con enzimas en células vivas o
muertas, y III con enzimas aisladas. Para I se usan células diseñadas, para II células con
alto rendimiento para reacciones de 1 sola etapa que no requieren regeneración de
cosustratos.
 Comparación de procesos antigüo
(químico) y nuevo (enzimático) para la
hidrólisis de penicilina G. El producto,
ácido 6-amino-penicilánico (6-APA) se
usa para síntesis de penicilinas semi-
sintéticas con cadenas laterales
diferentes al ácido penicilánico. En los
procesos enzimáticos, el subproducto,
ácido fenilacético, puede reciclarse en
la producción de penicilina por
fermentación.
VENTAJAS DE ENZIMAS Y CÉLULAS COMO BIOCATALIZADORES
COMPARADOS CON CATALIZADORES QUÍMICOS

Ventajas
•Estereo- y -regio- selectivas
•Requieren bajas T (0-110ºC)
•Bajo consumo de energía
•Activos a pH 2-12
•No tóxicos si se usan correctamente
•Menos subproductos
•Pueden degradarse biológicamente
•Pueden re-utilizarse (inmovilizarse)
•Pueden producirse en cantidades ilimitadas
 Desventajas de E y Células vs
Catalizadores Químicos
Desventajas

•Las células y las enzimas son: inestables a altas

T; inestables a extremos de pH; inestables con
solventes agresivos; se inhiben por algunos iones
metálicos; hidrolizados por peptidasas
•Algunas enzimas son muy caras
•Requieren co-sustratos caros
•Cuando se inhalan o se ingieren, las enzimas
como cualquier proteína extraña, potenciales
alérgenos
 Metas de sustentabilidad económica y
ambiental de procesos enzimáticos
Metas Medios para lograr las metas
Reducción Aumento de rendimiento
de costos Reuso del biocatalizador y mejora
de productividad por
inmovilización
Reducción de costos de procesos:
Filtración, Energía, Maduración de
quesos, Malteado para cervecería
Acortar tiempos de hidrólisis de
almidón
Mejora de Producir isómeros con prop.
calidad y biológica deseada
propiedade Mejorar conservación de alimentos
s biológicas Mejorar el sabor (dulzura)
Productos/procesos
Hidrólisis de penicilina y
cefalosporina C
Isomerización de glucosa
Producción de isomaltulosa
Producción de jugos y
vinos
Detergentes de baja T
Aumento en vel. de
procesos
Resolución de racematos
Modificación de proteínas,
harina para horneado,
Transesterificación de
aceites vegetales, biodiesel
 Metas económicas y de
sustentabilidad ambiental
Metas Medios para lograr las metas Productos/procesos

Uso de Uso de suproductos de la Bebidas a partir de

nuevas industria de alimentos y del suero
fuentes papel (suero, tortas de Alimentación animal
regenerable filtración de aceites vegetales, Biocombustibles
s de agua residual) (biodiesel, biogas,
materias Reducción de subproductos no bioetanol)
primas reciclables Producción de piel,
Blanqueado de papel
Reducción Reciclaje de desperdicios Utilización de suero
de impacto
ambiental
División de los procesos enzimáticos

1) Procesos controlados por el equilibrio

La concentración ó propiedad deseada del producto tiene
un máximo al final del proceso (B en la sig. Figura). El
equilibrio químico depende del pH y T

2) Procesos controlados cinéticamente

La concentración ó propiedad deseada del producto
(longitud de fibras o suavidad en los textiles o papel)
alcanza un máximo ( A en la sig. Figura), cuya
concentración o propiedades dependen de la enzima,
pH y T. El proceso debe detenerse cuando se alcanza
el máximo.
 División de los procesos
enzimáticos
• En ambos casos el tiempo para alcanzar el
máximo depende de la enzima y su
concentración, así como si el proceso es endo- o
exo- térmico, dependencia de la ctes. de equilibro
en cuanto al pH y T, solubilidad y estabilidad del
sustrato y de los productos, etc.
• Las enzimas se usan a [S] hasta 1 M, mientras que
en sistemas vivos son ≤0.01 M.
• A [S] y de [P] usadas en la tecnología enzimática,
pueden formarse suproductos indeseables en
reacciones bimoleculares.
Curvas de progreso de procesos controlados por equilibrio
(línea sólida) ó cinéticamente (punteada). Los puntos finales
son A para el control cinético y B para el de equilibrio.
 Hidrólisis de lactosa
• El suero contiene 5% de lactosa, 1% proteína, 1% aminoácidos y 1%
de iones (Na+, Ca2+, PO43- , etc.).
• Subproducto de 107 tons/año, pero en Asia y Africa existe mucha
población de intolerantes.
• β-galactosidasa hidroliza la lactosa, pero también la síntesis
cinéticamente controlada de tri y tetra- sacáridos.
• Los oligosacáridos son subproductos en la hidrólisis de lactosa
controlada por el equilibrio.
• En el proceso cinéticamente controlado los oligosacáridos pueden
usarse como prebióticos, y los subproductos son la hidrólisis a
monosacáridos.
• Los subproductos deben minimizarse por selección de condiciones
del proceso y biocatalizador
Pasos que deben considerarse en el diseño de un proceso enzimático con enzimas aisladas
o de células muertas (II y III fig. anterior) para obtener productos actuales o nuevos.
Ventana de proceso = rango en el plano pH-T (pH-[S], pH-[P], T-[S], T-[P]) llevándose la
reacción con cierto rendimiento o pureza óptica, y donde las propiedades del catalizador
(actividad, selectividad, estabilidad) son óptimas.

Para procesos
multienzimáticos con
células vivas (I), el
diseño óptimo requiere
ingeniería metabólica
(IM), y otra condiciones
en la frontera. Con IM
óptima habrá
conversión casi
cuantitativa del S a P.
Debido a las muchas
reacciones involucradas,
el tiempo de las
reacciones no puede
describirse tan
cuantitvamente como
aquí.
 Campos donde se requerirán grandes cantidades de
enzimas para lleva a cabo procesos mas sostenibles para
satisfacer las necesidades humanas
• Producción de compuestos finos ópticamente puros. Se
espera que solo el isómero con la actividad biológica deseable
sea aprobado por las agencias regulatorias. Actualmente los
productos farmacéuticos son racematos con rendimiento
máximo del 50%, pero un proceso sustentable requiere
racemizar el otro 50%. Se requiere entonces la integración de
un proceso químico racional con un proceso enzimático que
permitirá una resolución cinética dinámica ó síntesis
asimétrica
• Síntesis de antibióticos
• Síntesis de intermediarios farmacéuticos
• Producción de papel o reciclaje para reducir subproductos y
consumo de energía
 Campos donde se requerirán grandes cantidades de
enzimas para lleva a cabo procesos mas sostenibles para
satisfacer las necesidades humanas

• Síntesis regio-y estereo- selectiva de oligosacáridos para

alimentos y productos farmacéuticos
• Glicosilación selectiva de péptidos, proteínas y otros
medicamentos
• Modificación de lípidos, grasas y aceites (grasas libres de ácidos
grasos trans, aceites con diglicéridos, reducción de fosfolípidos)
• Biotecnología ambiental
• Síntesis de biocombustibles a partir de biomasa.
• Producción de productos a granel a partir de biomasa en
biorefinerías. Esta aplicación será muy importante para cambiar
de materia prima limitada (fósil) a materia prima renovable (bio-
basada).