Pruebas

Transfusionales II
 Sistema Inmune
Antígenos Antígenos
propios RECONOCIMIENTO extraños

Sistema Inmune
SIN ATAQUE ATAQUE

Respuesta
Imnune
 ANTIGENOS

Ag libres • PROTEINAS

• HIDRATOS DE
CARBONO
Ag fijado
a la célula • LIPIDOS
Tamizaje de Sangre
 Riesgo de Transmisión
Infecciosa por Transfusión

Agente Riesgo Estimado

 Hepatitis C 1:1.2 millones

 Hepatitis B 1:150,000
 HTLV-1 y 2 1:641,000
 VIH 1:1.4 millones
 Bacteria (GR) ≥1:38,565
 Bacteria (RDP 6 Unidades) ≥1:362
 Bacteria (Plaquetas, aféresis) ≥1:3571

Strong DM & Katz L. Trends Mol Med 8:355-358, 2002

¿ES IMPORTANTE REALIZAR LAS PRUEBAS
DE TAMIZAJE PARA AGENTES INFECCIOSOS
EN BANCO DE SANGRE?

SÍ, es importante realizarlas, con el fin de

asegurar que los componentes a transfundir tenga
el más mínimo riesgo de transmitir alguna
enfermedad infecciosa.
 ELISAs

CARACTERISTICAS DE LA Rx Ag-Ac

Elevada especificidad de la Unión Ag-Ac es decir, de los

Anticuerpos hacia sus correspondientes Antígenos
(Reacción Primaria).

Capacidad de evidenciar esta Unión o Reacción

Antígeno-Anticuerpo (Reacción Secundaria).
 CONSIDERACIONES A TOMAR EN LA
ELECCIÓN Y REALIZACIÓN DE UN ELISA
PARA TAMIZAJE EN BANCO DE SANGRE
- PERIODO DE VENTANA -
Anti-HIV 1-2: 22 días
Anti HIV 1-2 / Ag p24: 12 días
HBsAg: 56 días
Anti-HBc: 70 días
Anti-HTLV I-II: 51 días
Anti-HCV 2da. Gen.: 82 días
Anti-HCV 3ra. Gen.: 70 días
HCV Ag Core: 14 días
 VIH: Transmisión
• VIA SEXUAL
Relaciones heterosexuales
Relaciones homosexuales
Relaciones bisexuales

• VIA PARENTERAL
Transfusión de hemocomponentes.
Uso drogas intravenosas, instrumental
quirúrgico, etc.

• TRANSMISIÓN VERTICAL
De madre a hijo
 PRINCIPALES ANTÍGENOS DEL VIH
Denominación Proteína Gen
gp160 Precursora de la envoltura

gp120 Glucoproteína externa env

gp41 Glucoproteína transmembrana

p55
Precursora del core
p40
gag
p24 Proteína principal

p17 Proteína de la matriz

p66
Transcriptasa inversa
p51 pol
p31 Endonucleasa
¿QUÉ ES EL PERIODO DE VENTANA?

• Es el tiempo que transcurre desde que el

agente viral ingresa al huésped hasta la
detección del Ag/Ac por métodos
serológicos.

Ag-VIH

Ac-VIH
 Prueba de
Compatibilidad
 Prueba de Antiglobulina +

COOMBS DIRECTO COOMBS INDIRECTO

 Test de Coombs Directo:
Indicaciones

• Diagnóstico de:

– Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido

– Anemia Hemolítica Autoinmune

– Anemia Hemolítica Inducida por Fármacos

– Reacciones Transfusionales
 Test de Coombs Indirecto:
Indicaciones

• Detección de Anticuerpos

• Determinación de Fenotipos

• Prueba cruzada
 Prueba Cruzada

• Se efectúa antes de transfundir la sangre para

asegurarse de que los hematíes del donante son
compatibles con el receptor
• Comprenden la determinación del grupo ABO y Rh del
receptor así como el estudio de la presencia de
anticuerpos irregulares en el suero.
• Si hay anticuerpos positivos es necesario
identificarlos.
 Receptor Donante

Suero Hematíes
Receptor Donante

+
Aglutina No aglutina
No compatible Compatible
 Tecnología de Gel

 Sistema utilizado en inmunohematología para investigar e identificar

antígenos y anticuerpos antieritrocitarios.

 Técnica que estandariza:

 La lectura de la reacción antígeno-anticuerpo con facilidad y repetitividad.

 El uso de reactivos, tiempos y lecturas disminuyendo sustancialmente la

influencia de la mano de operador.

 Objetivo
 Encontrar una forma de estabilizar las reacciones de aglutinación

 Reducir los resultados falsamente negativos a consecuencia de una técnica

inapropiada

 Crear un método de interpretaciones sencillas y constantes.

Partes de las Tarjetas de Gel

Cámara de Reacción

Sobrenadante

Gel de Sephadex
 Nuevo soporte
Facilidad de
dispensación Visibilidad y
definición
Diseño optimo
de la cámara Burbuja de
de reacción aire
Gel de matriz Visibilidad de
compacta la columna
Fondo en “V”
Resultados claros
Perfil de 8
columnas
Instrumentación

Manual Semiautomatizado

Automatización Total
Se debe observar claramente
la diferencia entre el Gel y
el sobrenadante.
El Gel debe tener una consistencia uniforme libre de burbujas
y/o partículas extrañas.
No se debe observar ningún cambio de coloración en el Gel.
 Avidez

Es la medida del tiempo en el cual se observa

aglutinación al reaccionar un anticuerpo con su
correspondiente antígeno
 Generalidades

 Volumen: 250 ml
 Contenido: 200 ml glóbulos rojos, 50 ml Plasma
y preservantes
 Almacenaje:
35 días en CPDA-1 a 1-6 ºC
42 días en ADSOL a 1-6 ºC
Significado de la prueba de
antiglobulina directa positiva.
Las causas de una prueba positiva pueden ser las
siguientes:
 Un anticuerpo en la superficie eritrocitaria con o sin
anemia hemolítica.
 Un aloanticuerpo en la superficie eritrocitaria, como
por ejemplo en la enfermedad hemolítica del recién
nacido o tras una transfusión incompatible.
 Anticuerpos provocados por fármacos adsorbidos sobre
el eritrocito.
 Globulinas normales adsorbidas sobre la superficie
eritrocitaria resultantes del daño por fármacos (por
ejemplo, algunas cefalosporinas).
PAD positiva en sujetos
normales
 La aparición de una PAD claramente positiva en un
sujeto aparentemente sano es un fenómeno
infrecuente, aunque bien conocido.
 En un informe posterior, Gorst y cols. Estimaron que la
prevalencia era alrededor de uno por cada 14.000 con la
probabilidad creciente de obtener una positividad en la
prueba al aumentar la edad del paciente.
 Su informe y los informes sucesivos constatan que, por
lo general el hallazgo de una PAD positiva utilizando un
suero anti-IgG en una persona aparentemente sana
tiene poca importancia clínica, y que es muy poco
frecuente que posteriormente se pueda desarrollar una
AHA patente.
 En algunos de estos individuos, la PAD finalmente se
negativiza.
PAD positiva en pacientes
hospitalizados.
 En contraste con la rareza de la PAD positiva en
personas sanas, la positividad de las pruebas es mucho
más frecuente en pacientes hospitalizados.
Resultados falsamente
negativos de las pruebas
antiglobulina:
Hay diversas causas de resultados falsamente negativos de
las pruebas:
 Lavado inadecuado de hematíes; los antisueros pueden
ser neutralizados por inmunoglobulinas o complemento
e suero o en el plasma circulante.
 Agitación excesiva en la fase de lectura; esto puede
desagregar la aglutinación conduciendo a un resultado
falso negativo.
 Uso de antisueros con escasa potencia, por lo que no se
detectan las células con una sensibilización débil.
 Uso de antisueros a los que les falta el anticuerpo
correspondiente a la sub clase de inmunoglobulina,
responsable de la sensibilización del eritrocito.
 Presencia de un anticuerpo fácilmente disociable que se
extrae con solvente en el proceso de lavado.
Paquete Globular
 Indicaciones

 Para aumentar la capacidad de transporte de oxígeno en

pacientes anémicos
 Umbral: 7 gr/dl (Hb) o 21% (Hto)
 Factores de los pacientes:
 Edad
 Etiología y magnitud de la anemia
 Estabilidad hemodinámica
 Coexistencia de condiciones cardíacas, pulmonares o vasculares
 Indicaciones

01 UNIDAD DE PAQUETE GLOBULAR

Aumento de Hto en 3 %
Aumento de Hb en 1 gr / dl
• HEMORRAGIAS AGUDAS (Hto no significativo)
• Anemias crónicas (Hb menor a 5 gr / dl)
NO EXISTE UN UMBRAL DE HEMOGLOBINA UNIVERSAL EN EL CUAL
LOS PACIENTES DEBEN SER TRANSFUNDIDOS
 Indicaciones en
Anemia Aguda

PERDIDAS % V.S. COMPENSACION INDICACION

5-15% Mecanismos vasomotores Contraindicada
Compensación con volumen Expansores
15-25%
plasmático Paquete globular
Transfusión masiva
MAYOR 25% Excede capacidad del organismo considerar factores
de coagulación
 Contraindicaciones

 No transfundir para:
 Expansión de volumen

 En sustitución de un hematínico

 Mejorar la cicatrización de heridas