Porque motivo se realizan los

análisis de los suelos

El análisis de suelos es una herramienta fundamental para
evaluar la fertilidad del suelo, su capacidad productiva y
es la base para definir la dosis de nutrientes a aplicar.
Para que el dato analítico reportado por el laboratorio
sea útil, es imprescindible realizar un adecuado
muestreo de suelos, ya que en esta etapa es donde se
define la exactitud de los resultados del análisis de
suelos.
 Bacterias totales por dilución en
placa
• La cuenta de bacterias totales de un sistema se refiere a
las bacterias heterótrofas presentes en el suelo, es
decir, aquellas que obtienen su fuente de carbono a
partir de compuestos orgánicos.
 Metodo
• El conteo de poblaciones microbianas por dilución en
placa es un método simple y rápido para la cuenta viable
de células microbianas en el suelo. Sin embargo, la
cuenta obtenida es generalmente 10 a 100 veces menos
que aquella determinada por cuenta directa por
microscopia.
 Fundamento
• El método de dilución en placa se fundamenta en que
cualquier célula viable inoculada en un medio de cultivo
se multiplica y produce datos de fácil identificación,
como la formación de colonias en placas de agar.
 Interferencias
• Aunque muchos de los heterótrofos se desarrollan bien
en agar nutritivo o medio rico, algunos tienen
requerimientos nutricionales específicos (heterótrofos
exigentes), por ejemplo, vitaminas y sustancias
promotoras del crecimiento, cosubstratos, etcétera, y no
existen medios que puedan proporcionar todos los
nutrimentos necesarios y, por ende, permitir el
crecimiento de todos los microorganismos heterótrofos.
 Material y equipo
• ŒTubos de vidrio de 15 ml para cultivo con 9 ml de
solución salina 0.85% estéril. Œ
• Matraz Erlenmeyer con tapa con 99 ml de solución
salina 0.85% estéril. Œ
• Pipetas de 1 ml y de 0.2 ml, estériles. Œ
• Vórtex. Œ
• Balanza. Œ
• Espátulas. Œ
• Campana de flujo laminar o área estéril. Œ
• Cajas de Petri con medio de cultivo-agar. Œ
• Varilla de vidrio. Œ
• Muestra de suelo o agua. Œ
• Incubadora. Œ
• Papel aluminio estéril.
.Œ
• Matraces o botellas de cultivo 1 L. Œ
• Œ
ŒAgitador magnético. Œ
• Autoclave. Œ
 Soluciones y reactivos
• 1) Solución salina 0.85% estéril. Adicionar 8.5 g de
cloruro de sodio (NaCl) en 1 L de agua destilada.
• 2) Cajas de Petri con medio de cultivo adecuado para el
crecimiento.
• 3) Etanol (CH3-CH2-OH).
• 4) Agar nutritivo.Disolver 15 g de agar nutritivo o lo que
indique el envase del medio de cultivo en 1 L de agua
destilada.
• 5) Agua destilada
Procedimiento
 Hongos totales por dilución en placa

• Los hongos tienen hábitats muy diversos; sin

embargo, la mayoría son terrestres y habitan en el
suelo, desempeñando una actividad importante en
la mineralización del carbono orgánico. Cuando se
compara a los hongos con las bacterias, en general,
estos tienen requerimientos nutricionales muy
simples, pero su desarrollo es más lento, por lo que
requieren mayor tiempo de incubación para su
cultivo.
 Metodo
• El método para el conteo de hongos del suelo es por la
técnica de cuenta por dilución en placa.
• El medio recomendado para la detección y enumeración
de hongos y levaduras es el de papa-dextrosaagar
(PDA) adicionado con rosa de Bengala para permitir el
conteo de hongos, así como la adición de un antibiótico
(estreptomicina) para evitar el crecimiento de bacterias.
 Fundamento
• Sin embargo, en este caso una célula no da origen a
una colonia, sino a una espora o una parte del hongo,
basándose en la habilidad de estos microorganismos
para crecer en medios vegetales (papa), así como en las
propiedades tanto del rosa de Bengala, de limitar el
crecimiento de los hongos permitiendo su conteo, como
de la estreptomicina, de evitar el crecimiento indeseable
de bacterias.
 Interferencias
• Las principales interferencias en este tipo de cultivos
están dadas por el pH del medio de cultivo, prefiriéndose
pH ácidos para el crecimiento de hongos, ya que pH
neutros o alcalinos favorecen el crecimiento de
bacterias; además, si no se evita el crecimiento
bacteriano con el pH, el no incluir un antibiótico también
favorece la contaminación bacteriana.
 Material y equipo
• Œ
Tubos de vidrio de 15 ml para cultivo con 9 ml de solución salina
0.85% estéril. Œ
• Matraz Erlenmeyer con tapa con 99 ml de solución salina 0.85%
estéril. Œ
• Pipetas de 1 ml y de 0.2 ml, estériles. Œ
• Vórtex. Œ
• Balanza.
• ŒEspátulas. Œ
• Campana de flujo laminar o área estéril. Œ
• Cajas de Petri con medio de cultivo-agar.
• ŒVarilla de vidrio. Œ
• Muestra de suelo o agua.
• ŒIncubadora. Œ
• Papel aluminio estéril.
• Matraces o botellas de cultivo 1 L
• Autoclave
• Agitador magnetico
 Reactivos y medios de cultivo
• 1) Agua destilada.
• 2) Medio de cultivo Agar papa-dextrosa (PDA).
• Disolver 39 g de PDA en 1 L de agua destilada.
• 3) Rosa de Bengala.
• 4) Estreptomicina
Procedimiento
 Calculos
• 1) Contar sólo aquellas cajas (diluciones) que contengan
de 30 a 300 colonias.
• 2) Con la siguiente ecuación calcular las UFC/g s.s.
UFC/g s.s. = (NC * 1/FD * 1/ V) / (P * FH).
• Donde:
• UFC/ g s. s. = unidades formadoras de colonias / g de
suelo seco.
• NC = número de colonias en una caja.
• FD = factor de dilución que corresponde a la dilución de
donde se tomó la muestra con la que se inocula la caja
(10-2 a 10-10).
• V= volumen inoculado en la caja = 0.1 ml.
• P = peso de la muestra húmeda = 1 g.
• FH = factor de corrección de humedad (1-
(%humedad/100)).