DILUYO

CONSERVADORES
DEL SEMEN
Prof.(a). M.V. YESSIKA REYES
Prof. M.V. ORLANDO COLINA

Complejo Académico Ing. Agro.

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José Rodolfo Bastidas
 El Diluyente Seminal

Es una solución acuosa que facilita el aumento del volumen

del eyaculado, con el fin de conseguir incrementar las dosis
necesarias y conservar las características de funcionalidad de
las células espermáticas, manteniendo el nivel de fertilidad
preciso.

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 El material seminal
 Liquido de volumen determinado, con esperma en estado biológico
activo, despertado de su anabiosis intraorgánica por acción estimulante
de las glándulas paragénitales, en especial la próstata.
 La esperma en su liquido cuenta con una capacidad energética limitada
que llega a desaparecer por el consumo, poniendo en serio trance la
vida espermática.
 Los productos residuales del material espermático retenidos en el
medio significan a corto plazo un grave peligro de intoxicación
zoospermica.
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 La Muerte Espermática

Estaría relacionada:

a) Volumen del eyaculado

b) Concentración de espermatozoides

c) Actividad particular de la esperma

d) Reservas energéticas del medio

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 Muerte espermática

Milovanok, en 1934, admitió como causas de muerte:

Consumo exhaustivo de material energético “anabiosis de hambre”.

Intoxicación de la esperma por productos residuales, “intoxicación

catabólica”.

Alteraciones morfológicas determinadas por ciertos iones

procedentes de soluciones electrolíticas de origen glandular

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 Vitalidad y Fertilidad de la Esperma

Principios básicos:
a) Reducir la actividad metabólica de la esperma por medios físicos y
químicos totalmente reversibles.

a) Si se recurre a temperaturas bajas, aportar agentes protectores

contra el choque térmico y enfriar lentamente.

a) Evitar la contaminación con protozoos, bacterias u otros agentes

nocivos.

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 Requisitos de un Diluyente
 Presión osmótica isotónica con la sangre de la especie

 Proporcionar un equilibrio adecuado de elementos minerales, esenciales

para la vida espermática

 Aportar nutrientes para su metabolismo aeróbico y anaeróbico

 Suministrar lipoproteínas, lecitinas que protejan a la esperma del choque al

frió.

 Proveer sustancias químicas con poder tampón sobre los productos finales
del metabolismo citospermatico

 Subvenir las necesidades de sustancias reductoras, que protejan las

enzimas celulares dotados de grupos sulfhídricos

 Estar libre de sustancias bacteriales y gérmenes infectivos.

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 Condiciones de los diluyentes
a) Biológicas:

. Isotónico

. Aportar material energético

. Propiedad tampón

. Viscosidad

. No modifique las cargas eléctricas

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b) Sanitarias:

. Máxima asepsia en la preparación

. Adición de agentes bacteriostático

c) Técnico- económico:

. De fácil preparación

. En su aspecto económico.

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 Tipos de diluyentes

 Diluyentes de corta duración: Conservan la calidad del

semen durante 1-3 días. Ejemplo "BTS“, en cerdos.

 Diluyentes de media duración: Conservan el semen

por 4 días.

 Diluyentes de larga duración: Son más complejos en

su composición y preservan el semen hasta por 6 días.

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 Tipos de diluyentes
1) Conservación a Temperatura Ambiente:
a) I.V.T. (Illinois variable temperature):
Citrato sódico deshidratado.......20 grs.
Bicarbonato sódico..................211 grs.
Cloruro potásico......................0,40 grs.
Glucosa...................................3,00 grs.
Sulfanilamida..........................3,00 grs.
b) C.U.E. (Cornell University Extender)
c) Leche de coco
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PRINCIPIOS DE LA CONSERVACIÓN A
TEMPERATURA AMBIENTE

Carbonización del semen: Se inhibe la motilidad y se reduce el

metabolismo espermático mediante la saturación con C0². En
las ampollas de 2,0 ml gasificadas, se conserva la vitalidad
por 6 a 7 días a una temperatura de 18 º a 26 ℃

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2) Conservación Mediante Congelación
 Tris – yema - glicerina
 Lactosa – yema - glicerina
 Citrato – yema - glicerina
 Laiciphos ( leche descremada)
 Método triladyl - concentrat

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Diluyente a base de leche descremada
 Diluyentes en la Inseminación Artificial

El descubrimiento del fosfato-yema (Phillips, 1939), produce un rápido

desarrollo de la inseminación artificial:

a) Aplicación del diluyente citrato-yema

b) La adición de suplementos tamponados a la yema de huevo sobre todo

substrato hidrocarbonados, glucosa o fructosa

c) Determinación del número mínimo de espermatozoides por inseminación

artificial (10 a 12 millones de esp/mm³)
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 d) La utilización de quimioterapicos y antibioticos.
e) Descubrimiento de la importancia de la glicerina.

El fosfato-yema, fue sustituido por citrato-yema de Salisbury por ser

anesosmotico (perfecta dilución y solución tampón)

Ms. Sc. Alexander C. Leañez Oviol 16

 Modo de Acción de los Diluyentes
1) Yema de huevo: Paul Phillips 1939
a) Acción protectora; tapizado espermático
. Acción a la acidez del aparato genital
. Acción a los efectos nosivos del agua
. Acción a la presión y variación de la temperatura
. Resistencia a los agentes bacteriostáticos
b) Acción conservadora al shock térmico; fosfolípido, lecitina
c) Acción anticuagulante; aglutinación espermática
d) Acción energética; glucosa

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 2) Solución citrato sódico; S. W. Salisbury, 1941
a) Acción quelante; fija el ión Ca y otros iones y dispersa los glóbulos
grasos de la yema: visibilidad
b) Usado en solución isotónica al 2,9 %, aumenta la capacidad de
dilución de la yema
c) Aumenta la resistencia al shock térmico

3) Solución fosfato; Wolf, 1920

Acción tampón, mediante la estabilización del pH alrededor de 7,
evitando el efecto nocivo por acumulo de ácido láctico

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 4) Leche: Hoffman; 1905
a) Leche pura, descremada, descremada + yema
b) Acción bacterisidad
c) Acción energética
d) Capacidad tampón
e) Provee adecuada viscosidad
f) Para su uso se debe inactivar el Lactenin que posee acción
estreptomicida y espermicida

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 5) Quimioterapicos

a) Tienen como finalidad, frenar la flora bacterina que pueda estar

presente en el diluyente y semen

b) Combatir la presencia de vibrio fetus y tricomona fetus

c) Los utilizados: penicilina sódica, polimixina, sulfato de

dehidroestreptomicina, gentamicina, lincomicina,
neomicina,espectinomicina

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 6) Estabilizadores de membrana

Se adicionen con el fin de prevenir o retardar alteraciones no

deseadas en la estructura y la función de las membranas de
las espermas.

Las principales substancias utilizadas son:

Seroalbúmina bovina (BSA), Hidroxitolueno butilado (BTH),

Etilén disódico diamino tetraacetato (EDTA), Polivinil
pirrolidona (PVP-40), y Alcohol polivinílico.
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 6) Diluyente glicerinados: Glicerol; Polge y Rowson, 1951
a) Acción física; favorece la formación de microcristales, evitando la
formación de los macrocristales.
b) Acción biológica; facilita la capacidad de retención de agua dentro de la
esperma, evitando durante la congelación la concentración de solutos en el
medio de las sustancias espermáticas.
1.- Bloquea la concentración electrolítica, evitando que se destruyan la
asociaciones bioquímicas intracelulares.
2.- Se combina con las proteínas evitando su desnaturalización y acción
tóxica sobre la esperma.
3.- Crea un medio enriquecido con C02,
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 Diluyentes Ideales
según Graham y col., 1972
1) pH entre 6 y 8 ( preferiblemete 7 )

2) Maxima solubilidad en el agua

3) Atravesar la membrana biologíca con dificultad

4) Producir un minimo de efecto salino

5) Estable y resistir la degradación enzimática y no enzimática

6) Minima influencia en la concentración, temperatura y composición

ionica del medio sobre la disolución del material

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 7) Conocer las cualidades estimulantes de la fecundidad que
pudieran deducirse del mismo
8) Debe de sustituir las proteínas, por producir reacciones
inmunológicas que motivan fracaso en la I. Artificial.

Ms. Sc. Alexander C. Leañez Oviol 24

 Dilutor Citrato-yema (Caprinos)
descrito por Simón (1981)
 Citrato de Sodio............2.9 grs
 Agua bidestilada...........100 cc
 Penicilina.....................500,000 UI
 Estreptomicina.............2 grs
 De esta solución se tomó el 80% y se le adicionó 20% de yema de
huevo. El pH del dilutor preparado varió de 6.6 a 6.8.

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 Dilutor leche descremada-yema
(caprinos)
 Leche descremada....................25 ml
 Penicilina (solución).............0.250 ml
 Estreptomicina (solución)... 0.125 ml

La leche descremada líquida comercial, se coloca en baño maría a una

temperatura de 92- 95°C durante 10 minutos, se enfría a temperatura
ambiente y se filtrar para eliminar la espuma y las natas.
De esta solución se toma el 80% y se le adiciona 20% de yema de
huevo.

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 Diluyentes de corta conservación ; BTS+, VITAL
para cerdos

Conservación del semen de verracos:

.-Conserva los espermatozoides a 17º
C (+ 1º C)

.-Duración de conservación mejorada

con relación a los diluyentes estándar

.-Polvo elaborado en higrometría

controlada

.-Formula con antioxidantes y un

antibiótico
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 Diluyente para cerdos

La conservación del semen del cerdo es realizada en base a

diluyentes tipo « salinos » (BTS, Vital, X-Cell, Kiev, Reading,
Guelph, IVT, Modena, MR-A, etc.) los cuales no contienen ni
leche ni yema de huevo.
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 Diluyentes para caninos
 Desde 1950 se viene trabajando y buscado los diluyentes
cuya composición contienen:

 Coloide (yema de huevo a menudo y a veces la leche)

 Azucares (glucosa, fructosa o lactosa)
 Iones y sustancias tampones (citrato de sodio en general y
a veces bicarbonato sódico)
 Antibióticos o sustancias antibacterianas (penicilina,
dihidroestreptomicina, sulfamidas)
 Crioprotectores (el glicerol es la sustancia mas empleada
variando entre 4 al 9% del volumen final)
 Otras sustancias como TRIS (Trihidrometilaminometano)

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 Bibliografía
Perez y Perez, Felix. 1985. Dilución de la esperma En: Reproducción
Animal Inseminación Artificial y Transplante de Embriones. Ed.
Cientifico médica. Mexico

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