DISTRIBUCIÓN Y

TRANSPORTE DE
PROTEÍNAS
BHCM 07
2007
Guía para el seguimiento de clases
(El presente material no reemplaza la
bibliografía recomendada) 1
 Compartimientos
Las células eucariontes se caracterizan por poseer:
- núcleo
- compartimientos delimitados por membrana

Algunos compartimientos están interconectados e intervienen

en la distribución y transporte de proteínas, que pueden tener
distintos destinos:
- Proteínas del Retículo Endoplásmico (REL y REG), del
Golgi, los Lisosomas.
- Proteínas de la Membrana
- Proteínas de secreción (uso extra celular)
2
 Distribución de Proteínas

La proteínas
elaboradas en el
retículo
endoplásmico son
transportadas en
vesículas hasta el
Golgi, donde se
procesan pasando a
través de sus
cisternas. Luego,
según su contenido,
serán Lisosomas o
como Vesículas
secretorias o de
transporte.

3
 Transporte de Proteínas
Las proteínas que se se utilizan
en el citosol, las mitocondrias, los
peroxisomas y el núcleo, se CITOSOL
sintetizan en los ribosomas libres.
MITOCONDRIA
RIBOSOMA
PROTEÍNA
LIBRE NUCLEO

PEROXISOMA
Las proteínas de secreción, de los
lisosomas y las proteínas de membrana se
traducen en los ribosomas que se unen a
la membrana del REG y son transportadas SECRECIÓN
en vesículas.
MEMBRANA
RIBOSOMA
DEL REG PROTEÍNA
LISOSOMAS
4
Síntesis de proteínas del REG

Las proteínas que se sintetizan en el REG contienen una secuencia

señal (aminoácidos hidrófobos) que se une a partícula de reconocimiento
PRS en el citoplasma, al comienzo de la síntesis. La PRS inhibe la
traducción y fija el ribosoma a la membrana de REG. Entonces se libera
al citoplasma. La cadena peptídica es traslocada al interior del REG a
través de complejo de traslocación. Se reanuda la traducción. La
secuencia señal es entonces eliminada por la enzima peptidasa señal.El
péptido se libera al interior del REG. 5
 Dirección Traduccional de
Proteínas al R.E.G.

La pepticaza señal provoca la escisión de la secuencia señal por lo

que el polipéptido es liberado a cavidad (luz) del R.E.G.

6
Chaperonas y Plegamiento

Las chaperonas son proteínas

cuya función es facilitar el
plegamiento correcto de otras
proteínas. Hay chaperonas
citosólicas y chaperonas que
actúan en el interior del REG.

7
Traslocación Postraduccional

Algunas proteínas son dirigidas al REG después de

haber sido traducidas en el citosol.
Se sintetizan en ribosomas libres, contienen secuencia
señal y se mantienen en una conformación desplegada
mediante chaperonas citosólicas.
La secuencia señal es reconocida por por el canal de
traslocación dirigiendo la proteína al interior del REG.

8
 Proteínas de Membrana

Las proteínas integrales de

membrana atraviesan la bicapa
mediante regiones en alfa-hélice
con aminoácidos hidrofóbicos.
Pueden tener una única región o
múltiples regiones intrabicapa.
9
Inserción del Proteínas en la
Membrana del REG

La traslocación de la proteína al interior del REG es interrumpida por

una secuencia Stop o de Detención, que determina el cierre del canal
y separación del ribosoma, dejando el extremo terminal de la proteína
del lado citosólico. 10
 Inserción Múltiple

Una Secuencia Señal Interna da lugar a la inserción de la cadena

polipeptídica con su extremo NH2 del lado citosólico.
Una Secuencia Stop determina la formación de un bucle y el cierre
del canal de traslocación.

11
Plegamiento y Glicosilación
en el REG

En el interior del REG, la chaperona BIP se une a las

cadenas polipeptídicas cuando se está sintetizando una
proteína en el REG, y favorece el plegamiento correcto.
En el interior del REG, también tiene lugar la N-glicosilación
(adición de oligosacáridos, formando glucoproteínas) y la
adición de anclajes GPI (glicosi-fosfatidil-inositol), que
permiten el anclaje de ciertas proteínas a la membrana del
REG.

12
R.E.L.

En todas célula eucarionte, los

lípidos son sintetizados en el
interior del REL.
El REL abunda en todas las
células que tienen un
metabolismo lipídico activo y
que realizan detoxificación de
fármacos liposolubles.
13
Traslocación de Fosfolípidos

Los
Losfosfolípidos
fosfolípidosse
sesintetizan
sintetizanenenlalacara
caracitosólica
citosólicade
delala
membrana
membranadel delREL,
REL,se seañaden
añadenaalalacara
caracitosólica
citosólicade
delala
bicapa.
bicapa. Posteriormente
Posteriormentese setranslocan
translocanaatravés
travésdedelala
membrana
membranamediante
medianteflipasas,
flipasas,quequecatalizan
catalizanlala
traslocación
traslocacióndedefosfolípidos
fosfolípidoshacia
hacialalaotra
otracapa
capadedelala
membrana,
membrana,con conloloque
queelelcrecimiento
crecimientoes esuniforme.
uniforme.

14
 Funciones del R.E.
R.E.L.
. Producción de Lípidos
. Formación de la bicapa
(fosfolípidos)
. Detoxificación (principalmente
en hepatocito)
. Acumulación de Ca++
. Transformación de Glu-6-P en
Glu (solo en hepatocito)
R.E.G.
. Elaboración de proteínas de
secreción
. Elaboración de proteínas de la
membrana plasmática
. Elaboración de proteínas de la
membrana del R.E.
. Plegamiento de proteínas
. Glicosilación de péptidos
. Degradación de algunas
proteínas.
15
 Microsomas

ElR.E.
El R.E.se
sepuede
puederomper
romperyyseparar,
separar,por
porcentrifugación,
centrifugación,
originandoMICROSOMAS.
originando MICROSOMAS.
Estosno
Estos noson
sonorganelas
organelasnaturales
naturalessino
sinoelelresultado
resultadode
de
aplicaciónde
aplicación deuna
unatécnica
técnicapara
parapoder
poderestudiarlos.
estudiarlos.
LosMicrosomas
Los Microsomaspueden
puedenserserLisos
LisosooRugosos,
Rugosos,según
segúnde
de
quéparte
qué partedel
delR.E.
R.E.se
seoriginaron.
originaron.

16
 Exportación de Proteínas y
Lípidos desde el R.E.

Las proteínas y los lípidos del RE se

transportan en vesículas originadas por
gemación de la membrana del RE hasta el
Golgi, donde se fusionan con las membranas
de sus cisternas. 17
Recuperación de Proteínas
para el R.E.
Las proteínas elaboradas en el REG pasan masivamente
al Golgi. Sin embargo, algunas deben volver al R.E. para
cumplir allí sus funciones.
Éstas son las que se encuentran marcadas mediante una
secuencia de aminoácidos (KDEL) en su extremo COOH
terminal.
Esa secuencia es reconocida en cisternas del Golgi, por
lo que las proteínas son enviadas de nuevo al R.E.

18
COMPLEJO DE GOLGI

Micrografía del Sistema de

Golgi, coloreada.
Esquema de las cisternas
del Golgi.
19
 Regiones del Golgi

Las vesículas
procedentes del
R.E. Se fusionan
para formar el
compartimiento
intermedio RE-
Golgi.
La región de
entrada es la Cis y
la de salida es la
Trans.

20
 Funciones del Golgi

Participa en el procesamiento y distribución de proteínas. La

síntesis de lípidos y polisacáridos.
Las proteínas se transportan en vesículas desde el R.E hasta
la Red Cis. De ahí pasan al Apilamiento (región más activa),
donde son modificadas químicamente y transportadas a la
Red Trans. Desde allí se empaquetan en vesículas que
pueden ser lisosomas o vesículas de transporte hacia la
membrana plasmática o al exterior celular.

21
 Glicosilación de Proteínas

Los oligosacáridos añadidos a las proteínas en el

R.E, son modificados en el Golgi.
Las proteínas que formarán parte del contenido de
los lisosomas son fosforiladas específicamente en los
residuos de manosa, formando manosa 6-fosfato,
que actúa como señal para dirigir su transporte a los
lisosomas desde la red trans del Golgi.

22
 Metabolismo de Lípidos y
Polisacáridos

En las cisternas del Golgi se sintetizan:

- Glucolípidos
- Esfingomielina (único fosfolípido no glicérido de
las membranas)
- Polisacáridos complejos de la pared celular
vegetal.

23
Distribución y Exportación
de Proteínas

La distribución de proteínas tiene lugar en la Red Trans.

Son empaquetadas en vesículas de transporte que se
dirigen a la membrana plasmática, o constituyen
lisosomas.
En las células epiteliales , las proteínas se dirigen
específicamente a los dominios (regiones) apical o
basolateral de la membrana plasmática.
En células vegetales y en levaduras, las vesículas de
transporte pueden dirigirse también a las vacuolas.

24
 Rutas de las
Proteínas
en la Célula
Las proteínas sintetizadas
en los Ribosomas Libres
serán de utilización
intracelular.
Las proteínas sintetizadas
en los ribosomas del
R.E.G., pasarán por el
Golgi y luego formarán
parte de los Lisosomas, la
Membrana o de la
Secreción Celular.

25
TRANSPORTE DE VESÍCULAS
Proteínas de Revestimiento
La
Lasuperficie
superficiecitoplasmática
citoplasmáticade
delas
lasvesículas
vesículas está
está
recubierta
recubiertade
deproteínas
proteínasque
quedirigen
dirigenlalagemación
gemación
de
delas
lasvesículas
vesículasyyquequeseleccionan
seleccionanlas
las moléculas
moléculas
especificas
especificas que
queserán
serántransportadas.
transportadas.
Estas
Estasproteínas
proteínasdeterminan:
determinan:
--vesículas
vesículasrecubiertas
recubiertascon
con clatrina
clatrina
--vesículas
vesículasrevestidas
revestidas COP
COPII
--vesículas
vesículasrevestidas
revestidas COP
COPIIII

26
 Tipos de Cubierta

PROTEÍNA DE
CUBIERTA TRANSPORTE

- Endocitosis
CLATRINA - Golgi (Red Trans) a Lisosomas
- Desde Compartimiento
COP I Intermedio hacia R.E. o de cis a
trans del Golgi

- Desde el R.E al Golgi

COP II
27
 Clatrina

TRISQUELION

Micrografía de una vesícula

recubierta con clatrina y esquema
de la constitución de la clatrina.
28
COP

Micrografía de vesícula
cubierta con COP I

29
Reciclado de Clatrina

30
 Fusión de Vesículas

La
Launión
uniónde
delas
lasvesículas
vesículas con
conlalamembrana
membranadel
del
compartimiento
compartimientotarget
target adecuado,
adecuado, está
estámediada
mediada por
por
interacciones
interaccionesentre
entreproteínas
proteínas trans
trans membrana,
membrana,para
para
el
elreconocimiento
reconocimientodedelas
lasvesículas.
vesículas.
Las
Lasproteínas
proteínasimplicadas
implicadasenenelelreconocimiento
reconocimientodede
vesículas
vesículasson
sonlas
las SNAREs
SNAREs(v-SNARE
(v-SNAREyy t-SNARE),
t-SNARE),
además
ademásdedeproteínas
proteínas de
dela
lafamilia
familiade
delas
las Rab.
Rab.

31
Señales de Transporte

32
 LISOSOMAS
Son
Son organelas
organelas rodeadas
rodeadas por
por membrana,
membrana, de de diferentes
diferentes
formas
formas yy tamaños.
tamaños. Contienen
Contienen enzimas
enzimas hidrolíticas
hidrolíticas
(hidrolasas
(hidrolasas ácidas)
ácidas) que
que degradan
degradan proteínas,
proteínas, ácidos
ácidos
nucleicos,
nucleicos,polisacáridos
polisacáridosyylípidos,
lípidos,actuando
actuandoaapHpH5. 5.
Existen
Existen enfermedades
enfermedades por por depósito
depósito lisosómico,
lisosómico,
causadas
causadas por
por lala no
no degradación
degradación del
del material
material que
que se
se
acumula
acumulaenenlalacélula
célulasisilos
loslisosomas
lisosomasno
nofuncionan.
funcionan.
El
El pH
pH interno
interno de
de los
los lisosomas
lisosomas resulta
resulta dede lala acción
acción de
de
una
una proteína
proteína de de membrana
membrana que que actúa
actúa como
como “bomba“bomba
de
de H+”
H+” que que actúa
actúa gastando
gastando energía
energía (ATP) (ATP) alal
incorporar
incorporarH+ H+desde
desdeelelcitosol
citosolalalinterior
interiordel
dellisosoma.
lisosoma.

33
Endocitosis
Las moléculas son
captadas desde el
exterior celular por
endocitosis, formando
vesículas endocíticas
que pasan a
endosomas tempranos,
reciclándose los
receptores de
membrana. Luego, los
endosomas (tardíos)
se fusionan con
vesículas que tienen
hidrolasas madurando a
lisosomas. Se reciclan
los receptores de
manosa-6-P al Golgi.
34
 Fagocitosis y Autofagia

En
Enlos
loslisosomas
lisosomasse sedegradan
degradanpartículas
partículasgrandes,
grandes,como
como
bacterias,
bacterias,virus,
virus,proteínas,
proteínas,etc.,
etc.,que
queingresan
ingresanmediante
mediante
fagocitosis.
fagocitosis.
También
Tambiéndegradan
degradancomponentes
componentescelulares
celularesmediante
medianteelel
proceso
procesodedeautofagia.
autofagia. Las
Lasorganelas
organelasinternas
internasaarecambiar,
recambiar,
son
sonenvueltas
envueltaspor
pormembrana
membranadel delRE
REformando
formandolos
los
autofagosomas,
autofagosomas,quequesesefusionan
fusionanaalisosomas
lisosomas formando
formando
fagolisolomas
fagolisolomasgrandes
grandesenenlos
losque
quese sedigieren
digierensus
sus
contenidos.
contenidos.

35