Digestion de

macromoléculas
INTRODUCCION
• La diversidad metabolica que hay entre los µo. Permite la realización
de los ciclos biogeoquímicos
• Sin la actividad de los µo la composición de los gases en la Tierra seria
muy diferente a como lo es ahora, ya que la composición y cantidad
de los gases (O2 N2 H2 CO2 CH4)en la atmosfera se explican debido a
los µo procarioticos
 • Para el crecimiento adecuado de una celula esta debe satisfacer sus
requerimientos nutricionales y las fuentes de donde las obtienen
permiten hacer una clasificación fisiológica µo
Energia Carbono Donador in.
de protones

Fisica Quimica CO2 Organico Inorganico Organico

Autotrofia Heterotrofia Litotrofia Organotrofia

Fototrofia Quimiotrofia

Organico Fermentacion

Aceptor fin. de Inorganico Resp.anaerobia

protones
O2 Resp.aerobia

CO2 Autotrofia fotosíntesis

metanogenesis
• Celula axótrofa: Una celula incapaz de convertir precursores
biosintéticos en biopolímeros, las sustancias que sustituyen estas
deficiencias y favorecen su crecimiento son FACTORES DE
CRECIMIENTO
• Celula prototrofa: Es una celula que no requiere de factores de
crecimiento
• En ocaciones los substratos monoméricos no se encuentran
directamente utilizables en el habitad y los µo. Tienen que liberarlos
de estructuras como celulosa, quitina, almidon, ac. Nucleicos o
proteinas y los tienen que degradar con enzimas despolimerizantes
Los µo quimiorganotroficos satisfacen su necesidades por medio de..
 Glucosa
Monosacáridos Fructosa
Galactosa
Simples
Sacarosa
Disacáridos Maltosa
Se clasifican Lactosa
en…

Almidón
Complejos Celulosa
Objetivo
• Entender y montar ensayos de degradación de polímeros por enzimas
extracelulares microbianas
• Identificar sus requerimientos nutricionales y su clasificación
Hidrolisis de la gelatina.
“Hidrolisis de licuefacción de la gelatina en tubo”

• Fundamento
Se incorpórea la gelatina a diversos medios para determinar la
capacidad de un organismo de producir enzimas de tipo proteolitico.
Sembrar µo. Incubar
Por picadura en el 37°C/24-48hrs La prueba es…
medio gelatina
1 hrs

Positiva si después del Negativa si después

enfriamiento el del enfriamiento el
contenido es liquido contenido es solido
• Resultados

Prueba positiva Prueba negativa

Microorganismo Hidrolisis

E.Coli -

B. Subtilis +

P.Aeruginosa +

P.Bulgaris -

S.Typhi -

K.Pneumoniae -

S.Aureus -

S.Flexneri -
“Prueba de la digestión de la gelatina y
caseína en caja”
• Fundamento
La caseína (proteína de la leche) le da la coloración blanca a la leche
de modo que la caseína al ser hidrolizada desaparece el color blanco
alrededor del crecimiento microbiano
Marcar cajas P.
Etiquetar cada sector
c/ gelosa gelatina y agar
con el nombre de los µo
leche descremada

Añadir HgCl2
28°C / 48Hr
Halos transparentes de
hidrolisis
Microorganismo Hidrolisis
Prueba negativa Prueba positiva
E.Coli -

B. Subtilis +

P.Aeruginosa +

P.Bulgaris -

S.Typhi -

K.Pneumoniae -

S.Aureus -

S.Flexneri -
Hidrolisis de almidon
• Fundamento
La amilosa(molecula del almidon) debe descomponerse en sustancias
mas simples de fácil asimilación
Tecnica utilizada cara identificación de µo. Productores de amilasas

Amilasa

Maltosa
 El yodo se une a
enlaces α-,4 del
almidon generando
color azul-negro

37°C / 48Hr

+ -
La prueba es (+) si hay
halos y (-) en ausencia
de estos
Microorganismo Hidrolisis

E.Coli -

B. Subtilis +

P.Aeruginosa -

P.Bulgaris +

S.Typhi +

K.Pneumoniae -

S.Aureus -

S.Flexneri -
Hidrolisis de fosfolipidos
• Gelosa sangre y agar Braid-Parker
Composicion Composicion
• Infusion de • Triptona
corazón • Extracto de
• Sangre carne
• Triptona • Extracto de
• Cloruro de levadura
sodio • Yema de
• Agar huevo
• Agua emulsionada
• ph:6.8 • Telurio de
potasio
Agar yema de huevo
• La glicina, el cloruro de litio y telurio potásico actúan como agentes
selectivo. La yema de huevo es el sustrato para determinar la
producción de lecitinas y la actividad de la lipasa
Metodologia

Una zona opalecente en

torno a la colonia
indica hidrolisis de
fosfolipidos

37°C / 48Hr
Microorganismo Opalescencia

E.Coli -

B. Subtilis -

P.Aeruginosa -

P.Bulgaris -

S.Typhi -

K.Pneumoniae -

S.Aureus +

S.Flexneri -
Agar sangre
• Fundamento.
Es un medio enriquecido y diferencial que se usa para el aislamiento y
cultivo de muchos µo.
El medio es útil para aislamiento, cultivo de aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes además de la observación de hemolisis
Algunas bacterias producen hemolisinas S y O las cuales hidrolizan la
membrana celular de los eritrocitos
Tipos de hemolisis
• Hemolisis α: Se refiere a una LISIS PARCIAL de eritrocitos
COLORACION VERDE (debido a biliverdina)
• Hemolisis β: Zona de hemolisis incolora clara y bien definida que
rodea a ciertas colanias causada por HEMOLISINAS que lisan al
eritrocito
• Hemolisis γ: No se produce hemolisis en agar solo se observa el
crecimiento bacteriano
Microorganismo Hemolisis

E.Coli α

B. Subtilis β

P.Aeruginosa β

P.Bulgaris α

S.Typhi γ

K.Pneumoniae γ

S.Aureus β

S.Flexneri γ