PRUEBA DE

PAPANICOLAU
PRUEBA DE PAPANICOLAU
• Es un examen para detectar cáncer de cuello uterino. Las células tomadas por raspado de la abertura
del cuello uterino se examinan bajo un microscopio. El cuello uterino es la parte más baja del útero
(matriz) que desemboca en la parte superior de la vagina.
 OBJETIVO
• El objetivo de esta prueba consiste en encontrar los cambios de las células del cuello uterino que son
precursoras del cáncer, antes de que empiecen a causar síntomas y permitiendo que los tratamientos sean
eficaces. El cáncer cervicouterino es una enfermedad 90 % prevenible, si la prueba de Papanicolau se
realiza regularmente.
• Esta prueba deben realizársela todas las mujeres que hayan iniciado su vida sexual una vez al año durante
dos o tres años consecutivos, y si los resultados son negativos se repetirá cada tres a cinco años en caso
de no haber factores de riesgo y hasta los 65 años.
• Si existen factores de riesgo para cáncer de cuello de útero (inicio a temprana edad de relaciones sexuales,
infección por virus del papiloma humano, enfermedades de transmisión sexual, tabaquismo, multiparidad,
inmunodepresión o toma de anticonceptivos orales) el seguimiento tendrá que ser anual.
• La técnica de Papanicolau puede aplicarse también a la citología de otros órganos, desde material
expectorado de las vías respiratorias hasta un cepillado endoscópico gástrico, así como un hisopado nasal
o rectal.
HISTORIA

• George Nicholas Papanicolau (1883-1962)

• Papanicolau nació el 13 de mayo de 1883 en Kymi, ciudad costera de la isla griega Euboea. Su padre,
Nicolas Papanicolau, era médico.
• Pensó que podía recurrir al estudio de la descarga vaginal periódica y establecer una relación entre los
patrones citológicos y los cambios en el ovario y útero. Junto con Stockard publicó sus hallazgos en el
American Journal of Anatomy, en 1917, con el título "The existence of a typical oestros cycle in the
guinea pigs – with a study of its histological an physiological changes".
• La American Cancer Society de Estados Unidos se interesó por la técnica de Papanicolau. Cuando
empezó a aplicarse con regularidad, las cifras de mortalidad por cáncer de cuello de útero disminuyeron
drásticamente.
TINCION DE PAPANICOLAOU
• Principio
La tinción de Papanicolaou se aplica a exudados vaginales para la detección de cáncer uterino o vaginal.
La técnica utiliza un elevado número de colorantes en su procedimiento.
• Hematoxilina: es la tinción nuclear escogida, permite básicamente revelar los núcleos de las células presentes
en la muestra. Suele usarse Hematoxilina de Harris.
• Orange G: es un colorante sintético de carácter ácido que revela compuestos básicos como la prequeratina (que
tiñe de color rosado) o la queratina (que tiñe de color naranja brillante).
• Eosina amarillenta: tiñe de color rosa-anaranjado el citoplasma de las células escamosas maduras, de las células
ciliadas y de los eritrocitos.
• Verde Luz SF amarillento: tiñe de color verde-azulado las células escamosas no superficiales (inmaduras o a
parcialmente maduras).
• Pardo Bismark R: no tiñe el citoplasma celular pero si la mucina.
• Ácido fosfotúngstico: tiene una función mordiente, especialmente importante para el
• Verde Luz SF.
• Al presentar su composición varios colorantes, es capaz de revelar diferentes tipos de células. Estas
características son las que la hacen óptima para estudios de tipo citológico. La técnica implica el uso de
tres soluciones diferentes, por un lado la correspondiente a la hematoxilina, por otro la que contiene
Orange G (solución de Papanicolaou OG) y la última con el resto de colorantes (solución de
Papanicolaou EA).
PROCEDIMIENTO

• 1. Fijar la muestra con spray.

• 2. Sumergir sucesivamente en alcohol 80%, alcohol 70%, alcohol 50% y agua, 1 minuto en cada líquido.
• 3. Teñir con Hematoxilina de Harris solución durante 5 minutos aproximadamente.
• 4. Sumergir en agua 6 veces durante 1 segundo.
• 5. Sumergir en Ácido Clorhídrico 0,5%, 8 veces durante 1 segundo.
• 6. Lavar con agua corriente durante 5 minutos, y pasar la muestra por alcoholes de grado sucesivo, 50%,
70%, 80% y 96% durante 30 segundos en cada uno de ellos.
• 7. Teñir con Solución de Papanicolaou OG 6 de 1 a 1,5 minutos.
• 8. Lavar el exceso de colorante en dos baños de Etanol 96% sumergiendo la preparación 2 veces en
cada uno de 3 a 4 segundos.
• 9. Teñir con Solución de Papanicolaou EA 50 de 1,5 a 2 minutos.
• 10. Lavar en 3 recipientes distintos de Etanol 96% v/v sumergiendo la preparación 2 veces de 3 a 4
segundos en cada uno de ellos.
• 11. Lavar en Etanol absoluto durante 30 segundos.
• 12. Sumergir la preparación durante 4 minutos en un baño 1:1 de Xileno, mezcla de isómeros y Etanol
absoluto.
• 13. Aclarar con Xileno, mezcla de isómeros sumergiendo la preparación durante 3 minutos en un baño.
• 14. Montar con medio de montaje. 15. Observar al microscopio.
RECOMENDACIONES PARA LA OBTENCIÓN ADECUADA DE LA
MUESTRA
Realizar la toma 2 semanas después del primer día del último ciclo menstrual (entre los días 10- 18).

Realizar la toma antes de cualquier otra exploración cervical o vaginal.

Evitar realizar el examen durante la menstruación o antes de 3 días de finalizado el último periodo menstrual.

Si hay sangrado, anormal o por menstruación, debe diferirse la toma de la citología, ya que la sangre dificulta el diagnóstico.

Evitar 48 horas previas a la toma: ducha vaginal, uso de tampones, espumas anticonceptivas, gelatinas u otras cremas o
medicamentos vaginales, no tener relaciones sexuales durante las 48 horas previas a la toma.

Evitar el uso de lubricante para no contaminar la muestra.

Si existe flujo vaginal que cubra el cérvix, removerlo cuidadosamente con una torunda húmeda de solución fisiológica. Si la cervicitis o
vaginitis son intensas, debe darse tratamiento y diferir la toma.
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

• Existen dos métodos para preparar una muestra para citología cervical:
• La citología convencional.
• La preparación con una fina capa de base líquida.

Para ambos métodos, las células se obtienen a partir de la superficie

externa del cuello del útero (exocérvix) y el canal cervical (endocérvix)
para evaluar la zona de transformación (unión escamosa), el área en
mayor riesgo de neoplasia.
MATERIALES

• Hoja de solicitud de estudio y consentimiento informado.

• Portaobjetos membretado con los datos de la paciente.
• Espátula de madera Ayre, cepillo cervical y/o cytobrush.
• Espejo vaginal
• Guantes (no necesariamente estériles)
• Cubreboca
• Gafas de protección
• Fijador: alcohol etílico 96% o citospray
• Solución salina
• Mesa de exploración ginecologica
 PROCEDIMIENTO
Presentar se ante la paciente.

Explicar a la paciente el procedimiento al cual será sometida; sus

beneficios y complicaciones

Pedir su consentimiento informado por escrito preferentemente.

Preparar el material

Solicitar a la paciente:

Vaciamiento de vejiga

Se descubra de la cintura hacia abajo

Se coloque una bata con la abertura hacia atrás

Se coloque sobre la mesa de exploración en posición de litotomía

Seleccionar el espejo vaginal Visualizar el introito vaginal,
adecuado si es necesario con la mano
Antes de introducir el espejo
• Es posible humedecerlo con solución contraria a la que toma el
vaginal, avisar a la paciente
salina (NO lubricantes). espejo, separar los labios
sentirá una molestia y frío
menores con el primero y
segundo dedo.
Colocar el espejo con las valvas cerradas en disposición paralela
al eje longitudinal del cuerpo de la paciente (45º en relación con
el piso de la vagina) e introducirlo en el introito vaginal.
Terminar de introducir el Girar el espejo hasta que
espejo con dirección las valvas queden en
posterior, aún con las disposición perpendicular
valvas cerradas y de al eje longitudinal del
manera paralela. cuerpo de la paciente.
 • Fijar las valvas para que el
• Abrir las valvas de manera gentil y busqué la
visualización de cérvix, debe quedar centrado espejo continúe abierto.
entre ambas.
TOMAR LA MUESTRA:
ESPÁTULA DE AYRE:
Primero debe tomarse la muestra del exocérvix,
para evitar que la toma de endocérvix contamine
por sangrado y evitar el factor de desecación de
la superficie del cérvix.

Para obtener la muestra del exocérvix introducir

la espátula de Ayre modificada por el extremo
bifurcado, colocarla en el orificio y girar 360º a la
derecha haciendo una ligera presión.

Se reintroduce la espátula por el extremo

terminado en punta al canal endocervical,
deslizando y girando a la izquierda 360º con una
ligera presión.
CEPILLO ENDOCERVICAL

Sólo debe usarse cuando la zona de

transformación no es visible, como las
No debe usarse en mujeres
pacientes posmenopáusicas o en
embarazadas.
mujeres previamente tratadas por
conización u otro tipo de tratamiento.
• Para obtener la muestra se introduce el cepillo en el canal endocervical y se da un giro de 90º. Una sobre rotación,
puede causar distorsión en las células, además de sangrado, lo que dificulta la interpretación del extendido. Se
aconseja, y está probado, el uso de dos dispositivos uno para ectocérvix (espátula) y otro para endocérvix (cepillo
endocervical) y realizar las dos tomas en forma separada.
BROCHA CERVICAL
Está constituida de cerdas flexibles con
forma de techo de dos aguas con las
cerdas más largas en el centro, que son
las que entran al orificio cervical, y las
más cortas en la periferia, que se
quedan en el exterior.
Se introduce por el
orificio con las cerdas más
largas y girándolo 360º
entre tres y cuatro veces,
el giro se suspende si hay
sangrado.
La muestra se coloca
linealmente quedando el
endocérvix en el centro y
exocérvix lateral.
La muestra se extiende
sobre el portaobjetos de
manera longitudinal y
firme.
De inmediato se fijará la
• Espátula de Ayre: el
portaobjetos se divide en dos muestra con spray fijador
longitudinalmente, se extiende a una distancia de 20cm
en un lado ectocérvix y en el por 5 segundos.
otro endocérvix.
• Cepillo cervical y Cytobrush: se
extienden de modo lineal del
lado del rotulo, rodando sobre
la superficie.
 INFORME DE
RESULTADOS

En términos generales el
resultado de una citología
cervical debe brindar
información sobre tres
componentes básicos:

c) Interpretación y
b) Categorización de los
a) Calidad de la muestra diagnostico descriptivo
resultados
de los hallazgos.
CALIDAD DE LA MUESTRA

Es uno de los indicadores más importantes

en la evaluación de la citología y permite
brindar información al médico remitente
sobre el material que ha obtenido en la toma
de la muestra, esto fomenta una mayor
atención al momento de tomar muestra.

Satisfactoria: cuando en la solicitud se

Insatisfactoria cuando la muestra no tiene
consigna todos los datos requeridos, el
solicitud, la lámina no está rotulada, la La categoría “Satisfactoria, pero limitada” se
extendido contiene un numero adecuado de
lámina está rota, la celularidad es muy eliminó porque genera confusión entre los
células escamosas bien conservadas, y existe
escasa o existe factores (hemorragia, mala médicos tratantes y por la variabilidad de lo
representación de la zona de
preservación, abundante presencia de que en los laboratorios se considera
transformación, que se estima con la
células inflamatorias) que impiden valorar el “limitada”
presencia de células de metaplasia escamosa
extendido.
o de células endocervicales.

Cuando la muestra es insatisfactoria se debe

consignar si el laboratorio procesó y evaluó
la muestra y por que causa se considera
insatisfactoria.
CATEGORÍAS DE LOS RESULTADOS
Siguiendo las recomendaciones del Manual de Normas y Procedimientos para la Prevención y Control del Cáncer Cervico-
uterino de la Secretaría de Salud, los hallazgos del frotis se reportan de acuerdo a las siguientes categorías generales:
Negativo por malignidad: el
frotis no presenta
No útil o frotis inadecuado:
alteraciones morfológicas
cuando la muestra es
de neoplasia maligna o de
insatisfactoria.
lesión premaligna
(displasia).
Sospechosa por
malignidad. Existen
alteraciones morfologicas
pero no son concluyentes
Positivo por malignidad: el
frotis presenta alteraciones
morfológicas en células
epiteliales escamosas o
glandulares, incluye:
•Neoplasia Intraepitelial Cervical
Grado I (NIC I) (Displasia Leve)
•Neoplasia Intraepitelial Cervical
Grado II (NIC II) (Displasia
Moderada)
•Neoplasia Intraepitelial Cervical
Grado III (NIC III) (Displasia
Severa)/carcinoma in Situ
•Carcinoma de Células Escamosas
•Adenocarcinoma
SISTEMA BETHESDA

1.-Negativo para Lesión

Intraepitelial o Malignidad: cuando
no existe ninguna anomalía de las
células epiteliales.
El Sistema de Bethesda define una
clasificación general (opcional) y la
interpretación de resultados. La
clasificación general incluye:
2.- Anomalía en Células Epiteliales:
cuando se identifica alteraciones
celulares de lesiones premalignas o
malignas en las células escamosas o
en las células glandulares.
•Lesión Intraepitelial Escamosa de
Bajo grado(LIEBG) que incluye
infección por HPV y NIC I(displasia
En esta se incluyen únicamente dos leve)
categorías para las lesiones
intraepiteliales escamosas,
basándose en que los criterios
clínicos de decisión terapéutica.
•Lesión Intraepitelial Escamosa de
Las dos categorías son:
Alto Grado(LIEAG) que incluye NIC
II y NIC III (displasia moderada,
displasia severa y carcinoma in situ)
BIBLIOGRAFIA

• 1. Alba D, Morales S. Citología Cervical. Dep Integr CIENCIAS MÉDICAS Cent ENSEÑANZA Y
CERTIFICACIÓN APTITUDES MÉDICAS. 2015;
• 2. Martinez SV. Citologia Cervical. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA Rev Med Hondur. 2005;73(3):131–6.
• 3. Pelea CL, González JF. Citología Ginecológica: de Papanicolaou a Bethesda. 2003;206.