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HONGOS ENTOMOPATOGENOS

¿Que son los Hongos


Entomopatógenos ?

 heterotróficos, eucariontes, unicelulares


o hifales (filamentosos), que presenta
reproduccion por esporas sexuales,
asexuales o ambas.

 Para la FAO (2003), los géneros de


importancia son Metarhizium,
Beauveria, Paecilomyces, Verticillium,
Rhizopus y Fusarium.
¿QUÉ ES EL CONTROL BIOLÓGICO?

para Tellez-Jurado et al. (2009) se define como una práctica agrícola en constante
crecimiento que busca la destrucción total o parcial de patógenos e insectos plaga
frecuentemente mediante el uso de sus enemigos naturales, los hongos
entomopatógenos son los primeros agentes biológicos en ser utilizados para el
control de plagas, porque son capaces de producir enfermedad y muerte de los
insectos.
Tipos de hongos entomopatógenos

para los hongos entomopatógenos, de acuerdo al estado del insecto que infecta: vivos
o muertos.

Los hongos entomopatógenos para los insectos vivos son llamados entomófagos, y estos
son aniquilados por efecto de la micosis interna.

Los hongos entomopatógenos para los insectos muertos se conocen como saprófagos, y
tienen la particularidad de volver inocuos los restos de estos insectos, los cuales en este
estado causan daños por las sustancias desprendidas, durante los procesos de
descomposición.
Condiciones para el desarrollo de los hongos
entomopatógenos

 Humedad
sin un buen nivel de humedad, es muy difícil la proliferación de los hongos, sin embargo
debe ser la justa, de modo tal que no se puedan ver afectados los cultivos.

 Nivel de pH
los niveles de pH son de suma importancia, ya que en ambientes con un pH muy bajo,
los hongos no proliferan, debe tener el nivel justo, en función del tipo de hongo a ser
introducido.

 Temperatura
las bajas temperaturas son ideales, en la proliferación de hongos, este factor es de
suma importancia, ya que con niveles altos de temperatura, la proliferación de hongos
no puede darse.
Ciclo de desarrollo de un hongo
entomopatógeno
HONGOS ENTOMOPATÓGENOS MÁS UTILIZADOS PARA EL
CONTROL
DE INSECTOS-PLAGA

Este hongo ataca a más de 200 especies


de insectos de diferentes órdenes,
incluyendo plagas de gran importancia
Agrícola (Monzón, 2001).
La colonia de Beauveria en PDA a los 14
días es algodonosa a polvorienta, blanca y
a medida que va pasando el tiempo se
vuelve amarillenta y cremosa.
Metarhizium anisopliae

Este hongo entomopatógeno ataca


naturalmente más de 300 especies de
insectos de diversos órdenes. Los
insectos muertos por este hongo son
cubiertos completamente por micelio,
el cual inicialmente es de color blanco Figura 2.
Langosta infectada por Metarhizium anisopliae.
pero se torna verde cuando el hongo
esporula (Monzón, 2001).
 salivita de la caña de azúcar
 Larva chiza
 chinches plagas de diversos cultivos.
VERTICILLIUM LECANII.

Este hongo se encuentra frecuentemente Acaro con Verticillium lecanii.


atacando áfidos y escamas en zonas
tropicales y subtropicales.

 Mosca blanca
 Pulgones
 Ácaros, trips, etc.

 Hortalizas, Frutales, Viandas, Frijol y Granos.


Plagas Combatidas

Insectos Mico insecticidas

Malas Hierbas Mico herbicidas

Hongos Nematodos Mico nematicidas

Hongos Mico fungicidas

Bacterias Mico bactericidas


Hongos Antagonistas

Los hongos son organismos heterótrofos que posen células quitinizadas normalmente no
móviles.
Se caracteriza por su escasa toxicidad sobre otros organismos del ambiente, por su
actitud para ser tratados industrialmente, se cultivan, formulan, empaquetan, almacenan
y se comercializa como un insecticida convencional.
Hongos Antagonistas

Los hongos antagonistas resultan importantes para el control biológico de


los fitopatógenos.

Género Trichoderma Modos o Mecanismos de


Acción

• Competencia por el sustrato


• Mico parasitismo
• Antibiosis
• Desactivación de enzimas del patógeno
• Resistencia inducida
Ventajas de Hongos frente a otros
controladores

• La mayoría tiene la capacidad de infectar directamente al huésped


por penetración de su capa externa.

• La biodiversidad genética de los hongos permite conseguir distintos


agentes de biocontrol desde una especie fúngica.

• Frente a bacterias tiene mayor potencial como antagonistas por su


crecimiento hifal permitiendo una rápida dispersión en el suelo y en la
rizosfera.
Hongos biocontroladores importantes

Trichoderma sp. Gliociadium virens.

Control Biológico Anti fúngico


· Rhizoctonia spp · Phytophthora spp
· Fusarium spp · Rosellinia spp
· Pythium spp · Armillaria sp
· Botrytis spp · Sigatoka spp
· Alternaria spp · Sclerotium spp
Características del Trichoderma sp. y
Gliocladium Virens

Mecanismos de Acción

Antibiosis Micoparasitismo Competencia


Ventajas del Trichoderma sp. y
Gliocladium Virens
• Protege las raíces de enfermedades causadas por hongos patógenos, permitiendo
que el sistema radicular sea más fuerte y sano.

• Aumenta la capacidad de capturar nutrientes y de retener humedad, haciendo a las


plantas más fuerte a condiciones de estrés hídrico.

• Contiene enzimas que ayudan a la planta a generar RESISTENCIA SISTÉMICA, la cual


inmuniza y protege a la planta de ataques de hongos fitopatógenos.

• No requiere equipamiento especial para su aplicación.

• Disminuyen y en algunos casos eliminan la necesidad de tratar con fungicidas


químicos, reduciendo los costos y disminuyendo el uso de fertilizantes.
Resumen

El control de la enfermedad (Botrytis cinerea) se ha basado en el uso de fungicidas;


sin embargo, bajo ciertas condiciones de presión de enfermedad esta medida no ha
sido eficaz, sumado a problemas ambientales. El objetivo de este estudio fue
seleccionar hongos antagonistas a B. cinerea, mediante ensayos in vitro y de
invernadero, y determinar su capacidad como agentes biocontroladores de este
hongo en viveros forestales. Fueron ensayadas 71 cepas de hongos, evaluadas en su
capacidad para reducir la colonización y esporulación del patógeno en ensayos in
vitro, mediante bioensayos en discos de hojas de Eucalyptusglobulus.
Método

Aislamiento de B. cinerea y producción de inóculo

La cepa de B. cinerea utilizada en los ensayos fue aislada a partir de plantas de P. radiata, con
síntomas de moho gris.
Acículas y tallos de las plantas fueron seccionados en trozos y dispuestos dentro de placas Petri,
con papel absorbente humedecido en agua destilada estéril, conformando una cámara húmeda
para estimular la esporulación del patógeno.
Una vez producida la esporulación, se colectaron las conidias mediante estilete estéril, las que
fueron sembradas en placas Petri conteniendo agar papa dextrosa (APD), con100 µg/mL de
sulfato de estreptomicina (SE) y repicadas hasta obtener cultivos puros. Luego, estos fueron
almacenados en tubos de ensayo con APD inclinado y mantenidos a 4ºC hasta su uso.
Para la producción de inóculo, se procedió a repicar desde la cepa almacenada a tubos con
medio de cultivo APD e incubados a 22 ± 1°C, con fotoperiodo de 12 h, durante diez días. Las
esporas producidas en los cultivos se colectaron con ADE, para luego determinar la concentración
de conidias en la suspensión mediante hematocitómetro, previo a la aplicación.
Botrytis Cinerea Hematocitómetro Conidias
Método

Aislamiento y producción de inóculo de antagonistas.

Se recolectaron muestras de plantas de E. globulus y P. radiata. Las plantas seleccionadas no presentaban


síntomas o signos de enfermedades.
Se procedió a realizar los aislamientos de los follajes para obtener las cepas de hongos potenciales
antagonistas a B. cinérea. En este método, se utilizaron 30 g de hojas de E. globulus y de acículas de P. radiata,
que fueron seccionadas y colocadas, por separado, en matraces de Erlenmeyer con 250 ml de ADE y 50 µL/L
de Tween 20 y mantenida en suspensión, en agitación continua durante 30 min. Desde la suspensión en
agitación se tomaron alícuotas de 1 mL, procediéndose a realizar diluciones hasta 10-2. De la última, se
depositaron alícuotas de 0,5 ml, en placas Petri que contenían APD con 100 mg/L de SE, e incubadas durante
cinco días a 22 ± 1°C, en oscuridad. Las colonias de hongos obtenidas se repicaron a tubos con APD inclinado,
los que fueron almacenados a 4 ± 1°C hasta su utilización en los ensayos de selección.
Para la producción de inóculo, las cepas almacenadas fueron repicadas a placas Petri conteniendo APD e
incubadas a 25 ± 1°C durante cinco días. Las esporas producidas en los cultivos se colectaron con ADE,
determinándose la concentración de conidias en la suspensión mediante un hematocitómetro.
E. Globulus P. Radiata
Método

Selección de antagonistas

La selección de antagonistas fue realizada, en una primera etapa, utilizando ensayos in vitro en Discos de hojas
de E. globulus tratados previamente con hipoclorito de sodio comercial (10%) fueron dispuestos en placas Petri
estableciendo una cámara húmeda.
Sobre los discos fueron aplicados los hongos potenciales antagonistas en una concentración de
107conidias/mL y luego de 24 horas se asperjó B. cinerea en concentración de 105 conidias/mL, adicionada
con glucosa 1 g/L. Al día siguiente, los discos de hojas fueron colocados en medio de cultivo PCA, que
contenía agar (20 g/L), paraquat (dicloruro de paraquat) 1 g/L y cloranfenicol 50 mg/L, siendo incubados
durante siete días a 26 ± 1°C.
Fueron probadas 71 cepas de hongos, en siete ensayos, debido a la dificultad de evaluarlas simultáneamente.
Cada cepa fue evaluada empleando cuatro repeticiones, y la unidad experimental fue la placa Petri que
contenía 10 discos de hojas. El tratamiento testigo sólo recibió la aplicación de B. cinerea. Adicionalmente, en
cada ensayo se incluyeron dos unidades experimentales, sin tratamiento alguno, para observar la presencia de
microorganismos endófitos.
Método

Efecto de cepas seleccionadas en la supresión de B. cinerea, aplicados antes y después del


patógeno.

Las cepas de Trichoderma A6, A27, A30 y A58 y Clonostachys A10, A11 A14 y A32, que presentaron
los mayores niveles de inhibición de B. cinerea en la selección in vitro, fueron ensayadas en dos
ocasiones. El primer ensayo fue de acuerdo a la metodología descrita previamente en el ensayo
de selección, y en el segundo ensayo sólo fue modificada la aplicación de B. cinerea, que se
realizó 24 h después de la cepa de antagonista.
Efecto de los antagonistas en el control de B. cinerea en ensayos sobre E. globulus en vivero. Las
que presentaban buen estado sanitario, de 30 cm. de altura y diámetro a la altura del cuello
(DAC) de 0,5 cm.
Los tratamientos aplicados fueron las cepas de Trichoderma (A6, A27, A30 y A58)
y Clonostachys (A10, A11, A14 y A32), el fungicida fehexamid (Teldor 50% WP) en dosis 1 g/L y el
control, en que sólo fue aplicado B. cinerea. El inóculo de los antagonistas y patógeno fueron
aplicados en concentraciones de 107 y 105 conidias/ ml en ADE, respectivamente. En la suspensión
de esporas de B. cinerea, se adicionó glucosa (1 g/L).
Método

Efecto de los antagonistas en el control de B. cinerea en ensayos sobre P. radiata en vivero.

Los antagonistas fueron asperjados sobre el follaje de las plantas, a una concentración de
107 conidios/mL, en tres oportunidades, a intervalos de 15 días. Adicionalmente, se realizaron dos
aplicaciones 48 h antes que los antagonistas, con B. cinerea a 105 conidios/mL, con la finalidad de
incrementar y homogeneizar la presencia de inóculo del patógeno. Los fungicidas fueron aplicados
en las mismas ocasiones que los antagonistas. El ensayo tuvo una duración total de 45 días.
Después de la primera aplicación del patógeno y los antagonistas, en cada oportunidad las plantas
se mantuvieron cubiertas bajo plástico transparente durante 24 h, para asegurar el mojamiento foliar y
favorecer la germinación de las esporas del patógeno y antagonistas. Posteriormente, se mantuvo
alta humedad relativa, mediante nebulización periódica.
El ensayo consistió de seis tratamientos; dos cepas de Trichoderma (A6 y A27), dos
de Clonostachys (A10 y A11), el tratamiento fungicida. Se evaluaron incidencia y severidad de la
enfermedad en las 60 plantas centrales de la cada bandeja. Para la severidad cada planta se dividió
en tres tercios, donde se observó la presencia o ausencia de signos del patógeno, de acuerdo a
escala descrita previamente.
Resultados

114 Hongos Aislados

71 Cepas Seleccionadas

De las cepas ensayadas, 20 (28, 2%


del total) redujeron
significativamente la colonización