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The neurotranscriptome of

Ades aegypti mosquito


Juan Sebastian Pino
Maestría en Biología
Introducción.

Vishvanath et al. 2007. http://science.sciencemag.org/content/316/5832/1718.long


Introducción.

Kraemer et al. 2015. http://dx.doi.org/10.7554/eLife.08347


Introducción.
Búsqueda de hospedero

Pre-oviposición. Ciclo Gonotrófico.


La distención del intestino
inhibe la búsqueda de
hospedero.

Maduración de los huevos.

van Breugel et al. 2015. https://doi.org/10.1016/j.cub.2015.06.046


Introducción.

http://www.unavarra.es/genmic/docbiomica/transcriptomica.pdf
Objetivo.
• Obtener transcriptoma de tejidos neuronales periféricos y centrales
("neurotranscriptoma") de Aedes Aegypti para mejorar la anotación del
genoma e identificar genes cuya expresión sea sexualmente dimórfica y/o
variable a través del ciclo gonotrópico de la hembra.
NIAID
1. Mejorar la anotación de los genes del genoma Ae.
Aegypti e identificar nuevos genes que no se
encuentran en el conjunto actual.

2. Catalogar la expresión génica en tejidos


relacionados con la búsqueda de hospederos en
mosquitos hembras y machos.

3. Identificar los cambios en la expresión génica que


están correlacionados con el estado de
alimentación de sangre y sus cambios de
comportamiento asociados
Métodos.
Cría de los mosquitos (LVPIB12)

Experimentos de comportamiento
Extracción de RNA y preparación de
librería RNA-seq

Hembras:
1) Antenas:100-220
2) Palpos maxilares:126-816
3) Probóscide: 275-797
4) Rostrum: 110-142
5) Cerebro: 9-18
6) Patas: 125;100-125;100-138
7) Ovario: 9-25
8) Abdomen: 50

Machos:
1)Antena: 75
2) Rostrum: 40-50
3)Cerebro: 25
4) Patas: 100-125
5) Abdomen: 50
Métodos. Todos los reads fueron alineados con el genoma de referencia
AegL2 usando Cufflinks2, Tophat2 and Bowtie2.

AeagL3, STAR 2.4.1c, FeatureCounts, R, Todos los reads de todas las bibliotecas se
DESeq2 ensamblaron de novo sin genoma de
referencia utilizando el software Trinity

El análisis realizado en el flujo de


trabajo de una librería QC es similar al Program to Assemble Spliced Alignments
flujo de trabajo de Resecuenciación.

AaegL3.3, Cuffcompare, OrthoDB, AEGeAn package Gmap, Transdecoder, Blastx, CD-HIT


Resultados.
Resultados.
Resultados.
Resultados.
Resultados.
Resultados.
Resultados.
Conclusiones.
• Se presenta una visión amplia de la expresión génica en tejidos de machos
y hembras, centrándose particularmente en las familias de genes
relacionadas con la función neuronal y la quimiosensación.

• Se demuestra que los efectos de la alimentación sanguínea en la expresión


génica son amplios.

• Este estudio representa el examen más completo, específico de tejidos de


expresión génica en adultos de Ae. Aegypti hasta la fecha y es fundamental
en la comprensión de la base molecular de la conducta en este importante
vector de enfermedad.

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