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OBJETIVOS:
Conocer la importancia de la
glucólisis como fuente de
generación de energía.
Verificar la formación de ácido
pirúvico como producto final de la
glucólisis.
Identificar las principales enzimas
que intervienen en la glucólisis.
DEFINICIÓN:
La glucólisis es una secuencia de 10 reacciones que rompen una molécula
de glucosa (seis carbonos) en dos moléculas de piruvato de tres carbonos,
con la generación de moléculas de ATP y NADH. Por lo tanto, la glucólisis
proporciona energía y productos intermedios para otras vías metabólicas.
Glucosa + 2 NAD+ + 2ADP + 2Pi -> 2NADH + 2 piruvato + 2 ATP + 2H2O + 2H+
Glucosa + 2 NADH+ + 2ADP + 2Pi -> 2NADH + 2 piruvato + 2 ATP + 2 H2O + 2H+
Glucólisis aerobia.
Se generan dos moles de NADH a partir de la oxidación de un mol de glucosa;
cada NADH es oxidado por la cadena de transporte de electrones. El efecto
neto de la glucólisis aerobia es la generación de 7 ATP por mol de glucosa (2
directamente por la fosforilación a nivel del sustrato y 5 indirectamente
mediante la fosforilación oxidativa).
La reación global puede escribirse como:
Glucosa + 2 NAD+ + 2ADP + 2Pi -> 2NADH + 2 piruvato + 2 ATP + H2O + 2H+
PARTE EXPERIMENTAL
•EXPERIMENTO.- Glicólisis.
La glicólisis anaeróbica (parcialmente) se demuestra por el aumento de compuestos
ácidos (pirúvico y láctico) en el tubo de reacción. Para el efecto preparar cuatro tubos de
acuerdo al esquema.
TUBO 1 2 3 4
ml solución de Potter pH 7,4 2,5 2,5 2,5 2,5
ml Glucosa 0,1 m 0,5 0,5 0,5 0,5
ml NAD 10m g/ml 0,2 0,0 0,2 0,2
ml ATP 5m g/ml 0,2 0,2 0 0,2
ml Nicotinamida 0,4m 0,1 0,1 0,1 0,1
ml Yodoacetato 0,1m 0 0 0 0,1
ml Agua destilada 0,1 0,3 0,3 0
Colocar en baño de maría 37ºC por 5 minutos
Gotas de rojo de fenol II II II II
ml homogenizado de hígado 0,5 0,5 0,5 0,5
Tapar e incubar 1 hora a 37ºC
Titular cada tubo con NaOH 0,01N hasta el color original
CUESTIONARIO
1. Las reacciones que tienen lugar hasta llegar a la fructosa 1,6-difosfato
constituyen la fase de preparación de la glucólisis. ¿Qué transformaciones
químicas tienen lugar durante esta fase y cuál es el balance energético de
la misma?
5. ¿Qué son las “lanzaderas” y cuáles son las funciones de las lanzaderas
malato-aspartato y glicerol-3-fosfato?