PRUEBA DE

PIRÓGENOS
CONTROL DE FORMAS FARMACÉUTICAS

AIDA FERNANDA GRANADOS DELFÍN

 Objetivo
El objetivo de esta prueba es la verificación de la
ausencia de pirógenos en el producto. Basado en el
registro del aumento de temperatura en el conejo como
respuesta a la presencia de agentes pirogénicos.
 Pirógenos
Un pirógeno es una molécula que provoca fiebre. Puede ser provocado por agentes exógenos siendo los más
frecuentas las toxinas de bacterias. Algunas bacterias producen pirógenos que se denominan endotoxinas y
exotoxinas.

ENDOTOXINAS EXOTOXINAS
Se encuentran en la pared celular de las Son moléculas que algunas bacterias
bacterias gramnegativas en forma de producen internamente y secretan al
lipopolisacárido. exterior.
 El mal almacenamiento causa el desarrollo de pirógenos.

Las endotoxinas tienden a adherirse al material de vidrio, la

manera de eliminarlas es exponerlas a temperaturas altas por
calor seco por tiempo prolongado (por ejemplo, 250 grados
por 30 minutos). Ya que el agua con jabón y la esterilización
no son efectivas.

La despirogenización es más difícil que la esterilización.

PRUEBA DE PIRÓGENOS
La prueba mide el aumento de la temperatura
corporal, como respuesta a la presencia de
agentes pirógenos, en conejos a los que se
inyecta por vía intravenosa el producto a
analizar
 “
Animales de prueba
Utilizar conejos albinos, sanos,
adultos, de un peso no menor de
1.5 Kg, de cualquier sexo
alimentados con una dieta
balanceada libre de antibióticos,
alojados en jaulas individuales en
un lugar con temperatura
controlada de 20 a 23°C, sin ruido u Antes de una prueba de
otros factores que los exciten. pirógenos, acondicionar a los
conejos, retirar el alimento 18
h antes permitiendo solo el
acceso al agua.
 Procedimiento
Registrar el peso de cada uno de los
conejos, insertar el sensor de temperatura
en el recto a una profundidad no menor de
7.5 cm al menos 90 min antes de la
inyección. A intervalos de 30 min tomar por
lo menos dos temperaturas, la última lectura
corresponde a la temperatura control. A los
30 min de registrar la temperatura control
inyectar la muestra. El conejo que muestre
una variación mayor de 0.2°C entre dos
temperaturas sucesivas, y los que difieran
por más de 1°C entre ellos, se eliminan de la
prueba. No usar animales con temperatura
control mayor a 39.8°C o menor de 38.0°C
 Registrar la temperatura de cada animal a
intervalos de 30 min durante 3 h. La
La cantidad de muestras a inyectar temperatura máxima de cada conejo es la
varía de acuerdo al producto, no debe más alta temperatura registrada para cada
ser menor de 0.5 mL y no mayor de 10 animal en las 3 h después de la inyección.
mL/kg de peso del animal. Entibiar la
solución de la muestra a 37±2°C. De
acuerdo al peso del conejo inyectar en
la vena marginal de la oreja de tres
conejos.
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Interpretación. La muestra cumple los requisitos para ausencia de pirógenos si no más de tres de los ocho conejos presentan un
aumento de temperatura individual de 0.5°C o mayor y si la suma del aumento de la temperatura máxima de los ocho conejos no
excede 3.3°C.