Transgênicos

Prof. Thiago Maniglia

 Etapas da transgenia
• Clonagem do gene de interesse
• Preparação do transgene:
– O código genético é essencialmente o
mesmo para todos os organismos
– Diferenças no controle – expressão
• Inserir no transgene a região controle do
tecido onde o transgene será expresso
(Promotor, Enhancers, silenciadores)
• Ex: Promotores do leite das glândulas
mamárias

• Introdução do transgene no organismo de interesse

 Métodos de Inserção do gene
clonado
• Transformação – cultura de tecidos e bactérias
• Biobalística (Pistola de DNA)
• Infecção por vírus e Bactérias
• Esperma transgênico
• Células tronco germinativas masculinas
• Transferência de célula tronco embrionária
• Microinjeção pró-nuclear
• Transferência Nuclear (TN) - Clonagem
 Transformação - Termoquímica
• Adição de CaCl2 gelado
• 2 min. à 42 ̊C
• 1 cél transformada a cada 1000 céls
• 106 a 107 colônias de céls transformadas por
micrograma de plasmídio
 Transformação - Eletroporação:
• 50 ul de E. coli – choque de 4,6 milissegundos
• 25 microfarads
• 2500 volts
• 200 ohms
• 109 (<3kb) a 106 colônias por micrograma de
plasmídio
• Aplicável a praticamente qualquer célula
 Conjugação
• Usado para espécies que não fazem
transformação
Acelerador de Partículas
Pistola de DNA
Infecção por Vírus e Bactérias

Genes Vir (integração ao

genoma do hospedeiro)
Onc. (indutores de
tumores - desativados),
OPINAS (fonte de C eN) e
de seleção (resistência a
antibiótico)
Transferência de célula tronco
embrionária
Microinjeção pró-nuclear
Microinjeção pró-nuclear
• Obtenção de um transgênico
heterozigoto
• Cruzamento da F1 para
obtenção de transgênico
homozigoto
 Transferência Nuclear (TN)
• 1 animal de produção – ovelha com fator de
coagulação humana
Bactéria Transgênica
 Aplicações em bactérias
• Bactéria transgênica impede a obesidade
• E. coli criada por cientistas dos EUA com o gene para
síntese do hormônio N-acilfosfatidiletanolamina;
• Ratos que ingeriram água com E. coli modificada
perderam peso até 4 semanas após a ingestão
• Serão feitos testes em humanos para produção de
bebidas probióticas
 BIORREMEDIAÇÃO
Estudo publicado pela BMC
Biotechnology
• Bactéria transgênica pode limpar água com
mercúrio
• E. coli com o gene de desintoxicação de rato
produzem metalotioneína
• Capazes de proliferar em uma solução
contendo 24 vezes a dose mortal de mercúrio
para bactérias não resistentes
• Em cinco dias absorvem 80% do mercúrio
 Bactéria no tratamento do Câncer
• A região do tumor tem baixa concentração de
oxigênio
• A bactéria anaeróbia Clostridium novyi está
sendo utilizada para eliminar células tumorais em
rato, cães e humanos.
• Essa bactéria produz uma toxina bastante
agressiva em pessoas e animais. Para usá-la de
forma segura, os cientistas “deletaram” parte do
DNA da bactéria
 Nature Biotechnology
• Os pesquisadores criaram uma bactéria
transgênica que contém um anticorpo
específico contra o fungo "Candida albicans",
que causa infecções vaginais e candidíase
(sapinho) em pessoas com imunossupressão.
 ZHANG, QIAN e MA, 2013 - Produção de lipase utilizando a engenharia
genética, obtiveram um aumento de mais de 76% na produção de lipases produzida
por espécie mutante de Flavobacterium spp.

 STEEN et al, (2010) conseguiram um aumento de produção de biodiesel de 40

mg/L para 700 mg/L, utilizando Escherichia coli geneticamente modificada

 ANANDARAJAH et al, (2012) e ZHANG, QIAN e MA, (2013) - microalgas

geneticamente modificadas para aumentar a produção de lipídeos que

serve como matéria prima para a produção de biodiesel
Animais Transgênicos
Conceitos de Animais Transgênicos
• Animal Geneticamente modificado – OGM

• Animal com DNA Exógeno

• Animal com DNA Exógeno com posterior

transmissão para gerações seguintes
 Objetivos da Transgenia
• Desenvolver animais com características
nunca alcançadas com programas de
melhoramento.
• Genes de espécies distantes
 Primeiros animais transgênicos
• Década de 80 – camundongo, coelho, ovinos,
suínos bovinos (Herman)

• 2001 – primeiro primata – ANDI - macaco

Rhesus
 Finalidade (Aplicações):
• Estudos de Expressão gênica e doenças genéticas
humanas
– Animais transgênicos para estudar: Tumores, diabetes,
obesidade, distúrbios neurológicos, etc.
• Biorreatores
– Ovelha Tracy (1990) - enzima 1 α proteinase humana
em seu leite (Enfisema) (elastina elastase),
– Ovelha Polly (1997) – fator de coagulação IX, promotor
da glândula mamária
– Vacas com leite similar ao humano – 2 genes do leite
humano
– Porco que produz hormônio do crescimento no
Rato transgênico com orelha
humana
 Finalidade (Aplicações):
• Aberrações – “Pets”
– Gato que brilha no escuro
– Porco com patas e focinho coloridos
• Incremento na Pecuária
– Camundongo com gene do crescimento de Rato
– Ovinos, Bovinos, suínos, aves, peixes maiores e com
crescimento rápido.
• Sumosalmão – 11 x maior; 37 x rápido
Salmão AquAdvantage

– Carne mais macia, magra, maior teor de proteína

• Suínos – artrite, úlcera, fêmeas estéreis
– Vacas que produzem mais leite ou leite com menos
lactose ou colesterol
 Incremento na Pecuária
– Ovelhas que produzem mais lã
– Animais resistentes a doenças – gripe suína, febre
aftosa
– cabra transgênica que produz em seu leite uma
proteína da teia de aranha
 Benefícios
• Especificidade – escolha das características
desejáveis sem indesejáveis
• Velocidade – 1 ou 2gerações
• Valor Econômico

Riscos
• Saúde animal – O transgene pode desativar
um gene do animal
• Transferência de vírus para o homem
• Disseminação – para pop. Selvagem
Plantas Transgênicas
 a
Transgênicos de 1 Geração
• Reduzir os custos de produção e melhorar a
rentabilidade dos produtores
• Resistência: Bt e Glifosato
• Resistência a Doenças
 Resistência a Doenças
• Resistência derivada do patógeno – Ex:
mamoeiro resistente ao vírus da mancha
anelar - foi obtida através da introdução de
partes do gene que codifica a capa proteica do
vírus
 Bt
• Genes Cry: Codifica a toxina produzida pela
bactéria entomopatogênica do solo Bacillus
thuringiensis, que é tóxica para muitos tipos
de insetos
Resistência ao Glifosato (glicina + fosfato)
O glifosato mata as
plantas por inibir a enzima
5-enolpiruvoil-shikimato-
3-fosfato sintetase (EPSPS)

Soja transgênica recebeu

o gene CP4 EPSPS clonado
da bactéria
Agrobacterium
tumefaciens estirpe CP4
 a
Transgênico de 2 Geração
• Melhorar a aparência, conteúdo e qualidade
nutricional dos alimentos
• Melhor composição de ácidos graxos no óleo,
de aminoácidos na proteína, incrementos nos
níveis de diversos tipos de vitaminas
• A melhoria na qualidade dos produtos que
serão utilizados na fabricação de ração para os
animais pode melhorar a conversão alimentar,
reduzindo além dos custos, a quantidade de
dejetos produzidos
Arroz Dourado

• Produz dezenas de vezes mais ferro nos grãos, do

que as variedades convencionais
• Pela inserção de dois transgenes da planta
Narcisso e um transgene da bactéria Erwinia foi
possível obter arroz transgênico com capacidade
de produzir cerca de 20 vezes mais beta caroteno
(precursor da vitamina A)
 a
Transgênico 3 Geração
• Plantas como Biofábricas
• Os grãos utilizados na formulação de rações
poderão conter vacinas para diversos tipos de
doenças
• Hoje - é possível purificar insulina humana a
partir de grãos de milho; É possível produzir
grãos de milho que possuam a vacina da
coccidiose para colocar na ração de frangos
 Soja na produção de cianovirina
• A alga marinha Nostoc ellipsosporum produz
uma proteína que se liga a açucares e impede a
proliferação do vírus HIV no corpo humano
• A semente da soja transgênica que contem o
gene da síntese de cianovirina está sendo
produzida pela Embrapa Recursos Genéticos e
Biotecnologia para a produção em larga escala
desse medicamento

Elíbio Rech
 Legislação Brasileira
• Comissão Técnica Nacional de Biossegurança
(CTNBio): regulamenta as atividades
relacionadas com pesquisa, transporte e
comercialização de organismos transgênicos e
seus derivados;
• Equivalência Substancial x Ingestão Diária
Aceitável
 Lista dos 10 alimentos transgênicos mais utilizados
(BBC)
(Todo alimento que tem mais que 1% de matéria-prima deve ser rotulado como
transgênico)

1) SALMÃO TRANSGÊNICO – Primeiro animal transgênico liberado para consumo

humano. Liberadoo em 2012 pela FDA;

2) MILHO - Dezoito variedade de milho transgênico são aprovadas para consumo no

Brasil; Mais de 85% das atuais lavouras no Brasil e nos Estados Unidos;

3) SOJA – Óleo, leite de soja, tofu, bebidas de frutas e soja e a pasta misso. No Brasil a
soja transgênica ocupa quase um terço de toda a área dedicada à agricultura, a
CTNBio liberou cinco variantes da planta, todas tolerantes a herbicidas

4) ÓLEOS - soja, milho e algodão.

5) MAMÃO PAPAYA - combater um vírus;

6) QUEIJO - A quimosina, uma enzima importante na coagulação de lacticínios, era
tradicionalmente extraída do estômago de cabritos e atualmente é produzida por
bactérias, fungos e leveduras que receberam esse gene. No mercado des dos
anos 90

7) PÃO, BOLOS e BISCOITOS – além de derivados de soja e milho, aditivos

provenientes de micro-organismos modificados, como ácido ascórbico, enzimas e
glutamato.

8) ABOBRINHA - Seis variedades de abobrinha resistentes a três tipos de vírus são

plantadas e comercializadas (proibido no Brasil e Europa);

9) ARROZ DOURADO – Esta sendo testado para liberação do consumo;

10) FEIJÃO – Desenvolvido em 2011 pela Embrapa. Gene de resistência a principal

praga dessa cultura. É o primeiro produto geneticamente modificado desenvolvido
por uma instituição pública brasileira
Discussão sobre Riscos e Benefícios
dos Transgênicos
• Diminui a aplicação de agrotóxicos
• Toxinas específicas para insetos praga – Bt
• Aumento da rentabilidade

• Risco de pragas adquirirem resistência a

antibióticos e ao Bt
• Alergias
• Efeito do Bt sobre insetos não-alvo - Borboleta
Monarca
 Aspectos Éticos e religiosos
• Direito de desenvolver esses tipos de
experimentos com animais, plantas e
microorganismos
• Direito de manipular o código genético,
misturando o que “Deus criou”.
“Geneticistas querem brincar de deuses”
• Implicações evolutivas dos transgênicos
 Transgênicos:
A favor ou contra
?