DETECCION

MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS

Dr. Gallegos Catachura, Jimmy R.

Medico Patólogo Clínico.
Jrichard_76@yahoo.es
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSO

– Aerobio
– Acido alcohol resistente
– Bacilo de 1.2 - 2.5 micras
– No esporulados, no móviles
– Acido micolicos típicos
– Tiempo de desarrollo:
18 - 20 hrs
– Reproducción: Fisión binaria.
– Crecimiento favorecido 5-10%
CO2 a Temp: 37ªC.
MORFOLOGIA, ESTRUCTURA Y COMPOSICION

PARED CELULAR:

• CAPA INTERNA: Peptidoglicano.

• CAPA MEDIA: Arabinogalactano, los
ácido micólicos.
• CAPA EXTERNA:
Electro opaca, de la cual no puede
conocerse con las técnicas actuales.

MEMBRANA CITOPLASMATICA:
• Tiene como característica la
presencia de moléculas de:
lipopolisacaridos.
lipoarabinomananos (LAM).
Lipomonanos.
fosfatidil-manosidos.
 METODOS DE DIAGNOSTICO DE MYCOBACTERIUM

COLORACION CULTIVO BIOLOGIA MOLECULAR

ZIEHL NEELSEN MEDIO OGAWA

TINCION Pb AMPLIFICACION DE Ac
FLUORESCENTE MEDIO LOWEINSTEIN JENSEN NUCLEICOS (INNO-LiPA)
MEDIO SINTETICO: MH10, MH11BATE,
etc. Pb CON FAGOS.

MEDIO LIQUIDO: MODS, GRISS, etc.

MEDIO PROPORCIONES: MLJ

METODO OXIDO-REDUCCION: GRIESS-

AZUL DE ALAMAR-MTT-RESAZURINA
MODS

BACTEC-MGIT
Número de muestras
Para realizar el diagnóstico deben recogerse tres muestras del siguiente modo:

1a. 2a. 3a.

80% 10% 5%

Una buena muestra de expectoración es la que proviene del árbol bronquial

obtenida después de un esfuerzo de tos y no la que se obtiene de faringe o
por aspiración de secreciones nasales o saliva.

Para que la calidad de la muestra sea satisfactoria es necesario que contenga

material mucoide o mucopurulento.
En condiciones ideales el volumen debe ser de 3 a 5 ml.
Puede aceptarse una cantidad pequeña si la calidad es satisfactoria.
 MARCAR LOS PORTAOBJETOS

ORDENAR LAS MUESTRAS

PARTIR EL APLICADOR SELECCIONAR LA PARTÍCULA MÁS

PURULENTA Es la técnica de elección para
el diagnóstico rápido y el
control del tratamiento de la
tuberculosis

EXTENDER LA MUESTRA UNIFORMEMENTE

DEPOSITAR EN EL PORTAOBJETOS

INICIAR LA TINCION
 CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES
VECES DURANTE 5 MINUTOS

CUBRIR CON FUCSINA FILTRADA

LAVAR CON AGUA CUBRIR CON DECOLORANTE DURANTE 3

MINUTOS

CUBRIR CON AZUL DE METILENO DURANTE

LAVAR CON AGUA 1 MINUTO

LAVAR CON AGUA SECAR AL AIRE

 INTERPRETACION DE RESULTADOS
POR COLORACION ZIEHL NEELSEN

RESULTADO DEL INFORME

EXAMEN
MICROSCOPICO
No se observa BAAR en
los 100 campos No se observa BAAR.
observados
Se observan de 1 a 9 Numero exacto de
BAAR en 100 campos bacilos en 100
observados campos.
Se observan entre 10 a
99 BAAR en 100 Positivo (+)
campos observados
Se observan de 1 a 10
BAAR en 50 campos Positivo (++)
observados
Se observan mas de 10
BAAR en 20 campos Positivo (++++)
observados
INTERPRETACION DE RESULTADO DEL CULTIVO

REGISTRAR SI SE OBSERVA

Todos los tubos

Contaminado inoculados con la
muestra contaminadas

Sin desarrollo luego de

Negativo la inspección de la
octava semana de
incubación.
Entre 1 y 19 colonias en
El numero de colonias el total de medios
exactas. sembrados.
Positivo (+) 20-100 Colonias

Mas de 100 Colonias

Positivo (++) (colonias separadas).

Colonias incontables
Positivo (+++) (colonias confluentes).
Cultivo en Lowenstein - Jensen

1 2 3 4

1. Micobacteria ambiental cromógena

2. Micobacteria ambiental de rápido desarrollo
3. Micobacteria ambiental de lento desarrollo
4. Mycobacterium tuberculosis
 Cultivo: Esquema de diferenciación

Micobacterias
M. tuberculosis
ambientales
Velocidad de desarrollo Lenta Lenta o rápida
(a partir de la 3º semana
luego de inoculada una muestra
en medio a base de huevos)
Aspecto macroscopico Rugosa Lisa
de la colonia No pigmentada Pueden tener pigmentos
Aspecto microscopico Bacilos dispuestos en Bacilos muy largos y filamentosos
de la colonia "cuerdas" o cortos, cocoides, mayormente
desagregados
Niacina Positiva Negativa
Catalasa a 68º C Negativa Positiva
Reduccion de nitrato Positiva Positiva / Negativa
Diagnostico Microbiológico de la Tuberculosis

Cultivo muestra
(menos de 7 días en refrigeración)

Decontaminación

Inoculación

Incubación
4 - 8 semanas
Lectura

Resultado