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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE

CARRERA DE INGENIERÍA AGROPECUARIA IASA I

BIOTECNOLOGÍA ANIMAL

TEMA: TRANSFERENCIA DE EMBRIONES


INTEGRANTES:
• Arellano María del Mar
• Masabanda José
• Muñoz Alexandra
• Tipán Karla OCTAVO “A”
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Antecedentes

• Técnica reproductiva
posterior a la I.A.
• Requiere de mayor
tecnología.
• Primera transferencia en
ganado ocurrió en 1951.
• Fue comercial en 1970
(quirúrgica) y poco
después (no quirúrgica).
• En hembras infértiles.
• Exportación o importación
* Obtención de mayor * Existe variabilidad de los
cantidad de crías de hembras resultados.

LIMITANTES
valiosas y adaptadas a
determinada zona o * Altos costos ($600 cada
sistema de manejo. embrión).
VENTAJAS

* Progreso genético del hato * Se requiere de personal


es más rápido. capacitado.
* Puede usarse semen sexado * Riesgo de introducir alguna
para > cantidad de machos o enfermedad cuando no hay
hembras. control.
* Posibilidad de traer o * Se requiere de un buen
introducir nuevas razas a un manejo.
país.
EFICIENCIA REQUISITOS

• Superovulación variable 5- • Vacas ciclando


12 embriones • Buena condición corporal
• Transferencia inmediata • Ser genéticamente
55-65% preñeces superior
• Congelados 85% normal a • Poseer habilidad y salud
descongelar 40-55% reproductiva
preñeces comprobada
• Buena recuperación post
parto
• Edad, no mayor de los 12
años
1 - elección de
la donante

2-
8 - sexaje del superovulación
embrión e inseminación
artificial

7 - microcirugía
Etapas de 3 - colección o
embrionaria
la colección flushing

4-
6-
identificación y
criopreservación
evaluación
embrionaria
embrionaria

5-
sincronización y
transferencia
en receptoras
Proceso
MÉTODOS PARA PROVOCAR LA
SUPEROVULACIÓN

Administración de Comienza entre el día 8 y 13 del ciclo


gonadotrofinas exógenas para estral (etapa de máxima funcionalidad del
la inducción de la ovulación CL y mayor población folicular apta) ,
múltiple. tomando siempre como referencia el día
del estro como el día 0.

Las gonadotrofinas producen sobre


el ovario el efecto de revertir la
atresia folicular rescatando aquellos
folículos (cuyo diámetro es mayor a
1.7 mm o antrales) en vía de
atresia permitiendo entonces que
continúen con su desarrollo y
maduración .
Superovulación con FSH

seguida de media dosis 12 horas mas


A) Por administración tarde ; esto debe llevar a
de 48mg de FSH en que manifieste el celo entre las 36 - 60
dosis creciente durante horas posteriores a la primera inyección
4 días a 2 inyecciones ( por regresión del CL).
por días con intervalos
de 12 h.

B) Por administración de No se debe variar el intervalo de


una dosis total de 32 mg inyección de 12 horas entre dosis ; a las
en dosis crecientes 48 h de comenzado el tratamiento se
durante 5 días. administra una dosis de
prostaglandina PG2alfa.
Superovulación con eCG.

Esta consiste en una sola dosis de la


hormona seguida de las dosis de
prostaglandina ( se usan 200-2500 UI en
vaquillonas o 1500-3000 UI en vacas) a
las 48 y 60 hs posteriores al comienzo del
tratamiento; algunos autores sugieren
iniciar el tratamiento en el días 12 del
ciclo.
Diferencia entre los dos métodos
Parámetros FSH eCG
Nº de inyecciones 8 1

Vida ½ en sangre 120 minutos 5-6 días

Ovulaciones prematuras + +++

Interferencia con pico de LH


+ +++
endogeno

inducción de folículos
+ ++++
anovulatorios

% de fertilidad ++++ ++

% de embriones transferibles ++++ ++

% de embriones
++ +++
degenerados

Nº de estructuras totales ++ ++++


Sincronización de donantes y receptoras
Por cada animal
donante superovulado se debe
tener a disposición 10
En la donante la 1ª dosis de receptoras inyectadas con
prostaglandina se aplica a las 48 prostaglandina, debido a que
h de iniciado el tratamiento. no todas las receptoras
presentan estro en el periodo
aproximado a las 24 h
(presentan un 80%).

no se debe hacer al mismo


Entre 12-18 horas antes de la
tiempo porque en la
administración de la
superovulación existe un
prostaglandina a la donante se
crecimiento folicular mayor y el
le realiza una palpación rectal a
estro se adelanta entre 12 y 18
las receptoras.
h.

y se apartan aquellas que


presentan un cuerpo lúteo las receptoras deben de diferir
funcionante a las que se las en mas o menos 24 h del estro
inyecta inmediatamente con con el estro de la donantes
prostaglandina PG2 alfa
MÉTODOS DE RECOLECCIÓN Y TRANSFERENCIA
La colección o Flushing consiste en el lavado del oviducto o los cuernos
uterinos para extraer los embriones por arrastre; se realiza entre los días 6 - 9
posteriores a las I.A ; cuando se lava los cuernos y entre 2 - 4 días cuando se
realiza el lavado de oviductos.
La técnica mas usada implica el lavado entre el días 7 ½ al 8º , siendo varios los
métodos :

a ) Quirúrgicas :
1 - Laparotomia ventral
2 - Laparotomia lateral

b) No quirúrgicas :
1 - Transervical
Es similar a una inseminación artificial, el embrión se
coloca en una pajuela o se comercializa pronto
Se introduce en la cavidad para implantar.
abdominal, se sacan los
cuernos uterinos hasta los
labios de la herida y se hace
una perforación con la parte La pajuela posee una columna de liquido o medio
roma de una aguja de sutura. de cultivo, luego un espacio de aire, posteriormente
una 2da columna con medio de cultivo mas el
Laparotomia lateral

embrión , otro espacio con aire y una ultima zona

Transcervical
por esta se introduce una con medio de cultivo.
pipeta Pasteur con el embrión
y al llegar a la luz se deposita La pajuela se carga en una pistola de transferencia
el contenido, se lleva el útero que posee un forro sanitario para proteger la misma
a su lugar y se cierra. en su pasaje por la vagina, evitando el arrastre de
contaminación hacia el útero.

Es normal y común el uso de vaquillonas como


El cuerno en el cual se receptoras debido a que poseen cuello fino y muy
deposita el embrión, es aquel cerrado, pero tiene la desventaja de que pueden
que tiene el ovario con llegar a sangrar lo que implica una disminución en el
cuerpo lúteo. % de fertilidad.
Es un técnica que posee
mayor porcentaje de preñes La técnica no debe llevar mas de 5 minutos, y
pero dificultosa y lleva consiste en que una vez pasado el cérvix, se lleva la
demasiado tiempo. pistola al cuello, estirándolo un poco en la
curvatura para que avance y se deposita
profundamente en el cuerno, en caso de no llegar,
se hace en el primer tope.
EFECTO DE LA APLICACIÓN DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO RECOMBINANTE
(rbST) SOBRE LA RESPUESTA SUPEROVULATORIA Y LA VIABILIDAD EMBRIONARIA
EN OVEJAS DE PELO.

El estatus nutricional de las ovejas (Ovis aries) es un factor determínate de la actividad ovárica ya que
condiciona una respuesta reproductiva eficiente.

Previo a la época de apareamiento, el efecto de la suplementación energética (flushing) permite un


incremento en la fertilidad y prolificidad general del rebaño.

La hormona de crecimiento ejerce a nivel ovárico en etapas de desarrollo folicular temprano.

El presente trabajo estudió el efecto del uso de proteína de alto valor nutricional y su interacción con la hormona de crecimiento
sobre la respuesta superovulatoria y la viabilidad embrionaria en ovejas de pelo.
MATERIALES Y MÉTODOS

El trabajo se realizó en la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Autónoma de Yucatán y en


el Centro de Selección y Reproducción Ovina (CeSyRO).

Se utilizaron 12 ovejas de raza Pelibuey adultas multíparas no lactantes, de 3 años de edad, distribuidas al azar en dos
tratamientos.

• Tratamiento A (Control), las ovejas recibieron un estímulo superovulatorio con Hormona Folículo Estimulante
ovina (FSH, ovagen), utilizando 176 unidades NIH-FSH-S1 por oveja, distribuidas en ocho aplicaciones con dosis
decrecientes.

• Tratamiento B (T) recibió además del estimulo con FSH, 100 mg de Somatotropina bovina recombinante (rbST)
por oveja.

Alojadas en corraletas individuales (1,30 x 1,40 m) con libre acceso a agua, el alimento se les ofreció por la
mañana y por la tarde a partes iguales.
MATERIALES Y MÉTODOS

El estro de las ovejas fue sincronizado mediante la inserción de esponjas vaginales impregnadas con 40 mg de
acetato de fluorogestona (FGA, Chronogest®, Intervet ) durante 14 días, realizando un cambio de esponja a los 7
días con el objetivo de mantener niveles circulantes elevados de progestágenos.

Para inducir la superovulación se le administró a cada oveja FSH ovina (FSH; Ovagen) a intervalos de 12 h en dosis
decrecientes (35,2; 35,2; 26,4; 26,4; 17,6; 17,6; 8,8; 8,8 unidades NIH-FSH-S1), iniciando 72 h antes de la retirada
de las esponjas, la cual coincidió con la séptima inyección.

En la primera aplicación se les administró adicionalmente 2 mL de prostaglandina PGF (Lutalyse).

La aplicación de 100 mg de Somatotrópina bovina recombinante (Lactotropina) se llevó a cabo durante la octava
aplicación del tratamiento superovulatorio.
MATERIALES Y MÉTODOS

Las ovejas se inseminaron, vía intrauterina, 56 ± 1 h después de retiradas las esponjas, con ayuda de un
laparoscopio.

Se utilizo semen refrigerado de un macho con fertilidad probada, conteniendo un


promedio de 100000000 espermatozoides por pajuela.

Los embriones fueron recolectados 5 días después de la Inseminación.

Previamente se realizó la endoscopia para evaluar la respuesta a la superovulación.

La viabilidad embrionaria se midió utilizando criterios morfológicos

Los embriones fueron considerados como viables cuando su estado de desarrollo al momento de la
colecta era acorde a su edad, sin que presentasen signos de degeneración celular.
MATERIALES Y MÉTODOS

Las anomalías a detectar fueron:

Ausencia de simetría, tamaño celular irregular, blastómeros excluidos, incremento de la granulación, células
vacuoladas y zona pelúcida dañada.

Para medir la respuesta reproductiva, se determinaron y analizaron las siguientes variables:

Cuerpos lúteos (CL), para evaluar la tasa de recuperación solamente se consideraron los CLs de los cuernos uterinos
lavados , embriones recuperados (ER), embriones viables (EV) y embriones viables por oveja tratada (EV/OT).

Todo cuerno con menos de tres CLs no fue lavado.


RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En ovejas sometidas a un estímulo superovulatorio con FSH se observó un incremento en todas las variables de
respuesta evaluadas cuando se adicionó rbST , principalmente
en tasa de ovulación (86,52% vs 96,64%) y tasa de viabilidad embrionaria (54,69% vs 82,05%)

Esto probablemente se atribuye a que la rbST altera los componentes del sistema de factores de crecimiento
insulínico, IGF (principalmente IGF-I) estimulando la esteroidogénesis folicular, lo que aumenta el número y la
madurez fisiológica de los folículos de tamaño medio en los ovarios.

Tanto el IGF-I como la insulina, tienen efecto sinérgico para estimular la proliferación y diferenciación de las
células de la granulosa in vitro en bovinos y ovinos

La rbST tiene efectos directos en la fisiología reproductiva de bovinos y ovinos, que incluyen: mayor tamaño del cuerpo
lúteo, incremento en la secreción de progesterona y una ligera extensión del estro por el alargamiento de la vida media
del cuerpo lúteo
RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Algunos estudios han demostrado que la aplicación de rGH junto con FSH en ovejas superovuladas no tiene ningún
efecto sobre la tasa de ovulación, aunque se reconoce una mejoría en la calidad de los folículos

Por el contrario, en este estudio se observó un aumento en la tasa de ovulación.

Paralelo al incremento en la tasa de


ovulación, aumenta la cantidad de
embriones viables
CONCLUSIONES

• La hormona de crecimiento aplicada antes de la ovulación estimula la maduración de mayor cantidad de folículos en
ovejas sometidas a un tratamiento superovulatorio y suplementadas con proteína de alta calidad.

• La cantidad de embriones recuperados y la viabilidad embrionaria mejora cuando se utiliza rbST en ovejas sometidas
a superovulación con suplementación proteica, lo que indica que existe una acción sinérgica.

BIBLIOGRAFÍA

• Zulia, U., Luis, F., Alvar, A., Eugenia, I., Raúl, E., José, R., … Pelo, E. N. O. D. E. (2008). DE LA APLICACIÓN
DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO RECOMBINANTE ( rbST ) SOBRE LA RESPUESTA
SUPEROVULATORIA Y LA VIABILIDAD EMBRIONARIA.

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