Dr.

Minodora Onisâi
Clinica Hematologie SUUB

HEMATOLOGIE CLINICA
INTRODUCERE IN HEMATOLOGIE
HEMATOPOIEZA
 Sangele

 Doua componente majore:

› Componenta plasmatica – 55-60%

 Contine plasma, electroliti, coloizi

› Componenta celulara – 40-45%

 Contine eritrocite (celule rosii), leucocite (celule
albe), trombocite
 Sintetizate de maduva hematogena – osoasa
 Evaluata cu ajutorul hemogramei si frotiului de
sange periferic
 Componenta plasmatica

 Componentele majore: electrolitii si

proteinele

 Electrolitii:
 Pozitivi (cationi): Na+, K+, Ca+2, Mg+2
 Negativi (anioni): Cl, bicarbonat, acizii organici,
proteinele, fosfati, sulfati, etc.
 Componenta plasmatica

 Proteinele:
› Albumine:
 Determina presiunea osmotica; hipoalbuminemia –
edeme!
 Leaga diferite substante (nutritive, hormoni,
medicamente, etc)
› Globuline
 Notate in functie de greutatea moleculara (alfa, beta,
gamma)
 Rol in formarea hemoglobinei si in raspunsul imun
› Fibrinogen:
 Glicoproteina cu rol vital in hemostaza (coagulare) –
factorul I
 Componenta plasmatica

 Proteinele:
› Sintetizate major de catre ficat: albuminele,
fibrinogenul, circa jumatate dintre globuline
› Restul globulinelor – in tesutul limfoid si sistemul
reticulo-endotelial
› Rol in: balanta acido-bazica, activitatea
hormonala, coagulare, mecanisme de transport,
presiunea osmotica, vascozitatea sangvina
› Deficite proteice in diferite boli, cum ar fi:
arsurile, afectare renala, denutritie importanta,
insuficienta hepatica, etc.
Componenta celulara:
eritrocite, leucocite, trombocite
 Hematopoieza - Proprietãţi
 Definiţie: proces de formare a celulelor sangvine
 Proces vital, continuu de-a lungul vieţii
 Începe din VIU
 Parcurge etape distincte
 Proces adaptabil  accelerare în condiţii de stress
 multiple bucle de reglare
 Loc de desfãşurare: Mãduva osoasã
 copil: oase lungi
 adult: oase late
 vârstnic:  ţes. adipos,  cel.
hematologice
 Hematopoieza - Generalitãţi

 Hematopoieza medularã (MO) – condiţii normale

 Hematopoieza extramedularã (în afara MO) – condiţii
patologice: * thalasemia majorã (compensator)
* boli de celulã STEM

 Start: celula STEM pluripotentã  modelul piramidei

 Organizare pe – orizontalã: mai multe compartimente

– verticalã: seriile medulare
Compatimente medulare (CM)

1. CM al celulelor STEM pluripotente

2. CM al celulelor STEM unipotente
3. CM al celulelor blastice cap de serie
4. CM de diferenţiere şi maturaţie
5. CM al celulelor efectorii/mature
 1. CM al celulelor STEM pluripotente

* Proprietãţi esenţiale:
1. Autoreplicare/autoreînnoire
– menţine stocul de celule stem
– o celulã stem  2 celule pluripotente
– activare: stimul puternic + depopularea MO (ex.: post transplant medular)
2. Diferenţiere – celula stem  mieloidã : seria mieloidã
 limfoidã : seria limfoidã
3. Migrare : baza transplant celule stem
4. Homing : repopuleazã MO

* Celula STEM :
– nu se identificã morfologic în MO (asemãnãtoare unui limfocit mic)
– incidenţã f. slabã 0.01% din populaţia celularã MO
– recunoaştere: markeri imunologici fenotipici CD 34 stem pluripotentã
– metoda culturilor – colony forming units (CFU)
2. CM celule stem unipotente
 diferenţiere mai limitatã: neutrofile


 Linii mieloide :  granulocitarã: granulocite  eozinofile

 bazofile

 eritrocitarã - eritroblasticã
 monocitarã
 trombocitarã
 Serii limfoide: B, T, NK (non B – non T )

3. CM celule blastice cap de serie:

 mieloblast
 proeritroblast

 megakarioblast

 monoblast * Blaşti: primele celule identificabile morfologic

 limfoblast
4. CM de diferenţiere şi maturaţie:
 cel mai voluminos

 diferenţierea celularã – caractere morfologice specifice

 produs final: celule efectorii /mature

5. CM celule efectorii /mature:

 Segmentatele

 Eritrocite

 Monocite

 Trombocite

 LB, LT, NK

* Celulele mature : în MO şi în SP (frotiu sangvin, HLG)

* Etapa tisularã (diferenţierea anumitor serii celulare):
 LB în plasmocit secretant de Ig

 monocit  macrofag tisular

 seria limfoidã  ggl. limfatici, timus

Markeri imunologici fenotipici caracteristici de serie:
 s. granulocitarã : CD 13, CD 33

 s. megakariocitarã: CD 61, CD 41, CD 42

 s. monocitarã: CD 14, 11b, HLA – DR

 s. eritrocitarã: CD 36, glicophorina, R-transferina

Markeri caracteristici de etapa de diferentiere:

 CD 34: celula stem – marker de imaturitate;
se pierde pe masurã ce se maturizeazã celula.

Imunofenotipare: a 2-a metodã fundamentalã

pentru studiul populaţiilor celulare
 Hematopoieza intramedularã
* Micromediu specific: nisa medularã – componente:
1. Reteaua fibrilarã: matricea extracelularã: colagen, PG, fibronectinã
2. Celularã: - celule fixe: macrofage, adipocite, fibroblaste, endoteliu capilar
- celule mobile: limfocite, monocite
3. Factori de creştere, CK:
 secretaţi de componenta celularã a micromediului + torent sangvin
 asigurã o retea informaţionalã cu bucle de feedback + si –
 multiple categorii de factori de reglare hematopoietici
 acţioneazã la nivelul  celulei stem, progenitori : CK / IL - IL 3, IL 6, IL 1
 seriilor: GMCSF, MGCSF, GCSF
 roluri:  celule imature – diviziune
 celule mature – îmbunãtãţesc funcţionalitatea
 utilitate farmacologicã / hematologicã (aplazie medularã)
 Neulasta, Filgrastim, Neupogen,
 Eritropoietina – specificã pentru seria eritroidã (anemii din insuf. renalã,
inflamatii cronice, neoplazii hematologice)
 Trombopoietina: factor de creştere pentru seria megakariocitarã
 Seria eritrocitarã

 Produs final: ERITROCIT

 Etape: (1) proeritroblast  (2 ) eritroblast bazofil  (3)
policromatofil  (4) acidofil  (5) reticulocit  (6) eritrocit
 Procese de bazã:
 progresiv dimensiunea: proeritroblast 18 - 20 µ; eritrocit 7.2µ
 modificãri nucleare:  progresivã în dimensiuni (proeritroblast – nucleu
80% din suprafata celularã  eritroblast oxifil – nucleu mic)  se
pierde complet (reticulocite – celule anucleate)
 modificarea tinctorialitãţii: (1), (2) extrem de bazofile – ARN ribozomal,
(3) progresiv acidofil – acumulare Hb, (4) deja incarcat cu Hb, (5) mai
pãstreazã urme de ARNr, neidentificabil cu coloraţii obisnuite (coloraţii
specifice – albastru de briliant crezil )
 modificarea formei: (1) rotund, (6) disc biconcav, 7.2 µ, elastic (formã
absolut necesarã trecerii prin microcirculaţie; capilare ~ 4µ, strãbãtute
datoritã elasticitãţii eritrocitului
 SP - Seria rosie

 Eritrocite – celule rosii

› Rol major:
 Contin hemoglobina, care transporta oxigenul catre
tesuturi
 Participa la transportul dioxidului de carbon (contin
anhidraza carbonica)
› Productia: dupa nastere, exclusiv de catre maduva
hematogena
› Celule anucleate, cu forma de disc biconcav, foarte
elastice; dimensiuni: aprox 7.5 microni
› Durata de viata – aprox 120 de zile.
› Sinteza este controlata de eritropoietina
 Eritropoieza

 Eritropoieza: celula se divide pânã la reticulocit  maturaţie

 Duratã eritropoiezã: 5 – 7 zile
 Duratã de viaţã eritrocit: 120 zile
 Distrucţie = Hemoliza - fiziologicã:
 intramedularã (10-15% din precursori distruşi intramedular)
 extramedularã (sinusoide splenice - eritrocite senescente)
 Echilibru eritropoiezã / hemolizã – menţine constant indicii
eritrocitari (Hb, Ht, nr. Eritrocite, % reticulocite)
 ! Defect de producţie / distrucţie excesivã rupe echilibrul 
anemie
 Granulopoieza

 Celulã cap serie: mieloblast

 Produs final: GRANULOCITE
 Etape: (1) mieloblast  (2) promielocit  (3) mielocit  (4) metamielocit
 (5) nesegmentat  (6) segmentat (neutrofil)
 Modificãri formã & nucleu: (1) 80% nucleu, multi nucleoli; (2) nucleu
excentric, oval; (3) bob de fasole; (4) covrig (5) nucleu polilobat
 Achiziţia de granule  primare/azurofile – mieloperoxidaza (din etapa 2)
 secundare/specifice (din etapa 3):
s. neutrofile: coloraţie neutrã
s. bazofile: tinctorialitate bazofilã
s. eozinofile: coloranţi acizi
 Duratã granulopoiezã: 10 zile
 Duratã de viaţã granulocite: ~ 8-12 ore in circulatie
 2 compartimente: circulator, marginal
 MO : raport G/E 3/1
 SP - Leucocitele

 Functia primara – aparare rapida si puternica

impotriva organismelor straine
 Origine si maturare: MO si organe limfoide
 6 tipuri majore mature:
› Neutrofile (granulocite, segmentate)
› (granulocite) Eozinofile
› (granulocite) Bazofile
› Limfocite
› Monocite
› Plasmocite
 2 grupuri mari: granulocite si leucocite fara
granulatii
 SP - Leucocitele

 Durata de viata in SP este limitata si variabila,

diferite tipuri de leucocite fiind mobilizate la
nevoie:
 Granulocite: 12 ore; diapedeza!
 Monocite: saptamani / luni; macrofage.
 Limfocite: cateva ore in sange, dar pot trai ani de
zile in organele limfoide (limfocite de memorie)
 SP - Leucocitele

 In mod normal, sangele periferic contine

urmatoarele tipuri de leucocite evaluabile de
catre analizorul automat:
 Neutrofile (granulocite segmentate)
 Eozinofile
 Bazofile
 Limfocite
 Monocite
 Seria trombocitarã

 Precursor: megakarioblast Produs final: TROMBOCIT

 Etape: (1) megakarioblast  (2) megakariocit  (3) trombocit
 1 megakariocit  4000 trombocite
 Duratã megakariopoiezã: ~ 10 zile
 Duratã de viaţã trombocit: ~ 7 zile in circulaţie
 Megakarioblast: - suferã progresiv replicare nuclearã cu
endomitoze  se dubleazã materialul nuclear şi citoplasma
 Megakariocit: - celulã gigantã, cu multinucleu (16 - 32 nuclei)
 Trombocit: - celulã maturã anucleatã, dimensiuni ~ 4 µ,
- formare: fragmentarea citoplasmei – “scuturare”
- structurã: membranã cu R glicoproteici I-IX,
citoplasmã cu granule  (serotoninã, factori procoagulanti)
- roluri: hemostaza primara, infl., remaniere plãgi
 SP - Trombocite

 Trombocite = Plachete
 Sunt fragmente celulare anucleate, ce
rezulta din fragmentarea Megakariocitelor
medulare
 Sinteza este controlata de trombopoietina
 Rol – in hemostaza: aderare, activare,
agregare, eliberare substante active (ex:
serotonina – vasoconstrictie)
 Durata de viata = 10-14 zile.
 Seria monocitarã
 Celula cap sere: monoblast Produs final: MONOCIT
 Etape: (1) promonocit  (2) monocit tânãr (3) monocit adult
(nucleu faldat “in steag”)
 Durata de viaţã în circulaţie: ~ 20 – 24 ore
 Apoi se cantoneazã în ţesuturi  macrofag tisular
 Rolurile monocitelor: RI, inflamaţie, procese specifice
 Hematopoieza
 Funcţie fagocitarã: esteraze (coloratii
specifice), lizozim (* lizozim seric/urinar –marker
proliferãri)
 Sistemul monocito-macrofagic / tipuri de macrofage:
 MØ ggl limfatici  celule Kupffer
 Celule mezangiale – R  Celule Langerhans (piele)
 Microglia SNC  MØ splenice
 MØ seroase perit., peric., pl.  MØ medulare
 MØ alveolare
 Seria limfoidã
 *Celule greu de identificat morfologic.
 Celula cap serie: limfoblast Produs final: LB, LT, NK
 LBRIU  secreţie Ig : neutralizare, opsonizare, activare C
 5 – 10% din populaţia limfocitarã în sângele periferic
 Ontogeneza seriei LB: majoritar în MO; exprimã Ig pe
suprafaţã
 Element final = plasmocit:
 celulã ovalã, nucleu rotund, excentric, cromatinã în “roatã
dintaţã”,citoplasmã intens bazofilã
 localizare: ggl. limfatici, MO
 Markeri imunologici:
 prezenţa Ig pe suprafaţa celularã
 CD 79a: marker timpuriu; leucemii acute
 CD 20: marker de maturitate; dispare pe plasmocit
 Seria limfoidã
 LT ~ 60 – 70 % din limfocitele circulante în sângele periferic
 LTh CD 4
 LTcs CD 8
 LT  organ majoritar de limfopoiezã (timus)
 rol în ordonarea şi reglarea rãspunsului imun
 Markeri = Tcell Receptor ancorat pe suprafaţa LT (R tip IG):
 CD 3  de suprafaţã pt. celule mature
 citoplasmatic pt. celule imature
 CD 7, CD 2, CD 5
 CD 4, CD 8 – etapa maturitãţii

 Celula stem  afectarea ei det. afectarea tuturor seriilor

 patologic:  blocaj total(maturatie+diferentiere): leucemii acute
 hematopoieza displazicã: sd. mielodisplazice
o TDT – marker de celulã stem unipotentã limfoidã, de absolutã
imaturitate
FROTIURI DE SANGE PERIFERIC
FROTIURI DE MADUVA
 Investigatii specifice in
Hematologie
 Hemograma
 Frotiul de sange periferic
 Numaratoarea reticulocitelor
 Medulograma; aspiratul medular si biopsia osteomedulara
 Biopsie ganglionara, cutanata
 Imunofenotiparea
 Examenul citogenetic si molecular
 Testul Coombs
 Electroforeza de proteine serice
 Electroforeza de hemoglobina
 Vascozitatea plasmatica
 Coagulograma
HEMOGRAMA
 Hemograma

 Primul pas in evaluarea functiei hematologice si in

diagnosticul patologiei hematologice.
 Hemograma si frotiul de sange periferic ofera informatii
diagnostice importante, permite efectuarea
diagnosticului diferential si oportunitatea testelor
aditionale.
 Elementele din sange:
 eritrocite, leucocite si trombocite.
 Cuantificarea acestor elemente prin metode manuale si
automatice
 Hemograma

 Probele de sange trebuie obtinute in conditii optime

 Factori ce pot influenta rezultatele: gradul de activitate,
nivelul de hidratare, medicatie, sex, varsta, rasa, fumatul,
vechimea probei.
 Sangele este recoltat pe anticoagulant, de preferinta
EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) – inlatura calciul
si previne formarea cheagului de sange, cu efecte
minime morfologice si fizice asupra celulelor.