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La teoría del Germen de la

enfermedad
La epidemiología es la rama de la
salud pública que tiene como
propósito describir y explicar la
dinámica de la salud poblacional,
identificar los elementos que la
componen y comprender las fuerzas
que la gobiernan, a fin de intervenir
en el curso de su desarrollo natural
Actualmente, se acepta que para cumplir
con su cometido la epidemiología
investiga la distribución, frecuencia y
determinantes de las condiciones de salud
en las poblaciones humanas así como las
modalidades y el impacto de las
respuestas sociales instauradas para
atenderlas.
Para la epidemiología, el término
condiciones de salud no se limita a la
ocurrencia de enfermedades y, por esta
razón, su estudio incluye todos aquellos
eventos relacionados directa o
indirectamente con la salud,
comprendiendo este concepto en forma
amplia. En consecuencia, la epidemiología
investiga, bajo una perspectiva
poblacional:
1. La distribución, frecuencia y
determinantes de la enfermedad y sus
consecuencias biológicas, psicológicas y
sociales;
2. La distribución y frecuencia de los
marcadores de enfermedad;
3. La distribución, frecuencia y
determinantes de los riesgos para la
salud;
4. Las formas de control de las
enfermedades, de sus consecuencias y de
sus riesgos, y
6. Las modalidades e impacto de las
respuestas adoptadas para atender todos
estos eventos.

7. Para su operación, la epidemiología


combina principios y conocimientos
generados por las ciencias biológicas y
sociales y aplica metodologías de
naturaleza cuantitativa y cualitativa
Cultivo de microorganismos

Los microorganismos tienen distintas


necesidades nutritivas, basadas en mecanismos
de síntesis propios y rutas metabólicas. Los
fototrofos usan la luz mientras que los
quimiotrofos usan compuestos químicos.
Los seres vivos pueden usar distintas fuentes
para conseguir los elementos esenciales para
su supervivencia. La principales fuentes son las
de carbono y energía pero también son
necesarias otras para obtener nitrógeno, azufre,
etc
- FUENTE DE CARBONO: CO2: autotrofos.
Compuesto químico orgánico: Heterotrofo.
Algunos poseen un metabolismo obligado o
facultativo.

- FUENTE DE ENERGÍA: Luz: autotrofos.


Compuestos químicos: Quimiotrofos.

- FUENTE DE NITRÓGENO: Las plantas usan


nitratos. Los animales usan nitrógeno orgánico.
Los microorganismos usan nitrógeno por
fijación, nitrógeno inorgánico y orgánico.
- FUENTE DE AZUFRE: Las plantas usan
sulfatos, (sales inorgánicas). Los animales
usan proteínas, (compuestos orgánicos).
Los microorganismos usan de todo,
inorgánico (SO42-), orgánico
(aminoácido), S0, etc.
- FUENTES DE FÓSFORO. En general
son sales
CULTIVOS. Un cultivo es el crecimiento de
poblaciones microbianas de forma
controlada en un medio artificial. Un
cultivo según su composición química
puede ser:

Sintéticos: Tiene una composición química


definida. Cuanto más simple es mejor
purificamos los productos de la bacteria.
•Complejos: su composición es no
conocida, no sirve para purificar
los compuestos pero en ellos
puede crecer cualquier
microorganismo. (Ej. caldo
glucosado). Según el estado
físico del medio los cultivos
pueden ser: Líquido, sólido,
semisólido. Depende de si el agar
es más o menos gelatinoso.
El agar es un compuesto formado
por agarosa que es un polímero
de galactosa al 70% y de
agaropectina al 30%. Es sólido
cuando existe el 1.5-2% de agar,
semisólido (para estudios de
mivilidad) cuando la
concentración es de 0.15-04% y
es líquido cuando hay menos del
0.15% de agar.
• Medios enriquecidos: Añaden nutrientes a
los cultivos donde el microorganismo
exige mucho. (Ej. sangre para que crezca
Hemofilus)

• Medios selectivos: Añaden compuestos al


agar que permiten el crecimiento selectivo
de los microorganismos. Ej. Cristal violeta:
sólo crecen Gram-; Maltosa: Sólo crecen
los que tengan la enzima maltasa;
Penicilina: sólo crecen eucariotas; etc.)
Medios diferenciales: Los
microorganismos crecen de forma
diferente, añadiendo al medio sustancias
especiales (sangre). Se usa también viraje
de colores. Ej. en sangre diferenciamos
los organismos hemolíticos de los que no
los son; en EMB (eosina azul de metileno
vemos los que aprovechan lactosa de los
que no; medio McConky (rojo neutro); en
sales de pb vemos los productores de
SH2 que dan un precipitado negro de lo
que no lo producen.
Un ejemplo típico es el caldo común, que
es glucosa más extracto de carne, y
peptona , se ajusta el pH, se añade
NaOH, tamponamos, filtramos,
espesamos y por último esterilizamos.
SIEMBRA: TÉCNICAS E INSTRUMENTOS:
- INSTRUMENTOS: • Asa de siembra:
picadura. • Asa de vidrio. • Pipeta Pasteur.
- TÉCNICAS: • De líquido a placa: Se puede
hacer de dos formas: a) Estría en placa,
Asa de cultivo asa de vidrio. b) Extensión
en placa.• De líquido a tubo: Se puede
hacer: a) En tubo inclinado. Aumenta la
superficie. b) En Tubo no inclinado. Por
picadura. c) Semisólido. Por picadura.•
También se puede transferir a un cultivo
puro.
OBTENCIÓN DE CULTIVOS PUROS

1. Siembra en superficie. Extensión y estría.


2. Vertido en placa. Mezclando los
microorganismos con agar fundido a 44ºC, y se
echa luego sobre la placa. Los microorganismos
crecen en la superficie y dentro
3. Técnicas de enriquecimiento. Aplicar el
elemento adecuado (por ejemplo benzoato) al
tubo de ensayo, se aíslan microorganismos que
no se aíslan con los métodos anteriores y
que están en pequeñas cantidades (como
pueden ser aquellos que sólo usan
benzoato). Se debe realizar varias veces
para asegurarnos que tenemos un cultivo
puro. (Otros ejemplos: elevada
temperatura para termófilos;
calentamiento a 80ºC para esporulados y
termófilos.)
4. Dilución seriada. Sólo aíslo el
microorganismo más abundante. (Lister
con Streptococcus lactis hace diluciones,
cada dilución la siembra en 20 tubos,
cuando de un dilución dólo crece el 5% la
probabilidad de que en ese tubo crezca 1
aólo tipo de microorganismo es del 4.8%,
así estamos seguros de que sólo existe un
tipo de microorganismo).
5. Micromanipulador: aislamos una sola
célula utilizando este aparato.
6. Aislamiento de microorganismos anaerobios.
Micromanipulados. Obtenemos los organismos
anaerobios por una adición de agar a 44ºC,
mezclamos y tapamos con parafina (aceite
estéril). Eliminamos el O2 con agentes
reductores (tioglicolato, añadimos un colorante
REDOX para ver cuando se ha reducido), con
una vela que consuma el oxígeno, usamos la
jarra de anaerobios (sistema que produce CO2
+ H2 y un catalizador que consume O2). Cuanto
más sensibles son más precauciones tenemos
que tomar. PARAFINA
6. Aislamiento de microorganismos anaerobios.
Micromanipulados. Obtenemos los organismos
anaerobios por una adición de agar a 44ºC,
mezclamos y tapamos con parafina (aceite
estéril). Eliminamos el O2 con agentes
reductores (tioglicolato, añadimos un colorante
REDOX para ver cuando se ha reducido), con
una vela que consuma el oxígeno, usamos la
jarra de anaerobios (sistema que produce CO2
+ H2 y un catalizador que consume O2). Cuanto
más sensibles son más precauciones tenemos
que tomar. PARAFINA
CARACTERIZACIÓN DE CULTIVOS PUROS
• Las colonias deben ser iguales en forma,
tamaño y color.
• Que no existan formas inhibidas.
• Al microscopio deben tener un aspecto común.
• Tiene que tener iguales propiedades
tintoriales.
• Deben ser bioquímicamente y fisiológicamente
iguales.
.- Una regla importante es no coger nunca de la
primera colonia.
MANTENIMIENTO
1.- Debemos transferir periódicamente, ya que los
tubos de agar se secan, se evapora el agua.
2.- Se debe cubrir con parafina, con lo cual la
transferencia se puede hacer más tarde,
disminuye el metabolismo y tardan en
envejecer.
3.- Se disminuye la temperatura, congelamos
las células. Para proteger las células y que no
se formen cristales que las dañen se usa el
glicerol
4.- La liofilización es la sublimación a alto vacío
de las muestras congeladas con rapidez.

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