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GENETICA BACTERIANA

Curso de Microbiología
Dr. William Guzmán Sánche
z
La genética analiza la herencia o la constancia
y cambio de las funciones fisiológicas de los se
res vivos.
La unidad de la herencia es el GEN que es un s
egmento de DNA que contiene en su secuencia
nucleótidos que contienen información para un
a propiedad bioquímica o fisiológica específica.
El nucleótido es la unidad básica del ADN cons
tituido por: un azúcar (pentosa), un grupo fosfór
ico y una base púrica o pirimídica.
Las bases son las únicas que cambian .
Cada 3 bases codifica un codón.
Estructura y función del genoma ba
cteriano
El material genético de las bacterias se en
cuentra en el citoplasma, se le denomina
nucleoide, cuerpo nuclear, región nuclear,
o cromosoma bacteriano

Esta compuesto de alrededor de 80% de


DNA, 10% de RNA y 10% de proteínas (R
NA polimerasa).
En 1963 se logro aislar y extender el crom
osoma de E. coli, determinándose que tien
e una longitud de 1 mm. Es una tira circula
r doble y que se encuentra super enrollad
o.
El termino genoma se refiere al conjunto c
ompleto de elementos genéticos (genes) d
entro de la célula.
Los procesos genéticos requieren tres tipo
s de polímeros:
Acido Desoxirribonucleico (DNA).
Acido Ribonucleico (RNA)
Proteínas.
DNA:
El cromosoma bacteriano único contiene d
os tiras complementarias de DNA que est
án enrolladas alrededor una de la otra en
patrón helicoidal, con los extremos unidos
para formar una molécula circular.
Las moléculas de DNA son de doble cade
na con bases complementarias. Esta cara
cterística le permite a una de las cadenas
proporcionar la información para el copiad
o de la información en la otra cadena.
Cada par de bases esta compuesto por un
a purina y una pirimidina.
Las purinas de una cadena forman puente
s de hidrogeno con las pirimidinas.
El par A-T con 2 uniones puente de H.
El par G-C con tres uniones.
Cada una de las cuatro bases esta unida
a una fosfo-2’-desoxiribosa para formar un
nucleótido.
La longitud de una molécula de DNA se ex
presa en miles de pares de bases o en kil
obases (kb).
El cromosoma de una bacteria, E. coli, es
una molécula circular única que contiene a
lrededor de 4,500,000 pares de bases o 4
500 kb. Con una longitud aproximada de 1
mm.
RNA:

Existen 3 diferencias entre la química d


el DNA y la del RNA:
1. Las macromoléculas del RNA contien
en el azúcar ribosa en lugar de desoxi
rribosa.
2. El RNA tiene la base uracilo en lugar d
e timina.
3. El RNA no es una molécula de tira do
ble
Las bacterias contienen 3 tipos de RNA:

1. RNAm: (mensajero), su función es copiar el c


ódigo genético del gen (DNA cromosómico) y
llevar este mensaje al sitio de síntesis de prot
eínas (Ribosomas).

2. RNAt (transferencia), traducción del mensaje


de RNA en una secuencia especifica de amin
oácidos.

3. RNA (ribosomal) síntesis de proteínas.


ENZIMAS

1. Toposisomerasa II: promueve el super


enrollarmiento (DNA girasa)
2. Toposisomerasa I: controla el desenrr
t
ollamiento.
3. RNA polimerasa: hace que las dos tira
s de DNA se desenrollen de modo qu
e se pueda transcribir la información.
4. DNA ligasa: une los fragmentos
sintetizados.

5. Primasa: inicia la síntesis de un f


ragmento roto.
RECOMBINACION GENETICA
Es el proceso por el que los elementos ge
néticos contenidos en dos genomas separ
ados se juntan en una unidad.

Trae como consecuencia un cambio.

Se transfieren genes completos, grupos d


e genes o cromosomas completos.
Formas de Recombinación
Los genes que están en el cromosoma de las bacterias y en l
os plásmidos son aquellos que portan funciones especiales.
Hay tres mecanismos que explican el pasaje de genes de una
bacteria a otra:
Transformación: el DNA libre se incorpor
a a una célula.
Transducción: La transferencia del DNA
donador esta mediada por un virus.(fago).
Conjugación: la transferencia de DNA im
plica contacto célula – célula y la presenci
a de un plásmido y de una estructura llam
ada pili.
I- TRANSFORMACION
Este descubrimiento fue uno de los hec
hos mas relevantes, pues condujo a ex
perimentos que probaron que el DNA e
s el material genético. Griffith (1920).
Trabajos con Streptococcus pneumon
iae.
No todas las bacterias tienen esta capacid
ad, sino células competentes que son cap
aces de tomar una molécula de DNA y lo i
ntegran a su cromosoma.

Intervienen: proteínas especiales que inter


vienen en el trasporte e incorporación del
DNA.
Transformacion: Etapas
1. Unión del DNA: proteína asociada a la
membrana: autolisina y nucleasas.
2. Incorporacion del DNA:
Primero se fija reversiblemente, luego se
vuelve irreversible.
3. Integracion del DNA: proteína de unión,
en el cromosoma proteína RecA
Cuando una célula es capaz de tomar una
molécula o un fragmento de DNA y transfo
rmarse se denomina célula competente.
Solo algunas cepas poseen esta caracterí
stica, parece ser una propiedad hereditari
a.
TRANSFORMACION

Es la mas utilizada por la ingeniería genética co


nsiste en la captación directa del DNA del don
ador por la bacteria receptora o el pasaje de plá
smidos de una bacteria a otra. Esta puede ser
natural o puede ser forzada. Cuando es forzada
se utiliza el CaCl ayuda a que salga el DNA.
El shock eléctrico hace que salga el DNA de la
bacteria.
Experimento de Griffith

Neumococo vivo ca Ratón muerto


psulado. (S) Se aíslan cepas lisas

Neumococo muerto
Ratón vivo.
por calor

Neumococo vivo ru
goso (R) no capsula Ratón vivo.
do
Neumococo (R) viv
Ratón muerto: se aíslan ce
o+
pas S
Neumococo muerto
II.- TRANSDUCCION

El DNA se transfiere de una célula a otra


por medio de un virus: bacteriófago.
Dos mecanismos puede
n ocurrir durante la TRA
NSDUCCION
Ciclo lítico.

Ciclo lisogénico.
CICLO LITICO
CICLO LISOGENICO
El ácido nucleico viral no expresa sus ge
nes, se integra en el genoma de la célula
o queda libre a modo de plásmido.

El virus queda en forma de provirus.

Por distintos factores el provirus puede


comenzar un ciclo normal o lítico.
CICLO LISOGENICO
Transducción
Transducción
Cuando un fago infecta a una bacteria, ca
pta fragmentos del genoma de la célula ho
spedadora.
Al infectar a otra bacteria el fago transduct
or puede transferir sus propios genes y ta
mbién los de la célula hospedadora de la c
ual procede.
Transducción
Puede ocurrir de 2 formas:
1. Transducción generalizada:
Cualquier porción del genoma bacteri
ano pasa a formar parte del genoma de
la partícula vírica.
Transducción
2. Transduccion especializada:
El DNA de una región especifica del cro
mosoma del hospedador se integra direc
tamente en el genoma del virus.

No todos los fagos pueden transducir, ni t


odas las bacterias son transducibles.
Transducción
El mecanismo de transducción fue descub
ierto por Zinder y Lederberg (1952).
Estudiando la recombinación genética entr
e diferentes cepas de Salmonella typhimur
ium.
III.-CONJUGACION
Implica el contacto célula – célula.
El material genético transferido puede ser
un plasmido, o una porción del cromosom
a.
Una célula donadora trasmite la informaci
ón genética a otra célula, la receptora.
La célula donadora posee el pili o pelo sex
ual.
CONJUGACION
conjugación
La capacidad de la células para actuar co
mo donantes se debe a la presencia de fa
ctor f o factor de fertilidad.
Las células que carecen de factor f, son re
ceptoras.
PLASMIDOS
Son elementos genéticos que se replican i
ndependientemente del cromosoma.
Se encuentran dentro de la célula.
Existen varios tipos de plasmidos.
En E coli, se han aislado mas de 300
Tipos de plásmidos
Plasmidos conjugativos: codifican pili sexu
ales y proteínas necesarias para la transfe
rencia de DNA.
Plásmidos R (resistencia a los antibióticos,
mercurio).
Plàsmidos de Producción de bacteriocinas
y antibióticos.
Tipos de plásmidos
Plasmidos de funciones fisiológicas:
Utilización de urea,
Fermentación de carbohidratos.
Producción de pigmentos.
Plasmidos de virulencia: producción de tox
inas, enzimas, tumores.
E coli, posee un plasmido conjugativo llam
ado Factor F:
- Capacidad para sintetizar pili.
- Movilización del DNA para su transfere
ncia.
- Alteración de receptores de la superficie
de la célula.
Terapia genica
MUTACION
Es un cambio hereditario en la secuencia
de bases del acido nucleico que constituy
e el genoma de un organismo.
Fenotipo: las características observables d
e un organismo.
Genotipo: constitución génica precisa de u
n organismo. (conjunto de genes)
MUTACIONES
Cepa silvestre: cepa aislada de la naturale
za.

Se pueden obtener mutantes de una cepa


silvestre o de una derivada de esta.

Pueden ocurrir cambios perjudiciales, neut


ros o beneficiosos.
MUTACIONES
M. Espontáneas.
Ocurren en la naturaleza, sin ser provocada
s.
Ej: efectos de la radiación natural, que altera
n la estructura de las bases de DNA.
Errores en el apareamiento de bases.
Tipos de mutantes: No capsulado, inmóvil,
fermentación de azucares.
MUTACION
Mutaciones inducidas por mutágenos, sust
ancias que inducen a mutaciones.
Mutágenos químicos: reaccionan directam
ente con el DNA, ocasionando cambios qu
ímicos, en las bases.
Acido nitroso, bromuro de etidio etc.
Mutágenos físicos: rayos UV, rayos X.
la luz ultravioleta cuando llega a una bacte
ria afecta directamente al cromosoma y pr
oduce dímeros de timina

Los mutágenos químicos pueden alterar


la estructura física o química del DNA .
Ejemplo: el HNO2 sustituye los grupos a
minos por radicales oxidrilo.
TIPOS DE MUTACION
1. Mutación por sustitución
2. Mutación por supresión
3. Mutación por inversión
4. Mutación por inserción

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