Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
criopreservação de tecido
testicular de cateto (Pecari
tajacu)
Paula L. C. de Lima, Andreia M. da Silva, Érica C. G. Praxedes,
Samara S. J. Moreira, Alexandre R. Silva
Introdução
• O cateto ou caititu - família
Tayassuidae
• Habita as Américas
• Equilíbrio na cadeia alimentar
Fonte: www.iucnredlist.org
• A população é considerável
estável
• Declínio populacional
(IUCN, 2012) 3
Introdução
Criopreservação:
4
Congelação lenta X Vitrificação
Congelação lenta Vitrificação
Fonte: www.indrel.com.br
7
Metodologia
Metodologia
CEMAS – n° 1478912
n= 2 animais
Nitrogênio liquido(-196ºC)
Fonte: Peixoto et al, 2015
6 fragmentos – 9 mm³
2 semanas Aquecido a 37°C
Controle AVALIAÇÕES:
Morfologia Viabilidade
20ºC / 5min
2 fragmentos
• MEM com 10% SFB
• 0,25M Sacarose
• 0,75M DMSO
• 0,75M EG
-196ºC
20ºC / 5min
2 fragmentos
• MEM 10% de SFB
• 0,25M Sacarose
• 1,5M DMSO
• 1,5M EG
-196ºC
25ºC/1min
0,5mol/L 0,25mol/L 0,00mol/L
14
Metodologia – Análise da Morfologia
Escores de 0 a 3
• Separação da
membrana basal
• Vacuolização
• Integridade estrutural
• Perda de células
• Ruptura da membrana
basal 30 túbulos seminíferos
15
Metodologia- Estatística
• Média e erro padrão (±EP)
• Viabilidade - teste Tukey
• Morfologia - teste de Fisher
• (P < 0,05).
16
Resultados
A B C
Figura 2 - Fotomicrografia de lâminas histológicas contendo túbulos seminíferos (TS) e criopreservados (A,
B e C). Em A visualizamos TS com a estrutura preservada (escore 1), em B, com a membrana basal rompida
(escore 3) e em C, TS com perda celular (escore 2). Aumento de 20µm
(FAES e GOSSENS, 2017) 20
Conclusão
O tecido testicular de catetos poderia ser criopreservado por
ambas as técnicas, porém com relação ao grau de tumefação
celular e ruptura de membrana basal a vitrificação em superfície
sólida resultou em menos danos à estrutura do túbulo
seminífero.
21
Agradecimentos
Diferentes métodos de
criopreservação de tecido
testicular de cateto (Pecari
tajacu)
Paula L. C. de Lima, Andreia M. da Silva, Érica C. G. Praxedes,
Samara S. J. Moreira, Alexandre R. Silva